PARG基因沉默对小鼠结肠癌CT26细胞肝转移影响

 摘要：目的 探讨多聚（腺苷二磷酸核糖）水解酶（PARG）基因沉默对小鼠结肠癌CT26细胞肝脏转移的影响。方法 小鼠随机分成3组,脾脏包膜下注射PARG-shRNA慢病毒载体转染CT26细胞悬液,以未转染组和空载体转染组为对照。比较各组脾脏肝脏瘤结节数量、大小;Western blot检测PARG、PARP、NF-κB、integrin-β1、MMP-2和MMP-9的表达。结果 PARG基因沉默组小鼠脾脏移植瘤大小及肝脏转移瘤结节分级均明显低于对照组（P<0.05）;PARG基因沉默后,脾脏移植瘤组织中PARG（0.0105±0.0028）、PARP（0.1786±0.024）、NF-κB（0.1678±0.0359）、integrin-β1、MMP-2和MMP-9的蛋白表达量明显低于对照组（P<0.05）。结论 PARG基因沉默后能抑制小鼠脾脏移植瘤的生长及肝脏转移瘤结节的形成,其作用可能是通过下调PARP、 NF-κB及其下游依赖性基因的表达而实现的。     

薄层小视野非压脂T2WI联合DWI对宫颈癌术前分期的价值

目的：探讨薄层小视野非压脂T2WI联合弥散加权成像（DWI）技术对宫颈癌术前MRI分期诊断的准确性。方法：126例经活检证实的宫颈癌患者纳入研究,术前MRI检查采用薄层小视野非压脂T2WI及DWI序列,以术后病理为对照,计算术前MRI分期的特异度、灵敏度、阴性预测值（NPV）、阳性预测值（PPV）和准确度。采用Kappa检验分析宫颈癌术前MRI分期与术后病理的一致性。结果：MRI分期ⅠB1、ⅠB2、ⅠB3、ⅡA1、ⅡA2和ⅢC1分别为23例、36例、18例、25例、17例和7例,病理分期ⅠB1、ⅠB2、ⅠB3、ⅡA1、ⅡA2和ⅢC1分别为21例、38例、15例、24例、18例和10例。MRI对于宫颈癌ⅠB1、ⅠB2、ⅠB3、ⅡA1、ⅡA2和ⅢC1分期的准确度分别为98.41%、100%、97.62%、94.44%、89.68%和94.44%,总准确度为95.77%,与病理结果有较好的一致性（Kappa值=0.842,P<0.001）。结论：薄层小视野非压脂T2WI联合DWI对宫颈癌术前分期的诊断效能较高,具有临床推广价值。     

伏立康唑对HEK-293细胞中快速延迟整流钾通道及电压门控钠通道表达和功能的影响

目的 观察伏立康唑对快速延迟整流钾通道(hERG)及电压门控钠通道(Nav1.5)表达和功能的影响.方法 分别用浓度为0,2.5,5,10,50μmol/L伏立康唑干预稳定表达hERG通道蛋白及Nav1.5通道蛋白的HEK-293细胞24 h,Western blot检测hERG及Nav1.5的表达水平.用5μmol/...     

