高效液相色谱-串联质谱法定量测定大鼠血浆中LMV-12(HE003)及其代谢产物M4

目的 建立一种高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定SD大鼠血浆中LMV-12(HE003)(以下简称LMV-12)及其活性代谢产物M4的方法,并开展完整的生物分析方法学验证.方法 采用蛋白沉淀提取血浆中LMV-12及M4,用HPLC-MS/MS方法进行定量分析.采用ACQUITY HPLC?CSH ...     

2种靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞免疫疗法体内药效学研究

目的 评价2种靶向CD19的嵌合抗原受体基因修饰的T (chimeric antigen receptor gene modified T, CAR-T)细胞在荷瘤免疫缺陷小鼠体内的药效,为相关产品的体内药效学评价提供参考。方法 使用B-NDG小鼠构建经萤火虫荧光素酶标记的Raji细胞（Raji-Luc细胞）移植瘤模型,单次给予细胞A和细胞B（相对于细胞A,细胞B在表达CAR结构的基础上还表达IL-6沉默片段,可干扰IL-6的表达）,持续观察至给药后84 d。考察小鼠存活率、临床症状、体重变化、体内Raji-Luc细胞荧光强度和组织病理学变化特点。结果 细胞A和细胞B均可明显延长荷瘤小鼠生存时间,并一定程度上减缓由Raji-Luc细胞导致的体重降低,有效缓解Raji-Luc细胞负荷导致的临床表现,显著降低体内Raji-luc细胞荧光强度,明显降低Raji-Luc细胞造模动物各组织器官淋巴瘤发生率,变化呈剂量相关性。结论CAR-T治疗组动物的死因可能与肿瘤的持续性消耗及逐渐加重的背景性病变有关。细胞A和细胞B在Raji-Luc细胞荷瘤B-NDG小鼠体内呈现一定药效学作用,两者药效未见明显...     

嵌合抗原受体T细胞在软琼脂中克隆形成能力及体外致瘤性初探

目的 研究嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T, CAR-T)细胞产品在软琼脂中形成克隆的可能性,从而评价其体外致瘤性,为其临床应用提供安全性依据。方法 采用6孔板固态培养法,按不同密度（每孔1 000～5 000个）将CAR-T细胞与软琼脂混合铺板,同时设立Hela细胞为阳性对照,计数克隆形成率。结果 空白对照组及受试物低（每孔1 000个）、中（每孔2 000个）、高（每孔5 000个）剂量组在培养后14 d内均未见细胞集落产生。阳性对照组14 d时有细胞集落出现。结论 CAR-T细胞体外培养不具有软琼脂克隆形成能力,利用软琼脂克隆形成实验可初步考察CAR-T细胞的体外致瘤性。     

啮齿类动物致癌性试验统计学方法的使用现状

啮齿类动物致癌性试验是新药研发中非临床安全性评价的重要组成部分。致癌性试验周期较长、数据量大,其统计学方法选用的合理性、科学性将可能影响试验结果的结论。首先介绍了目前致癌性试验常用的生存分析和肿瘤发生率统计方法;其次,汇总了生存分析和肿瘤发生率统计方法的选用情况;最后,通过比较申报方、美国食品药品监督管理局审评方和美国国家毒理学项目中心在统计学方法选用的差异,分析和讨论了这些差异的来源和影响,并总结了致癌性试验统计分析设计思路。希望通过对以上内容的汇总和分析,能够为新药非临床致癌性试验提供参考。     

我国临床前药物致癌试验转基因动物模型研究进展

目的：综述我国临床前药物致癌试验转基因动物模型研究进展。方法：介绍致癌试验常用转基因动物模型的构建、利用转基因动物模型开展致癌试验的优势、国际认可及国际监管机构新药申报中的应用、国内外致癌试验相关指导原则、我国开展基于转基因动物致癌试验面临的困境以及转基因动物模型构建的最新进展。结果与结论：基于转基因动物模型的致癌试验具有诸多优势也是目前国际趋势,在我国建立临床前药物致癌试验转基因动物模型非常必要。     

