p53+/-基因敲除小鼠尿烷致癌性初步验证试验

目的：观察自主建立的p53^+/-敲除小鼠（命名为B6-Trp53tm1/NIFDC）模型,在给予尿烷后的体重、脏器重量、血液学及血生化指标变化,为该模型将来用于临床前药物短期致癌性试验的替代试验提供背景数据。方法：共设计3个组：阴性对照组（野生型小鼠,给予生理盐水）、尿烷组1（B6-Trp53tm1/NIFDC小鼠,给予1000 mg·kg^-1尿烷）、尿烷组2（野生型小鼠,给予1000 mg·kg^-1尿烷）,各组动物数量均为20只,雌雄各半。试验期间及试验结束测定各组动物的体重、脏器重量和相对脏器重量、血液学及血生化指标,并进行统计分析。结果与结论：与阴性对照组相比,尿烷给药第2、3、11及21周尿烷组1和尿烷组2动物的体重显著下降;尿烷组1动物肺脏和脾脏绝对重量显著升高;尿烷组1和尿烷组2动物肺脏相对重量显著升高;尿烷组1动物NEU、RDW%、CHDW%以及尿烷组2动物LYM%、BASO%显著升高;尿烷组1及尿烷组2动物的血生化指标无明显改变。     

吉九里香碱体外诱导人大肠癌HCT-15细胞凋亡的机理研究

目的:探讨中药单体吉九里香碱体外诱导HCT-15细胞凋亡的分子作用机理。方法:采用Western Blotting、体外Bcl-xL蛋白竞争结合检测实验及RT-PCR对吉九里香碱诱导细胞凋亡的机制进行研究。结果:结果显示50μmol.L-1吉九里香碱分别作用HCT-15细胞6 h、12 h及24 h,P53蛋白表达水平基本没有变化;Cyto c呈时效性的从线粒体释放到胞质中,Bcl-2蛋白表达基本没有变化,Bcl-xL的表达被抑制在较低水平,吉九里香碱处理细胞6 h后Bax表达开始增加,Bax与Bcl-xL蛋白表达的相对比例上调;与死亡受体通路中相关的FADD表达未见异常,同时线粒体通路中的蛋白包括Caspase-7、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3等均没有被剪切,但相应的凋亡标志物PARP和Rb等以时间依赖形式被剪切;RT-PCR检测结果显示Bcl-2的mRNA水平基本不变,而Bax的mRNA水平随时间的增加而略有增加,说明吉九里香碱从基因水平影响Bax靶基因的转录表达;另外,吉九里香碱能明显竞争BH3与Bcl-xL蛋白的结合,强度甚至强于阳性药HA14-1。结论:吉九里香碱诱发H...     

牛蒡子苷元注射液对清醒Beagle犬心血管系统和呼吸系统的影响

目的通过对预先埋植有DSI遥测植入子的清醒Beagle犬皮下注射给予牛蒡子苷元注射液(NBZGY),评价对Beagle犬心血管系统和呼吸系统产生的潜在影响。方法采用8只已经成功埋植DSI遥测植入子(TL11M2-D70-PCTR)的Beagle犬,皮下注射给予NBZGY(0.05~5 mg·kg-1),每只清醒Beagle犬将在4个独立的给药日分别给予溶媒及3个剂量的NBZGY,每次给药间隔(含给药日)为2天。通过生理信号遥测系统连续测量和记录给药前、给药后1、1.5、2、3、4、5、6、12、24 h的心电(RR间期、心率、T波振幅、ST段、QRS间期、PR间期、QT间期)、体温、血压(收缩压、舒张压、平均压)、呼吸(潮气量、呼吸频率)等指标。结果给药后1、2、24 h,部分指标与同期溶媒对照组相比具有统计学意义(P<0.05),但因差异无剂量依赖性,故无生物学意义。结论本实验条件下,Beagle犬皮下注射给予NBZGY,心血管系统和呼吸系统均未见与供试品相关的明显改变。     

中草药及其活性成分抗肿瘤的研究进展

查阅国内外相关文献，综述中草药及其活性成分抗肿瘤方面的研究进展。根据中草药及其天然活性成分所诱发的不同生物效应将其抗肿瘤作用分为11类进行了详细介绍，展示了中草药用于防癌、抗癌的巨大潜能和美好前景。     