线粒体通透性转换孔在内吗啡肽-1后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨线粒体通透性转换孔（MPTP）的开放对内吗啡肽-1后处理减轻心肌缺血再灌注损伤的作用。方法将45只雄性SD 大鼠随机分为5组（n=9/组）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）、内吗啡肽-1后处理组（EM50组）、线粒体通透性转换孔开放剂苍 术苷后处理组（Atr组）和内吗啡肽-1+苍术苷后处理组（EM50+Atr组）。建立大鼠在体心肌缺血再灌注模型,通过经颈动脉插管至左 心室实时监测血流动力学,记录各组大鼠的血流动力学指标,再灌结束后采集大鼠血浆,检测乳酸脱氢酶、肌酸激酶、心肌肌钙蛋白I、 白介素-6、肿瘤坏死因子-α,氧化应激指标超氧化物歧化酶和丙二醛,细胞色素C等生化指标,大鼠心肌组织HE染色,采用Evans blue 和TTC双染色法检测心肌梗死面积,Western blot检测心肌组织中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和cleaved caspase-3的表达。结果与S 组比较,IR组心率和血压降低（P<0.05）;与IR组比较,EM50组心率和血压有所增高（P<0.05）;血浆中乳酸脱氢酶、肌酸激酶、心肌肌 钙蛋白I、白介素-6、肿瘤坏死因子-α、丙二醛、细胞色素C含量或活性下降（P<0.05）,氧化应激指标超氧化物歧化酶活性增加（P< 0.05）;心肌梗死面积减少（P<0.05）;Bax和cleaved caspase-3蛋白表达量降低（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达量升高（P<0.05）;与EM50组 比较,EM50+Atr组心率和血压降低（P<0.05）;血浆中乳酸脱氢酶、肌酸激酶、心肌肌钙蛋白I、白介素-6、肿瘤坏死因子-α、丙二醛、细 胞色素C含量或活性增加（P<0.05）,超氧化物歧化酶活性降低（P<0.05）;心肌梗死面积增加（P<0.05）;Bax和cleaved caspase-3蛋白 表达量升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达量降低（P<0.05）。结论内吗啡肽-1后处理可能通过抑制MPTP的开放,减少线粒体中Cyt-C 的释放,下调凋亡相关蛋白cleaved caspase-3的表达,减少心肌细胞凋亡,减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,发挥心肌保护作用。     

干扰素基因刺激因子激动剂的研究进展

cGAS-STING通路作为固有免疫系统的重要组成部分,可以识别来自病原微生物和宿主细胞的胞质DNA,诱导Ⅰ型干扰素的分泌和炎症细胞因子的生成,激活机体免疫系统,抵抗病原微生物的入侵及增强机体抗肿瘤活性等。该文简要介绍了cGAS-STING通路的生物学功能,主要聚焦于STING激动剂的研究进展,包括CDN类和Non-CDN类STING激动剂的药理作用及其研究阶段,总结与展望STING激动剂研发过程中的问题与挑战,以期为后续相关药物的研发和疾病治疗提供思路。     

第三方脐血辅助输注的单倍型造血干细胞移植36例疗效分析

目的探讨经第三方脐血辅助输注的异基因造血干细胞移植患者植入和移植后严重移植物抗宿主病(GVHD)情况与第三方脐血之间的关系。方法回顾性分析我中心2012年1月至2013年4月进行的使用脐血辅助输注的异基因造血干细胞移植患者36例的临床资料。结果所有患者均为恶性血液病,达到完全缓解者55.6%,约一半为未缓解或复发患者。患者年龄为4⁵5岁,中位年龄15.0岁。患者男女比例为1.4∶1。供者年龄为455岁,中位年龄15.0岁。患者男女比例为1.4∶1。供者年龄为4⁵8岁,中位年龄36.0岁。从供者与患者关系来看,父母供子女者占75.0%,子女供父母者占11.1%,半相合同胞供者占13.9%,三种供者来源比较,存在统计学差异(P<0.05),提示父母供子女者显著多于另两组,另两组间无统计学差异。从供受者性别比率来看,男供男比率为33.3%,男供女为27.8%,女供男为16.7%,女供女为22.2%,四组间比较无统计学差异,提示四组供受者性别比率无统计学差异。回输MNC(9.62±2.9)×108/kg(患者体重),CD34+细胞(3.87±1.36)×106/kg。移植后1.5个月复查STR-PCR,34例为100%供者型,仅2例为非完全供者型,1周后复查均转变为100%供者型。观察至移植后100 d,未发生GVHD者占55.6%,发生GVHD者44.4%,其中发生Ⅰ58岁,中位年龄36.0岁。从供者与患者关系来看,父母供子女者占75.0%,子女供父母者占11.1%,半相合同胞供者占13.9%,三种供者来源比较,存在统计学差异(P<0.05),提示父母供子女者显著多于另两组,另两组间无统计学差异。从供受者性别比率来看,男供男比率为33.3%,男供女为27.8%,女供男为16.7%,女供女为22.2%,四组间比较无统计学差异,提示四组供受者性别比率无统计学差异。回输MNC(9.62±2.9)×108/kg(患者体重),CD34+细胞(3.87±1.36)×106/kg。移植后1.5个月复查STR-PCR,34例为100%供者型,仅2例为非完全供者型,1周后复查均转变为100%供者型。观察至移植后100 d,未发生GVHD者占55.6%,发生GVHD者44.4%,其中发生Ⅰ^Ⅱ度GVHD者占38.9%,ⅢⅡ度GVHD者占38.9%,Ⅲ^Ⅳ度GVHD者占5.6%。结论从临床上可认为使用脐血进行辅助输注在一定程度上促进供者造血干细胞成功植入,造血恢复快且稳定,治疗效果好,而发生严重GVHD的概率也大大降低,值得进一步深入研究。     

