葡萄籽多酚逆转胆囊癌细胞株GBC-SD耐药的研究

目的研究葡萄籽多酚（GSP）逆转先天性耐药细胞株GBC-SD耐药的机制，寻找高效低毒的耐药逆转剂。方法选择先天性耐药细胞株GBC-SD为研究对象。MTT比色法测定各化疗药物的半数抑制浓度（IC50）；RT-PCR测定MDR1 mRNA的变化；流式细胞仪检测P-gP，bcl-2蛋白和细胞内阿霉素浓度的变化。结果（1）无毒（3μg／mL）和低毒（6μg／mL）浓度的GSP处理后各化疗药物的IC50值均明显下降（P〈0．05），能明显逆转GBC-SD的多药耐药性；（2）上述两浓度的GSP能下调GBC-SD细胞MDR1 mRNA表达（P〈0．05）；（3）上述两浓度的GSP能下调GBC-SD细胞P-gP和bcl-2蛋白表达（P〈0．05）；（4）GSP增加GBC-SD细胞内ADM药物浓度（P〈0．05）。结论GSP能部分逆转先天性耐药细胞株GBC-SD多药耐药性，其作用机制为下调GBC-SD细胞MDR1 mRNA，及P-gP和bcl-2蛋白表达。     

阻塞性黄疸患者血浆内毒素和血清肿瘤坏死因子α水平的研究

检测29例恶性肿瘤所致的阻塞性黄疸患者的外周血血浆ET、血清TNF－α水平，发现血浆ET及血清TNF－α水平均明显升高，二者有一定的相关关系（r=0．4531，P＜0．02），两者水平与术前黄疸持续时间，血清Bil和AKP水平及术后并发症发生率亦有一定关系。     

Fas、Fas配体和IFN-γ在胃癌中的表达

目的：研究Fas、Fas配体(FasL)和干扰素-γ(IFN-γ)在胃癌中的表达规律及可能的意义。方法：在石蜡包埋的58例胃癌组织和其中相对应的53例癌旁正常组织中，采用免疫组化方法检测Fas、FasL蛋白的表达，采用原位杂交方法检测IFN-γ mRNA的表达。结果：胃癌组织中胃癌细胞和癌旁组织中胃上皮细胞Fas阳性率分别为19．0％和64．2％，胃癌组阳性率明显低于癌旁组(χ^2=23．46；P=0．00)。胃癌组织中胃癌细胞和癌旁组织中胃上皮细胞FasL阳性率分别为63．8％和45．3％，胃癌组阳性率明显高于癌旁组(χ^2=3．83；P=0．05)。癌旁组织中胃上皮细胞，IFN-γ阳性率为49．1％，而胃癌组织中未发现一例阳性。结论：胃癌细胞Fas—FasL系统平衡失调，本研究中胃癌细胞不表达IFN-γ，可能与胃上皮细胞癌变及免疫逃逸有关。     

耐药相关蛋白P糖蛋白、多药耐药相关蛋白及谷胱甘肽S转移酶π在胰腺癌中的表达及其意义

胰腺癌化疗效果不佳 ,多药耐药 (multidrugresistance,MDR)是重要的原因。我们应用免疫组化技术分析P糖蛋白 (P gp) ,多药耐药相关蛋白 (MRP)及谷胱甘肽S转移酶π(GST π)在胰腺癌中的表达及其与预后的相关性。资料与方法1.临床资料 :所有标本来自手术切除 ,经病理确诊为胰腺癌。本组共 6 8例 ,其中男 4 4例 ,女 2 4例 ,年龄 30～ 74岁。TNM分期 :Ⅰ +Ⅱ期 4 6例 ,Ⅲ +Ⅳ期 2 2例 ;组织学分型 :管状腺癌 5 2例 ,乳头状腺癌 12例 ,囊腺癌 4例 ;病理分级 :高分化 18例 ,中分化 2 0例 ,低分化 30例 ;有淋巴结转移者30例 ,无转移者 38例。…     

基质金属蛋白酶与乳腺癌关系研究进展

细胞外基质(ECM)的降解是肿瘤侵袭、转移的重要信号和途径.基质金属蛋白酶(MMP)是溶解ECM的一组酶类,金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)是MMP的特异性抑制物.二者的表达及代谢失衡与乳腺癌的侵袭、转移和临床预后有密切联系.TIMP有望成为新的抗乳腺癌临床用药.现综述近年来有关MMP、TIMP与乳腺癌关系的研究进展.     

P53蛋白表达和肿瘤微血管生成与肝癌的发展及预后的关系

目的探讨p53蛋白表达和肿瘤微血管生成与肝细胞癌(HCC)发展及预后的关系.方法采用免疫组化方法检测50例肝细胞癌组织中p53蛋白的表达,并用抗CD34抗标记癌组织血管内皮细胞,计算肿瘤微血管密度(microvessl density,MVD).分析p53蛋白和MVD与HCC临床病理学特征之间的关系.结果p53阳性表达为癌细胞核棕黄色着色,CD34染色定位在血管内皮细胞上,HCC的p53表达及MVD与肿瘤大小、病灶数目、病理分级、门静脉癌栓形成、包膜是否完整有显著相关(P＜0.05).p53蛋白表达阳性者MVD值显著高于阴性者(P＜0.05);p53蛋白表达阳性或MVD≥148的肝癌病人术后生存时间比p53蛋白表达阴性或MVD＜148者低(P＜0.05).结论p53与肿瘤血管生成密切相关,而p53蛋白及MVD可作为肝癌的预后判断的一个重要指标.     

