IMMULITE-一种新型化学发光免疫分析系统

免疫分析技术具有高度的准确性和特异性 ,成为检验方法中最为重要的技术之一。随着抗体和抗原制备技术的成熟及标记技术的发展和完善 ,免疫分析技术作为疾病诊断的主要手段已被广泛用于机体免疫功能、肿瘤标志物、内分泌功能、传染性疾病、治疗及成瘾药物监测、过敏原检测等方面的体外诊断实验中。我实验室引进了美国 DPC( Diagnostic Products Corporation)公司全自动化学发光免疫分析仪 -IMMULITE,下面对此系统作一简要介绍。1　发光原理　化学发光免疫分析法以标记方法的不同而分为直接标记法和酶标记以化学发光底物作信号试剂 -化…     

白细胞介素-1基因多态性及幽门螺杆菌感染与胃癌相关性研究

摘要：目的：研究白细胞介素(IL)-1B-31、IL-1B-511基因多态性在胃癌（GC）患者及体检健康者中的分布及幽门螺杆菌（Hp）感染情况,探讨其与GC易感性之间的关系。 方法：用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测128例GC患者和127例体检健康者IL-1B-31及511位点的基因多态性,用免疫印迹法检测GC组与健康对照组的Hp感染情况并分析各位点的基因型分布和等位基因频率。 结果：GC组及健康对照组符合Hardy-Weinberg 遗传平衡（P>0.05）。GC组IL-1B-31的基因频率（TT：15.63%、TC：51.65%、CC：32.81%）与健康对照组（TT：22.83%、TC：55.12%、CC：22.05%）相比,有显著性差异（χ²=4.57,P＜0.05）,GC组IL-1B-511-位点的基因频率（CC：21.88%、TC：47.66%、TT：30.47%）与健康对照组（CC：29.13%、TC：55.91%、TT：14.96%）相比也有显著性差异（χ²=8.90,P<0.01）。GC组IL-1B-31CC基因型频率［OR=2.13,95%CI (1.01~4.50）］和C等位基因型频率［OR=1.44,95%CI (1.01~2.04）］均高于健康对照组。〖STBX〗IL1B511〖STBZ〗TT基因型频率［OR=2.71,95%CI (1.30~5.67）］及T等位基因型频率［OR=1.58,95%CI (1.11~2.24）］均高于健康对照组。在Hp感染阳性的GC组IL-1B-31 CC基因型频率［OR=3.33,95%CI(1.15~9.63)］显著高于健康对照组,IL-1B-511 TT基因型频率［OR=5.75,95% CI (1.73~19.15)］亦显著高于健康对照组。 结论: IL-1B-31 CC及IL-1B-511 TT基因型增加GC的发病风险且与Hp感染对于GC的发生可能有协同作用。     

乳腺癌100例患者肿瘤组织CD14+和CD8+/CD28+细胞的检测

单核－巨噬细胞（macrophage，MΦ）和细胞毒T细胞（cytotoxicTlymphocyte，CTL）是体内维持免疫状态稳定的重要细胞，不仅在肿瘤发生发展中有重要作用，而且对肿瘤预后估计方面也有一定的实用价值犤１犦。乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一，其很多临床生物学行为和细胞生物学特性都影响着肿瘤患者病情发展、恶性度和预后犤２犦。既往大多数研究都是关注患者全身免疫状态对恶性肿瘤的影响犤３犦，而肿瘤局部组织免疫状态以及和其它生物学指标间的关系等还没引起学者们的足够重视。１９９９年９月～２００１年９月，本院对１００例乳腺癌患…     

长链非编码RNA遗传多态性作为肿瘤标志物的研究进展

长链非编码RNA（long non?coding RNA,lncRNA）是一类长度超过200个核苷酸残基,能够调控基因表达并在机体生理和病理过程中发挥重要作用的非编码RNA,差异表达的lncRNA与肿瘤的发生发展显著相关。研究表明lncRNA的遗传多态性可以改变基因结构从而产生广泛的基因多态性,大多数lncRNA基因多态性与肿瘤的发生、转移和预后密切相关,有望成为新型肿瘤标志物和肿瘤治疗的靶点。本文结合国内外最新报道,综述lncRNA遗传多态性作为肿瘤标志物,对恶性肿瘤的风险评估、疗效预测和预后判断有着极其重要的意义。     