DNA疫苗、重组病毒载体复合型疫苗的临床前毒理学研究

本研究中的复合型疫苗是采用双疫苗组分-DNA疫苗和重组痘病毒载体疫苗(简称“痘苗”),免疫策略为“prime-boost”方案。本研究设计了DNA单独免疫、复合型疫苗以及痘苗单独免疫1次和2次的毒性研究。并且根据其体液免疫和细胞免疫的特点,检测其免疫原性、免疫毒性相关指标,进行了     

镇痛药潜在依赖性及其非临床安全性评价研究进展

镇痛药是一类主要作用于中枢神经系统（CNS）,能选择性地缓解或消除疼痛及伴随的不愉快情绪（如恐惧、紧张、焦虑等）的药物。由于镇痛药的CNS活性和对μ阿片受体的作用,存在依赖性潜在风险,已成为全球性公共卫生领域的重要问题。作为多成因的疾病,遗传学因素、神经系统因素、表观遗传因素、性别因素和环境差异都可能是镇痛药诱导依赖性潜能的作用机制;可采用多种动物行为学模型,如自身给药模型、药物辨别模型评价等,对镇痛药进行非临床依赖性评价研究。重点综述传统及新型镇痛药物依赖性的神经生物学、遗传学和表观遗传学方面的机制研究,概述非临床评价其依赖潜在性的研究方法,以期为镇痛药的安全性评价及临床用药提供参考依据。     

清醒Beagle犬安全药理心血管呼吸遥测系统验证研究

目的选用呼吸系统阳性药对Beagle犬心血管呼吸遥测系统进行性能验证。方法 8只埋植植入子的清醒Beagle犬隔日依次静脉注射给予生理盐水、盐酸多沙普仑(4 mg·kg-1)、盐酸瑞芬太尼(4μg·kg-1)和盐酸索他洛尔(10 mg·kg-1)。实验时连续获取每次给药前至少2 h及给药后24 h内数据,包括血压、心电图、呼吸等指标。结果生理盐水对各参数无明显影响。呼吸兴奋药盐酸多沙普仑可导致动物呼吸频率和潮气量明显增加,伴有血压及心率的增加。呼吸抑制药盐酸瑞芬太尼可导致动物呼吸潮气量明显减少,对呼吸频率作用不明显。QT间期(QTcf)延长阳性药盐酸索他洛尔可导致动物心电图心率校正的QTcf明显延长,最大变化率约11%。结论本系统可灵敏检测到心血管、呼吸系统的相关变化,可用于清醒动物心血管呼吸系统安全药理学研究。     

治疗非霍奇金淋巴瘤的嵌合抗原受体T细胞临床前毒性评价

目的 评价治疗非霍奇金淋巴瘤的嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T, CAR-T)细胞U在荷瘤免疫缺陷小鼠体内的临床前安全性。方法 使用NSG小鼠构建Raji-Luc细胞移植瘤模型,并在此基础上单次给予细胞U,持续观察至给药后第8周。考察小鼠体内Raji-Luc细胞荧光强度、小鼠存活率、临床症状、体重变化、血液学指标、淋巴细胞亚群分类、细胞因子指标和组织病理学变化特点。结果 细胞U可显著降低体内Raji-Luc细胞荧光强度、抑制荷瘤小鼠体内Raji-Luc细胞增殖,有效缓解Raji-Luc细胞负荷导致的临床表现,一定程度上减缓由Raji-Luc细胞导致的体重降低,延长荷瘤小鼠生存时间,升高荷瘤小鼠血清中人源干扰素（IFN）-γ水平,降低人源白介素（IL）-10水平,升高鼠源肿瘤坏死因子（TNF）和IL-6水平,并明显降低Raji-Luc细胞造模动物各组织器官淋巴瘤发生率,变化呈剂量相关性。细胞U治疗组动物的死因可能与肿瘤的持续性消耗及逐渐加重的背景性病变有关。结论 细胞U在RajiLuc荷瘤NSG小鼠体内未见明显免疫毒性和致瘤性的相关风险,且呈现一定药...