金钱草提取物对雷公藤多苷致肝损伤的保护作用及机制研究

 目的 首次考察金钱草提取物对雷公藤多苷致肝损伤的保肝作用及其机制。方法 分别连续灌胃给予小鼠金钱草水提物、金钱草乙醇提取物及联苯双酯7 d,末次给药12 h后,除正常组外,其余各组均ig给予雷公藤多苷(270 mg·kg^-1)造急性肝损伤模型;造模18 h后,各组均取血和肝组织。此外,采用HPLC测定金钱草水提物和金钱草乙醇提取物中主要药效活性物质槲皮素和山柰酚含量。结果 金钱草乙醇提取物(100,200 mg·kg^-1)和联苯双酯(150 mg·kg^-1)均可使雷公藤多苷肝损伤模型小鼠血清丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶显著降低（P<0.05）、肝组织丙二醛含量显著降低（P<0.05）及超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力显著升高（P<0.05）,而金钱草水提物对此无显著影响（P>0.05）。进一步研究显示,金钱草乙醇提取物中槲皮素和山柰酚的含量分别为9.8和8.9 mg·g^-1,金钱草水提物中分别为2.8和1.9 mg·g^-1。结论 首次阐明金钱草乙醇提取物对雷公藤多苷所致肝损伤具有保护作用,其作用机制可能与降低小鼠肝脂质过氧化、增强超氧化物歧化酶及过氧化氢酶活力有关,且金钱草提取物保肝活性可能与其所含槲皮素和山柰酚的含量多少有关。     

基于主成分分析评价雷公藤配伍金钱草的相杀减毒作用

目的:考察雷公藤(LGT)配伍金钱草(JQC)的相杀减毒作用,优选二者的最佳配比,初步评价二者配伍后特征化学成分的贡献程度。方法:通过小鼠连续给药14 d的亚急性毒性试验并基于主成分分析优选LGT配伍JQC后相杀减毒作用的最佳配比,给药剂量以LGT提取物计均为60 mg·kg-1(相当于LGT生药约2 g·kg-1),给药体积均为20 m L·kg-1。基于常规小鼠急性毒性试验评价最佳配比的减毒效果,通过对配伍前后差异特征化学成分与总体减毒作用的灰色关联分析,评价化学成分对其相杀减毒作用的贡献大小。结果:与正常组比较,LGT单用组极显著升高了小鼠血清生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,肝组织和肾组织中的脂质过氧化指标丙二醛(MDA)水平以及总体减毒作用得分Z值(P0.01)。与LGT单用组比较,LGT-JQC质量比为2∶1,1∶1,1∶2,1∶4的配伍组均能显著降低LGT引起的血清过高的ALT水平(P0.05,P0.01),质量比为4∶1,2∶1,1∶1,1∶2,1∶4配伍时均能显著降低LGT引起的过高的血清AST,Cr,BUN,肝MDA水平以及总体减毒作用得分Z值(P0.05,P0.01),质量比为4∶1,2∶1,1∶1配伍时均能显著降低LGT引起的肾过高的MDA水平(P0.05,P0.01)。LGT和JQC在各质量比(4∶1,1∶1,1∶2,1∶4)配伍时的总体减毒作用Z值均明显高于配比在2∶1时的Z值(P0.01)。LGT单独用药对小鼠的半数致死量(LD50)517 mg·kg-1,LGT-JQC(2∶1)配伍用药时的LD50升高至889 mg·kg-1,升高了72%。配伍前后12个差异特征化学成分与其总体减毒作用得分Z值的灰色关联系数最大的是雷公藤甲素(TP)。结论:LGT和JQC在质量比为4∶1~1∶4配伍时,对LGT所致亚急性肝毒和肾毒均具有配伍减毒作用,二者相杀减毒的最佳配比为2∶1;在2∶1配比时,急性毒性和亚急性毒性分别下降了72%和138.5%;TP是引起二者相杀减毒作用贡献最大的化学成分。     