低密度脂蛋白受体3′非翻译区单核苷酸多态性对黄连素调节低密度脂蛋白受体表达的影响

目的：中药黄连素具有降低血清中低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的作用,其作用机制是否与低密度脂蛋白受体（LDLR）的单核苷酸多态性（SNP）有关尚不清楚。现探讨LDLR3′非翻译区（LDLR 3-′UTR）的SNP对黄连素调节LDLR表达的影响。方法：收集113例高脂血症合并冠心病患者,提取外周血基因组DNA,检测LDLR 3′-UTR的SNP,分析LDLR 3-′UTR的基因型与中国人群血脂水平的关系。此外,构建了携带不同LDLR 3-′UTR基因型（TypeⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ）的荧光素酶报告基因载体（pLuc）,转染HepG2细胞后采用黄连素（Berberine,BBR）作用12h后观察pLuc的活性变化。结果：中国人群的LDLR 3-′UTR存在着Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等SNP分布,但这些基因型频率与中国人群的血脂水平无明显相关性,携带有不同SNP基因型的荧光素酶报告基因载体转染HepG2细胞,在BBR作用后LDLR表达上调程度相似。结论：LDLR 3-′UTR的基因型频率及其分布的遗传性变异不能影响BBR对LDLR表达的上调作用,从而可为临床使用黄连素治疗高脂血症提供理论依据。     

抗人精浆磷脂酶A2单克隆抗体细胞株的建立与鉴定

目的 :制备并鉴定人精浆磷脂酶A2 (PLA2 )的单克隆抗体 (McAb)。　方法 :通过PEG沉淀、SephacrylS 30 0柱层析、DEAE SephadexA 2 5柱层析及羟基磷灰石 (HA)柱层析分离纯化人精浆中的PLA2 ,并以SDS PAGE鉴定其分子量及蛋白浓度 ;免疫BALB/C小鼠制备抗PLA2McAb ,通过ELISA技术、Western Blot方法鉴定其敏感性及特异性。　结果 :从精浆中提纯的PLA2的相对分子质量 (Mr)约为 3490 0 ,纯化倍数约为 2 4 5倍。制备的McAb经鼠Ig亚类分析为IgMKappa型 ,敏感性可达 1∶5 6～ 1∶5 8,Western Blot证明其特异结合的抗原即为PLA2蛋白酶。结论 :Mr为 3490 0的PLA2可能为一种新型PLA2。该PLA2的McAb的制备将为研究人精浆中PLA2与男性生殖能力的关系提供广阔的前景     

聚合酶链反应检测痰及胸水结核杆菌的研究

聚合酶链反应检测痰及胸水结核杆菌的研究江苏省南京市第一医院２１０００６时宏珍，王书奎，王自正，陶惠芸，胡孤星我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对临床结核病患者的痰及胸水结核杆菌核酸（ＤＮＡ）进行检测，同时与细菌学检查结果（直接涂片及细菌培养）进行比较...     

银染单链构象多态性技术检测原发性肝癌p53基因的突变

目的建立银染单链构象多态性技术检测原发性肝癌ｐ５３基因突变。方法用银染及单链构象多态性（ＳＳ－ＳＳＣＰ）技术检测１６９例原发性肝癌的癌变及癌旁正常组织ｐ５３基因第７，８外显子（Ｅ７，Ｅ８）的突变，并进行ＤＮＡ测序，鉴定突变位点。结果４例患者ｐ５３基因Ｅ７中第２４９号密码子第３号碱基发生了Ｇ：Ｃ→Ｔ：Ａ的颠换（ＡＧＧ→ＡＧＴ），２例患者Ｅ８中第２７３号密码子第１号碱基发生了Ｃ：Ｇ→Ｔ：Ａ的转换（ＣＧＴ→ＴＧＴ），总的突变率达３８％（６／１６）；６例ｐ５３基因突变的癌变组织中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的整合率为５／６，８例未发生ｐ５３基因突变的癌变组织中ＨＢＶ的整合率仅为１／８，两者相比差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论ｐ５３基因突变是原发性肝癌发生发展过程中的常发事件，且与ＨＢＶ的慢性感染密切相关。进一步研究有利于探讨原发性肝癌的发病机制，并为基因治疗提供依据。