结核分枝杆菌稳定L型利福平耐药性基因的研究

目的探讨细胞壁缺陷结核分枝杆菌形成利福平耐药性的分子机制。方法将结核分枝杆菌分别接种于含利福平与不含利福平的非高渗透压液体培养基内培养,逐日在倒置显微镜下观察L型的形成情况。L型形成和生长后,滤过培养物分离L型,在不含诱导剂的非高渗液体培养基内传代培养获得L型纯培养物。用结核分枝杆菌利福平耐药性相关基因(rpoB基因)引物分别对自发形成的稳定L型及诱导形成的稳定L型的染色体DNA进行PCR扩增,扩增产物分别以琼脂糖凝胶电泳及PCR-DS方法进行检测和分析。结果结核分枝杆菌既可在非高渗透压培养基内自发形成细胞壁缺陷细菌并成为稳定L型,也可在最低抑菌浓度的利福平作用下发生细胞壁缺陷并成为稳定L型。PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳可见自发形成和诱导形成的稳定L型均形成与其亲代细菌型一致的DNA条带,序列分析显示具有与其亲代细菌型相同的碱基序列。结论结核分枝杆菌在非高渗透压培养基内既可以自发地形成L型,也可以被利福平诱导形成L型。结核分枝杆菌稳定L型具有明显的利福平耐药性,但其相关rpoB基因并没有发生突变。提示结核分枝杆菌的利福平耐药性变异不一定同rpoB基因突变有关,细胞壁缺陷也是导致结核分枝杆菌形成利福平耐药性的一个重要机制。     

卵黄抗流感病毒抗体的制备

<正> 据文献报道,用抗原免疫鸡,可从其所产的鸡蛋卵黄中制取相应特异性的IgG抗体,其含量高于血清IgG抗体。我们参考类似的方法,成功地制取特异性流感病毒抗体,并对其活性进行了分析。 材料和方法 一、流感病毒抗原:为本教研室传代保藏的FM_1鼠肺适应株。用常规方法接种鸡胚尿囊腔传代,至病毒血凝滴度达1:320以     

电针结合牵引治疗腰椎间盘突出症42例临床观察

2006年6月至2008年4月．我们采用电针配合牵引治疗腰椎间盘突出症（lumbar disc herniation,LDH）42例,并设口服塞来昔布胶囊治疗作对照．取得较好疗效,现报告如下。     

细菌壁缺陷对沙门菌代谢特性影响

目的了解细胞壁缺陷沙门菌的代谢特性、某些酶活性及化学构成的特点,探讨细胞壁缺陷对沙门菌代谢的影响及其可能机制.方法定量检测与分析伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌及其经L型变异后形成的细胞突变株(CWDM)和伤寒沙门菌CWDM返祖菌的细胞裂解物中无机离子磷(PO43-)、镁(Mg2+)、钙(Ca2+)、及总蛋白、三酰甘油(TG)、胆固醇(Tch)含量及某些代谢酶的活性,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)检测伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的细菌型、CWDMs及伤寒沙门菌CWDM返祖菌的乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶同功酶.结果沙门菌CWDMs的PO43-、Mg2+、Ca2+含量明显低于其亲代细菌型和伤寒沙门菌粗糙型返祖菌( P＜0.01).两菌的CWDMs均可检测出Tch和TG,而其亲代细菌型及伤寒沙门菌返祖菌则不能检出Tch和TG.代谢酶活性检测显示两菌的CWDMs乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)的活性明显低于其亲代细菌型或返祖菌(P＜0.01).PAGE检测显示两菌的CWDMs及其亲代细菌型和伤寒沙门菌返祖菌均具有乳酸脱氧酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)同功酶活性,细菌型及返祖菌有4种不同泳动速率的LDH同功酶,CWDMs仅显示2种快泳动的LDH同功酶,但缺乏慢泳动的2种LDH同功酶.两菌的细菌型和伤寒沙门菌粗糙型返祖菌经PAGE电泳可见一条漫泳动MDH同功酶带,CWDMs电泳后可见快慢泳动2条MDH同功酶带.分光光度法检测证实,细菌型与粗糙型的MDH活性相似;CWDMs的活性则明显较低.结论细胞壁缺陷可导致沙门菌的多种代谢酶活性及某些离子含量明显降低,具有与其亲代细菌型不相同的乳酸脱氧酶同功酶和苹果酸脱氨酶同功酶谱以发显著的Tch和TG代谢活性.由于沙门菌的细胞壁缺陷突变株在获得外源遗传物质时能够有规律地返祖并恢复与其亲代细菌型相同的各种代谢特性,提示细胞壁缺陷所导致沙门菌的代谢改变极可能与相关基因的的表达被抑制或开放有关.在沙门菌的染色体上可能存在有胆固醇代谢等基因,也可能是由于细胞壁缺陷导致了沙门菌的基因发生重排.     

细胞壁缺陷与细菌的演变

演变(evolution)或进化是自然界生物中存在的普遍现象,演变使生物的性状得以日趋完善和种群得以更好地发展.在生物界,细菌是能够在人工培养基上独立生长繁殖的体积最小、结构最简单的原核单细胞生物.由于细菌不但具有代谢活动活跃、生长繁殖迅速等特点,而且在细菌分类群中还保留了原始生物进化过程中的某些痕迹,因此细菌已成为生物学界观察与研究生物演变现象及机制的重要对象之一.     