白芍药汁炙黄药子的炮制减毒工艺及其机制研究

该研究首次探究白芍药汁炙黄药子的炮制减毒工艺,并进一步探索其减毒机制。采用3因素3水平正交试验法制备白芍药汁炙黄药子炮制品9个,以高效液相测定黄药子炮制前后主要肝毒性成分黄独素B含量下降为依据进行减毒工艺的初步筛选,在此基础上,选取黄药子生品及代表性的炮制品以2 g·kg^-1(相当于临床等效剂量)灌胃给予小鼠21 d,末次给药24 h后,取血清和肝组织,结合反映肝功能的血清生化指标及肝脏组织病理进一步筛选验证工艺,然后借助试剂盒法检测肝组织脂质过氧化及抗氧化指标,蛋白免疫印迹法检测小鼠肝脏醌氧化还原酶(NADPH quinone oxidoreductase 1,NQO1)和谷氨酸半胱氨酸连接酶(glutamate-cysteine ligase, GCLM)蛋白表达进一步探究炮制减毒机制。结果表明白芍药汁炙黄药子各炮制品均能不同程度降低黄独素B的含量并改善黄药子诱导的肝损伤,其中A₂B₂C₃炮制工艺能使黄药子生品诱导的过高的谷丙转氨酶(alanine transaminase, ALT)和谷草转氨...     

基于抗抑郁活性的百合地黄汤中生地黄与百合的配比优选及其机制

目的 基于抗抑郁活性优选百合地黄汤中生地黄与百合的最佳配比并初探其可能的机制。方法 100只雄性小鼠随机分为正常组、模型组、生地黄单煎液组、百合单煎液组、5种不同配比的百合地黄汤组（生地黄-百合5∶6、5∶5、5∶4、5∶3、5∶2）、盐酸氟西汀组。除正常组外,其余9组,连续21 d,采用慢性不可预知性温和应激法（CUMS）制备抑郁小鼠模型。生地黄单煎液组、百合单煎液组和5种不同配比的百合地黄汤组均以2 g·kg^-1分别灌胃相应的药物,盐酸氟西汀组灌胃盐酸氟西汀0.01 g·kg^-1,正常组和模型组分别灌胃等体积生理盐水,连续21 d。通过行为学实验评价不同配比的百合地黄汤的抗抑郁作用;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马组织脑源性神经营养因子（BDNF）和酪氨酸激酶受体B（TrkB）的表达水平;羟胺法检测海马组织总超氧化物歧化酶（SOD）的水平;分光光度法检测海马组织还原型谷胱甘肽（GSH）的水平;比色法检测海马组织谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）和谷胱甘肽S转移酶（GST）的水平;硫代巴比妥酸法检测海马组织丙二醛（MDA）的水平,初探其抗抑郁机制。结果 CUMS引起了糖水偏爱率显著下降及强迫游泳和悬尾不动时间均显著延长（P<0.01）;而不同配比的百合地黄汤及生地黄、百合的单煎液均在不同程度上明显逆转了上述指标的异常（P<0.05,P<0.01）,尤以配比为5∶6时对上述指标的影响最为明显;此外,CUMS引起了小鼠海马BDNF和TrkB的表达水平及SOD、谷胱甘肽抗氧化相关指标水平均显著降低（P<0.01）,脂质过氧化产物MDA水平显著升高（P<0.01）,而较优比的百合地黄汤（生地黄-百合5∶6、5∶5、5∶4）及生地黄、百合的单煎液均在不同程度上明显逆转了以上指标的异常（P<0.05,P<0.01）。结论 5种不同配比的百合地黄汤及生地黄、百合的单煎液均能产生抗抑郁作用,尤以生地黄-百合配比为5∶6时抗抑郁作用最强,且随着百合在方中占比减少,抗抑郁作用逐渐减弱,其机制可能涉及增强海马中枢神经营养水平和抗氧化防御能力。     

香附提取物抗抑郁作用研究

目的 考察香附抗抑郁活性提取物及其量效关系.方法 通过三种动物模型,即小鼠悬尾实验(TST)、强迫游泳实验(FST)和开场实验(OFT)模型,首次测试香附95％乙醇提取物(醇提物,XF-E)及其水提物(XF-W)的抗抑郁活性.结果 ①在抗抑郁活性提取物筛选方面:XF-E (2 g/kg)可使小鼠在TST及FST的不动时间均显著性缩短(P＜0.05),而XF-W(2g/kg)对此均无显著性差异(P＞0.05);各组小鼠OFT穿格次数比较,均无显著性差异(P＞0.05).②在活性提取物量效关系方面:XF-E(1,2g/kg)均可使小鼠在TST及FST的不动时间显著性缩短(P＜0.05),XF-E (0.5 g/kg)对此亦有缩短趋势(P＞0.05).结论 首次证实XF-E为香附具有抗抑郁作用的活性提取物,且XF-E呈现出良好的量效关系.     