树突状细胞表达的PD-L1的研究进展

树突状细胞（DC）是专职的抗原提呈细胞,通过表达多种免疫调节分子在调节T细胞免疫反应中起关键作用。其表达的PD-L1是近年来新发现的B7家族的负性共刺激分子,与其相应受体结合,能够传递负性刺激信号导致T细胞反应无力,抑制细胞因子的分泌,诱导活化T细胞凋亡,最终诱导免疫耐受,介导肿瘤免疫逃逸,并在自身免疫性疾病,病毒,细菌感染等免疫反应中起重要作用。     

基于早孕期非整倍体筛查参数的子痫前期筛查效率评估

目的将本地区人群早孕期非整倍体筛查参数即妊娠相关血浆蛋白A(pregnancy associated plasma protein A, PAPP-A)代入英国胎儿医学基金会(Fetal Medicine Foundation, FMF)竞争风险模型, 评估早孕期筛查子痫前期的效能。方法基于2017年1月至2020年9月在南京大学医学院附属鼓楼医院行早孕期唐氏综合征筛查的单胎妊娠妇女的前瞻性队列, 以英国FMF网站(fetalmedicine.org)公开的算法, 将平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)、子宫动脉搏动指数(uterine artery pulsatility index, UtA-PI)和PAPP-A转化为中位数的倍数(multiple of median, MoM), 并计算单独母体因素, 或母体因素联合MAP、UtA-PI、PAPP-A中的1项、2项或3项的风险结果。采用χ2检验、Fisher精确概率法或秩和检验进行组间比较;两两比较采用Bonferroni法校正。采用受试者工作特征(receiver operating charac...     

何首乌多糖的结构表征及其免疫调节活性研究

目的从何首乌Polygonum multiflorum中提取分离多糖,对其结构进行表征,并评价其免疫调节活性。方法采用水提、醇沉法从何首乌中提取粗多糖,经Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换色谱柱分离纯化得到何首乌多糖(PMT)。利用高效凝胶渗透色谱-十八角度激光光散射联用法(HPGPC-MALLS)测定PMT的绝对分子质量,采用PMP柱前衍生-高效液相色谱法(HPLC)测定单糖组成。采用二维核磁共振波谱(2D-NMR)对PMT的结构进行表征。采用四甲偶氮唑盐(MTT)法、中性红比色法和Griess法分别检测PMT对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的生长、吞噬活性和释放一氧化氮(NO)能力的影响。结果 PMT是一种α-1,4-葡聚糖,其绝对分子质量为3.96×105。PMT可显著促进RAW264.7细胞的增殖,促进细胞的吞噬能力,增加NO的释放量。结论何首乌来源的α-1,4-葡聚糖具有显著的免疫调节活性,具有药物开发潜力。