多发性骨髓瘤骨病的临床病理特征及危险因素分析

目的 探讨初诊分泌型多发性骨髓瘤（MM）患者发生多发性骨髓瘤骨病（MMBD）的临床病理特征及相关危险因素。方法 选取2015年1月—2020年12月宁波市医疗中心李惠利医院血液科222例初诊分泌型MM患者为研究对象,根据MMBD分级分为A组（MMBD 0～2级,102例）和B组（MMBD 3～4级,120例）,分析两组患者的骨病特点、分级及临床病理资料,探讨临床病理特点对MMBD分级的影响。结果 222例患者首诊骨痛发生率63.06%,高钙血症发生率9.45%,弥漫性骨质疏松症发生率75.22%,溶骨性破坏发生率69.81%;病理性骨折发生率34.68%。溶骨性破坏发生部位以脊柱、骨盆最多见;病理性骨折发生部位以脊柱、肋骨最多见。相比B组,A组BMI、Hb、外周血血小板绝对值、血清白蛋白、TG更高,年龄、血清磷、血清CPR、血清球蛋白、β2-微球蛋白、骨髓原始+幼稚浆细胞比例、骨髓浆细胞比例更低,差异均有统计学意义（均P<0.05）。多因素分析提示国际分期系统（ISS）分期、年龄、血清CPR、血清白蛋白、血清球蛋白是影响初诊分泌型MM患者发生3～4级MMBD的独立危险因素（均P&...     

闭合性肾损伤诊治体会

目的 总结闭合性肾损伤的诊治体会,提高闭合性肾损伤的诊治效果.方法 对120例闭合性肾损伤的诊治资料进行回顾性分析.结果 120例闭合性肾损伤患者血尿100例,B超检查阳性30/39例,CT检查阳性90/96例.手术41例,其中行肾修补术26例,肾部分切除术8例,肾切除术5例,两例行肾动脉栓塞治疗.非手术治疗79例.本组病例中合并颅脑外伤4例,脾破裂5例,肝破裂2例,肋骨骨折6例,脊柱四肢骨折4例.死亡3例,治愈107例.结论 尿常规及B超检查安全快速,CT检查是闭合性肾损伤准确诊断和选择治疗方案的依据,CT检查同时能了解有无合并其他脏器的损伤.对于严重的肾损伤,应及时手术治疗.     

赤阳子开发应用系列研究之一 赤阳子营养成分及保健作用研究

赤阳子,又名救军粮、红子、赤果、纯阳子、火把果、救兵粮、水沙子。为蔷薇科(Rosaceae)火棘属(Pyraceantha Roem)植物的果实。本属植物共有十种,产于亚洲东部及欧洲南部。中国有七种、我省有四种,是主要分布区。产区皆有果实代粮的历史。据《农部琐录》记载:“救军粮……武候南征,军士采食之,故名。”说明在一千多年前的三国时代就以赤阳子代粮了,明代《滇南本草》始见药用。其性平,味甘酸涩。     

重症监护室鲍曼不动杆菌肺炎的季节及基本证候要素分布特点

目的：探讨重症监护室鲍曼不动杆菌感肺炎患者的季节及基本证候要素分布特点。方法纳入鲍曼不动杆菌肺炎患者149例,通过临床调查采集发病季节及中医四诊信息,对鲍曼不动杆菌肺炎患者的基本证候要素进行判定,同时进行APACHEⅡ评分。结果泛耐药鲍曼不动杆菌肺炎患者冬春季发病明显多于非耐药者（P＜0.05）;鲍曼不动杆菌肺炎患者以虚实夹杂证多见,单纯实证22.1％,单纯虚证仅2.7％;虚证类证候要素依次为气虚证（69.7％）、阳虚证（57.0％）、阴虚证（16.1％）、血虚证（8.0％）;实证类证候要素依次为痰证（71.1％）、水饮证（48.3％）、火热证（28.9％）、气滞证（26.8％）、血瘀证（19.5％）。与非泛耐药者比较,泛耐药患者的阳虚证、水饮证明显增加（P＜0.05）,且出现阳虚证者具有更高的APACHE Ⅱ评分（P＜0.05）。结论鲍曼不动杆菌肺炎患者的中医证候以虚实夹杂证多见,泛耐药患者多发于冬春季,且阳虚证、水饮证较多,提示治疗上重视顾护阳气基础上,辅以化痰逐饮。     

腺苷受体及其介导的 cAMP-PKA 信号通路在对乙酰氨基酚致药物性肝损伤中的作用

目的：探讨腺苷受体及其介导的环磷酸腺苷-蛋白激酶 A (cAMP-PKA)信号通路在对乙酰氨基酚致药物性肝损伤中的作用。方法将20只雄性昆明种小鼠随机分为空白对照组和模型组。模型组给予对乙酰氨基酚500 mg/ kg,空白对照组给予等量的生理盐水,两组均为单次灌胃给药。24 h 后处死小鼠,检测谷丙转氨酶( ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA),HE 染色观察肝脏病理变化;原位肝灌注法分离小鼠肝细胞;Real-Time qPCR 法、 Western blot 法分别检测肝细胞腺苷 A1受体(A1R)、A2A 受体( A2AR)、A2B 受体( A2BR)和 A3受体(A3R)水平;ELISA 法检测各组细胞 cAMP 含量;Western blot 法检测各组细胞 PKA、磷酸化-环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)的表达水平。结果与空白对照组比较,模型组 AST、ALT、ALP、TBA 表达明显增加(P <0．01)且肝组织损伤明显;与空白对照组比较,模型组腺苷 A1R、A2AR的表达明显升高(P <0．01),cAMP 含量、PKA、p-CREB 蛋白的表达水平也相应增加(P <0．05)。结论对乙酰氨基酚致药物性肝脏损伤可能与 cAMP-PKA 信号通路有关。