基于靶器官铁死亡探讨绿豆汁炙黄药子的炮制减毒机制

目的 探究绿豆汁炙黄药子的炮制减毒作用,并基于其主要毒性靶器官肝铁死亡探究其减毒机制。方法 60只雄性ICR小鼠随机分为空白组、生黄药子组、水炙黄药子组,绿豆汁炙黄药子1组（黄药子-绿豆10∶1,闷润40 min,130 ℃炒18 min）、绿豆汁炙黄药子2组（黄药子-绿豆10∶1,闷润80 min,100 ℃炒14 min）、绿豆汁炙黄药子3组（黄药子-绿豆20∶3,闷润40 min,160 ℃炒14 min）。生黄药子及各炮制品组均以3 g·kg^-1·d^-1的剂量分别灌胃对应的95%乙醇提取物药液,空白组灌胃等体积的0.5%羧甲基纤维素钠,1次/d,连续14 d。苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肝脏组织病理变化;生化检测小鼠血清谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平,以及肝组织丙二醛（MDA）、亚铁离子（Fe²⁺）、还原型谷胱甘肽（GSH）和超氧化物歧化酶（SOD）的水平;蛋白免疫印迹法检测铁关键蛋白铁蛋白重链1（FTH1）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的表达水平。结果 HE染色结果显示,空白组小鼠肝组织结构清晰,肝细胞形态正常;生黄药子组与水炙黄药子组小鼠肝细胞胞质疏松、空泡,病理性损伤明显;各绿豆汁炙黄药子组小鼠病理性损伤明显改善。与空白组比较,生黄药子组小鼠血清ALT、AST水平显著升高（P<0.01）,肝组织MDA及Fe²⁺水平显著升高（P<0.01）,GSH、SOD水平显著降低（P<0.01）,FTH1、GPX4蛋白表达显著下调（P<0.01）;与生黄药子组比较,各绿豆汁炙黄药子组小鼠血清ALT、AST水平显著降低（P<0.01）,肝组织MDA的水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,Fe²⁺水平显著降低（P<0.01）,GSH、SOD水平显著升高（P<0.01）,FTH1、GPX4蛋白表达显著上调（P<0.01）;与水炙黄药子组比较,各绿豆汁炙黄药子组小鼠血清AST水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,肝组织MDA水平显著降低（P<0.01）,SOD水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,FTH1蛋白表达显著上调（P<0.01）,绿豆汁炙黄药子2、3组小鼠血清ALT水平显著降低（P<0.01）,肝组织Fe²⁺水平显著降低（P<0.01）,GSH水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,GPX4蛋白表达明显上调（P<0.05,P<0.01）。各绿豆汁炙黄药子组中以绿豆汁炙黄药子3组的减毒效果最佳,即黄药子-绿豆=20∶3,闷润40 min,160 ℃炒14 min。结论 绿豆汁炙法能够缓解黄药子导致的肝损伤,其减毒机制可能与抑制其靶器官肝脏的铁死亡有关。     

以药制药在中药炮制中的应用现状及对策

目的：阐释以药制药在中药炮制中的应用现状及对策。方法：查阅相关资料,分析、归纳和总结。结果：当前以药制药多集中在以姜和蜂蜜等少数一些中药作为以药制药的基础药物,缺乏应用的广泛性,应加强以药制药在中药炮制中的应用。结论：为了促进以药制药在中药炮制中的广泛应用,笔者提出对策：应从＂相畏＂＂相杀＂＂相须＂＂相使＂＂药对＂角度去选取以药制药的炮制药物,同时应加强对所选取的药物开展以药制药的科学研究。本文将为以药制药的研究和应用提供思路启发。     

基于功效应用为核心的中医专业中药饮片实训的探索与实践

中药饮片实训课程强化了中医专业学生对中药药性理论、功效应用的理解和记忆,提高了在中医辨证论治指导下的临床用药及辨认常用中药饮片的能力,鉴于其作为中药学课程的一部分,结合中医专业学生的培养方案和中药学课程特点,课程团队提出了基于功效应用为核心的中医专业中药饮片实训,本文将为中药学在中医教学方法的优化改革提供有意义的参考。     

猫爪草粗多糖提取工艺研究

目的:优选猫爪草粗多糖提取工艺.方法:采用苯酚-硫酸法测定粗多糖含量(以葡萄糖计),通过正交设计L9(34)优化水提和醇沉工艺.结果:猫爪草粗多糖最佳水提工艺为A3B2C3,即加12倍量水,提取2次,每次3h;最佳醇沉工艺为A1B1C3,即提取液浓缩至800g·L-1,加乙醇使含醇量达50％,静置6h.结论:该方法制备猫爪草粗多糖操作简便、经济、无毒,适用于工业化生产.