薯蓣皂苷的次皂苷元B（DRG）体外诱导人大肠癌HCT-15细胞凋亡的机制研究

 目的 探讨中药单体薯蓣皂苷的次皂苷元B(DRG)体外诱导HCT-15细胞凋亡的分子作用机制。方法 采用Western blotting、体外Bcl-xL蛋白竞争结合检测实验及逆转录PCR（RT-PCR）对DRG诱导细胞凋亡的机制进行了研究。结果 在HCT-15细胞中,DRG促发了线粒体调控的凋亡途径,细胞色素c呈时效性地从线粒体中释放到胞质中,同时Bax与Bcl-2蛋白表达的相对比例上调,caspase-9、caspase-3和PARP等被剪切成具有活性的片段,但是caspase-7却未见剪切,同时还不影响P53和Bcl-xL的表达;而与死亡受体途径相关的FADD表达无明显变化,caspase-8酶原也未见剪切;另外,DRG也不抑制BH3短肽与Bcl-xL的结合;RT-PCR检测结果表明,DRG诱导HCT-15细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax的mRNA水平的改变,进而导致Bcl-2蛋白表达水平下降,而Bax蛋白表达水平则明显增加,说明DRG诱发的细胞凋亡中涉及到Bcl-2和Bax基因水平的变化。结论 DRG诱发HCT-15细胞凋亡的分子机制在于从基因水平影响Bax和Bcl-2靶基因的转录表达,上调Bax/Bcl-2蛋白表达水平比例,并最终通过激活经典的线粒体途径而不是死亡受体途径来发挥其HCT-15细胞凋亡诱导作用,且对P53呈非依赖型。     

犬无束缚静脉输注给药的实现

目的建立犬无束缚静脉给药方法。方法将犬无束缚静脉给药装置(背心,输液保护套管,套管连接构件,精密微量输液监控器)组装,然后将该装置与埋植好留置针的犬连接,建立完整的输液通路给药开始。结果成功建立了犬无束缚静脉给药方法。结论设计合理、动物穿着舒适的给药装置,是犬无束缚静脉给药成败的关键因素。     

DNA-天坛痘苗复合型艾滋病疫苗Balb/c小鼠重复给药毒性研究

目的:对DNA天-坛痘苗复合型艾滋病疫苗进行重复给药毒性研究,以支持其Ⅰ期临床研究方案的制定。方法:Balb/c小鼠肌肉注射DNA疫苗3次后,皮内接种痘苗1次加强免疫。检测疫苗对一般毒理学指标的影响、监测疫苗的免疫原性、免疫毒性。结果:DNA天-坛痘苗复合型艾滋病疫苗具有较强的免疫原性,可以诱导较强的T细胞免疫反应且可以维持较长时间。未见疫苗相关的一般毒性和免疫毒性。结论:DNA天-坛痘苗复合型艾滋病疫苗可以诱导较强的体液免疫和细胞免疫反应,对一般毒理学指标未见显著影响,未见明显免疫毒性。目前该疫苗正处在临床研究阶段。     

中、美、日三国啮齿类饲料样品比较分析——24个月长期啮齿类致癌性实验的饲料选择

目的评估饲料品质、供应风险及价格,为24个月长期致癌性试验寻找最佳的饲料及饲料供应商。方法将日本进口MF18饲料,美国进口LabDiet饲料以及北京科澳生产的啮齿类饲料样品分别包装,委托专业检测实验室对常规营养成分、毒理及微生物指标进行检测,评估饲料品质;对各来源饲料的运输风险、非可控因素等可能影响饲料品质及稳定供应的方面进行评估;兼顾饲料价格作为参考评估因素。结果经评估,3种饲料品质均符合饲料国标GB14924-2001*的要求;以毒性研究关注的毒理指标作为评价标准,则3种饲料品质排序为:MF18饲料(最佳)—>LabDiet饲料(较佳)—>科澳国产饲料(佳);进口饲料的运输及供应稳定性相比存在较大风险;国产饲料价格相对便宜但未成为关键评估因素。结论经过综合评估,特殊定制的本地国产饲料被认定为是国家药物安全评价监测中心24个月致癌性试验用的最佳饲料。     

一种新强心苷类化合物的结构鉴定及其活性研究

目的 从弯蕊开口箭（Tupistra wattii Hook.f.）中寻找抗癌活性先导化合物。方法 使用稻瘟霉活性筛选体系进行活性追踪分离，并通过波谱分析，特别是二维核磁手段结合化学方法对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果 从弯蕊开口箭中分离得到3个具有很强细胞毒活性的强心苷，其中化合物2wattosideF是一个新化合物，并且它的细胞毒活性在3个强心苷中最强，其IC50值为0.011μmol/L。结论 wattoside F是一个具有很强细胞毒活性的新的强心苷类化合物。     

检测细胞凋亡的一种新方法

细胞凋亡又被称为细胞程序性死亡(programmedcelldeath,PCD),它是细胞的一种生理性死亡现象,是由基因或其它因素调控的活组织细胞自我消亡的过程.