p53、bcl-2、c-erbB-2在胃癌及癌前病变中表达的意义

目的：研究p53、bcl-2、c-erbB-2基因在胃癌及癌前病变中的表达，探讨其与胃癌发生的关系。方法：采用免疫组化SABC法，检测p53、bcl-2、c-erbB-2基因蛋白在98例胃癌、39例肠上皮化生、40例不典型增生和20例正常胃粘膜中的表达。结果：①p53在胃癌中的阳性表达率为55．1％，早期胃癌和进展期胃癌分别为50．0％，55．4％；在肠上皮化生中的表达率为12．8％，与早期胃癌比较有统计学差异（P〈0．05），随不典型增生程度的加重p53的表达率逐渐升高，依次为5％，20％，60％，其中轻中度与重度不典型增生差异有统计学意义（P〈0．05），而在正常胃粘膜中未见p53表达②bcl-2在正常胃粘瞑中有弱阳性表达（10．0％），在不典型增生中为50．0％，在胃癌中为44．9％，不典型增生与胃癌中的表达均显著高于正常胃粘膜（P〈0．05）。③c-erbB-2在胃癌中的阳性表达率为55．1％，其中在早期胃癌中的表达率较低（16．7％），在重度不典型增生和进展期胃癌中的表达率较高，分别为60．0％和57．6％，二者与早期胃癌比较差异有统计学意义（P〈0．05）。④c-erbB-2表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关（P〈0．05），与胃癌分化程度无关（P〉0．05）；bcl-2表达与胃癌的分化程度有关（P〈0．05），低分化者bcl-2表达率高，与淋巴结转移，浸润深度无关（P〉0．05）；p53表达与上述临床病理因素均无关（P〉0．05）。结论：p53，bcl-2，c-erbB-2参与了胃粘膜的癌变过程。     

联合应用胸苷激酶基因和胞嘧啶脱氨酶基因对MCF-7细胞的杀伤作用

目的研究双自杀基因(胞嘧啶脱氨酶基因CD和胸苷激酶基因HSV-tk)的应用对乳腺癌细胞的杀伤作用和旁观者效应。方法脂质体法将CD和HSV-tk双自杀基因转染入PA317细胞，用其病毒上清转染乳腺癌细胞MCF-7，G418筛选出阳性细胞MCF-7／CD tk，然后加入不同浓度的5-氟胞嘧啶(5-Fc)或／和丙氧鸟苷(GCV)，MTT法观察其杀伤作用；将不同比例的MCF-7／CD tk和MCF-7细胞混合，联合应用5-Fc和GCV杀伤，观察其旁观者效应。结果单独应用5-Fc或GCV均能对MCF一7／CD tk细胞产生明显的杀伤效应，联合应用可以在较小的剂量下产生更大的杀伤作用；当阳性细胞比例达到20％时即可对半数混合细胞产生杀伤作用。结论双自杀基因的应用对乳腺癌细胞具有明显的杀伤作用．其旁观者效应明显。     

人胆囊癌细胞系GBC-SD的多药耐药机制

目的 探讨人胆囊癌细胞系GBG-SD耐药性产生的机制，建立先天性耐药的人胆囊癌细胞模型。方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测GBC-SD细胞多药耐药相关蛋白(MDR1)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)基因扩增；免疫细胞化学染色检测该细胞系P-糖蛋白(P-gp)、MRP和LRP蛋白表达；流式细胞术测定P-gp、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)表达水平；用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测该细胞对8种抗癌药物的敏感性。结果 人胆囊癌GBC-SD细胞中MDR1、MRP和L,RP基因呈阳性扩增，P-gp、MRP、LRP蛋白表达阳性；GST-π和TOPOⅡ的表达水平与对照组细胞差异无显著性。四唑盐比色结果显示，GBC-SD细胞对8种抗肿瘤药物均有程度不同的耐受性。耐药倍数从5．3倍到42倍不等。结论 人胆囊癌细胞系GBC-SD是一株先天性耐药的恶性肿瘤细胞系，其耐药性的产生与MDR1、MRP、LRP基因扩增有关。     

葡萄籽多酚体外逆转胆囊癌细胞株GBC-SD多药耐药作用的研究

目的:研究葡萄籽多酚(GSP)逆转胆囊癌先天性耐药细胞株GBC-SD耐药的作用,寻找高效低毒的耐药逆转剂。方法:选择GBC-SD为研究对象,MTT比色法测定各化疗药物的半数抑制浓度(IC50),RT-PCR测定MDR1mRNA的变化,流式细胞仪检测P-gp蛋白和细胞内阿霉素浓度的变化。结果:①无毒(3μg/ml)和低毒(6μg/ml)剂量浓度的GSP处理后各化疗药物的IC50值均明显降低(P〈0.05),能明显逆转GBC-SD的多药耐药性;②无毒(3μg/ml)和低毒(6μg/ml)剂量浓度的GSP能下调GBC-SD细胞MDR1mRNA表达(P〈0.05);③无毒(3μg/ml)和低毒(6μg/ml)剂量浓度的GSP能下调GBC-SD细胞P-gp蛋白表达(P〈0.05);④GSP增加GBC-SD细胞内ADM药物浓度(P〈0.05)。结论:GSP能部分逆转先天性耐药细胞株GBC-SD多药耐药性,作用机制为下调GBC-SD细胞MDR1mRNA及P-gp蛋白表达。