血管壁细胞人突触相关蛋白的表达

目的　目前尚无文献报道人突触相关蛋白与脂蛋白代谢和泡沫细胞形成、凋亡的关系。本文研究氧化型低密度脂蛋白致THP 1细胞泡沫化过程中人突触相关蛋白基因的表达 ,用制备的兔抗人突触相关蛋白多克隆抗体检测其在血管细胞及肝癌细胞系HepG2细胞中的表达。方法　THP 1细胞用 16 4 0培养 ,PMA处理诱导其向巨噬细胞分化 ,实验组加氧化型低密度脂蛋白(终浓度 80mg/L) ,对照组不加氧化型低密度脂蛋白。根据人突触相关蛋白基因序列设计引物 ,以看家基因GAPDH为内对照 ,反转录—聚合酶链反应半定量检测人突触相关蛋白基因的表达。用特异的抗人突触相关蛋白的多克隆抗体 ,采用免疫组织化学或流式细胞术检测人突触相关蛋白在人内皮细胞、平滑肌细胞、THP 1细胞和肝癌细胞系HepG2细胞中的表达。结果　人突触相关蛋白基因在氧化型低密度脂蛋白致THP 1细胞泡沫化过程中表达增高 ,与抑制消减杂交结果一致。免疫组织化学或流式细胞术检测 ,人突触相关蛋白在人内皮细胞、平滑肌细胞、THP 1细胞和肝癌细胞系HepG2细胞中均有表达 ,主要定位在细胞质 ,与该基因的生物信息学分析结果一致。结论　人突触相关蛋白在多种细胞中均有表达 ,人突触相关蛋白基因在单核细胞泡沫化过程中表达增高 ,可能与单核细胞源性泡沫化细胞形成     

泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备

目的探讨制备泡沫细胞相关基因4多克隆抗体的方法。方法将从人胎肝文库经聚合酶链反应扩增获得的泡沫细胞相关基因4基因全长cDNA序列，通过生物信息学分析，预测泡沫细胞相关基因4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域．并进行了多序列比对，并根据蛋白质的亲疏水性、二级结构、偶联难度及实验难度等，确定泡沫细胞相关基因4抗原13肽PKLVKEEVFWRNY，采用固相多肽合成法合成该抗原片段．偶联后经过基础免疫，6次加强免疫，经追踪检测，于第四次免疫后10～14天颈动脉放血，分离血清，冷冻抽干，-20℃保存而制备了泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体。结果用固相多肽合成法成功制备了泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体，该抗体经间接酶联免疫吸附测定法检测其效价为1：16000，Western blot检测可见40kDa处有目的带，用免疫组织化学方法从HepG2细胞中检测到泡沫细胞相关基因4蛋白表达，证实该抗体具有较好的反应性和特异性。结论固相多肽合成法省时、省力、制备的抗体效价高；泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备，为进一步研究泡沫细胞相关基因4蛋白在动脉粥样硬化中的功能作用奠定了基础。     

供体骨髓输注在肾脏移植耐受中的疗效和机制

同种移植免疫耐受的诱导和维持是控制移植后排斥反应 ,提高移植物存活的关键。动物实验及临床资料表明 :骨髓输注具有诱导免疫耐受的作用 ,其机制包括诱导T细胞无能 ,克隆清除 ,提供可溶性HLA抗原、抑制细胞及否决细胞 ,调节细胞表面分子及细胞因子 ,促进嵌合体的形成。因此 ,供体骨髓输注在诱导移植免疫耐受中具有相当的应用前景     

白三烯拮抗剂ONO-1078对小鼠局灶性脑缺血的保护作用

AIM　To determine whether ONO-1078 {pranlukast, 4-oxo-8-［p-(4-phenylbutyloxy) benzoyl-amino]-2-(tetrazol-5-yl)-4H-1-benzopyran hemihydrate}, a potent leukotriene antagonist, has protective effect on focal cerebral ischemia in mice. METHODS　Focal cerebral ischemia was induced by permanent middle cerebral artery (MCA) occlusion in mice. ONO-1078 (0.01, 0.05, 0.10 mg·kg^-1), dexamethasone (0.5 mg·kg^-1), nimodipine (0.2 mg·kg^-1) or saline (control) were injected ip once daily for 3 days, and 30 min before MCA occlusion. Twenty-four hours after cerebral ischemia, the neurological scores were evaluated, infarct volumes and areas of the right and left cerebral hemispheres were measured by computer imaging analysis. RESULTS　ONO-1078, dexamethasone and nimodipine reduced the neurological scores. ONO-1078 and dexamethasone reduced the ratio of right/left hemisphere area, indicating inhibition of brain edema, while nimodipine showed no effect. ONO-1078 dose-dependently reduced infarct size, and dexamethasone and nimodipine showed the same effect. CONCLUSION　ONO-1078 showed protective effect on focal cerebral ischemia. This may represent a novel approach to the treatment of acute cerebral ischemia.     

儿童肾移植受者移植术后一年内发生急性排斥反应的影响因素及预后分析

目的探讨儿童肾移植受者移植术后一年内发生急性排斥反应(acute rejection, AR)的影响因素及AR发生时间对预后的影响。方法选取2011年1月至2021年10月浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心移植时年龄小于18岁的肾移植受者, 在排除6例非排斥反应导致的早期移植肾功能丧失受者后, 最终有106例受者纳入本次研究。其中, 男63例, 女43例;年龄15(12, 16)岁;供体来源为亲属供肾26例, 尸体供肾80例。根据是否发生移植肾AR及AR发生时间, 将其分为一年内发生AR组、一年后发生AR组和未发生AR组。回顾性对比分析3组儿童肾移植供、受者的临床特征、AR发生的影响因素和治疗结果。通过单因素方差分析或Kruskal-Wallis检验比较3组AR发生后一年的肾功能情况;以移植肾功能丧失作为随访终点事件, 采用Kaplan-Meier生存曲线分析一年内发生AR和一年后发生AR对移植肾生存率的影响。结果 106例儿童肾移植受者的中位随访时间为35个月, 有17例(16.0%)儿童受者出现了19次AR事件, 另89例受者截至随访终点未发生AR(未发生AR组)。其中一年内发生...