川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的调控作用和川芎嗪干预的影响环节.方法将2.5 kb长度的人α1(Ⅰ)胶原基因启动子片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)"报告基因"组成的重组体pC0LH 2.5,采用脂质体法转染至培养的大鼠心肌成纤维细胞,分别加入AngⅡ和川芎嗪,ELISA法测定CAT活性.结果 AngⅡ可明显促进pCOLH 2.5片段的启动活性,川芎嗪能抑制AngⅡ的促pC0LH 2.5启动活性(P＜0.05).结论川芎嗪能在转录水平上阻断AngⅡ诱导的人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性增加,从而抑制Ⅰ型胶原的合成,阻滞和延缓心肌纤维化的发生发展.     

复春片的药理学研究

<正> 复春片是以补肾壮阳药淫羊霍、蜈蚣等为主体的复方制剂,具有温肾壮阳、益气和中、通经强筋、养胃安神的作用,主要用于治疗阳萎早泻症。中医理论认为阳萎和肾阳不足、命门火衰有关;现代医学研究认为肾阳与垂体-肾上腺轴密切相关。据此,我们观察了复春片对肾上腺组织、睾丸组织及其它方面的影响,现将观察结果报告如下。     

4味中药对体外培养成骨样细胞增殖的影响——对通补强骨方中主要组成药物的研究

应用UMR 10 6成骨细胞株 ,观察通补强骨方中的四味主要药物 淫羊藿、女贞子、黄芪、大黄对成骨细胞株增殖情况的影响。结果发现 :四种药物在适当浓度均能促进成骨细胞增殖。其中黄芪在低浓度 (5mg L)即显示促增殖作用 ,其作用强度与剂量无明显联系 ;淫羊藿、女贞子高浓度组 (5 0 0mg L)较低浓度组 (5mg L)促增殖作用有上升趋势 ;大黄中浓度 (10 0mg L)有促增殖作用 ,高浓度 (10 0 0mg L)有抑制成骨细胞增殖作用     

三七提取物对MNNG转化后GES-1细胞的促凋亡作用

目的:应用流式细胞测定法研究灌服三七提取物后的犬血清对胃癌前细胞的促凋亡作用.方法:采用被N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitroso-guanidine, MNNG)进一步转化后的永生化人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞(以下简称MC细胞)作为胃癌前病变细胞的体外研究模型;以三七水提物给彼格犬一次性灌胃,取给药前的血清、给药后2 h和6 h的血清作为实验药物血清.以流式细胞测定法分别检测2 h和6 h两个采血时间点上不同浓度的药物血清对MC细胞作用72 h后的促凋亡作用.结果:这两个时间点的含药血清能明显促进MC细胞的凋亡,与同样条件下用空白血清培养的MC细胞相比其凋亡率显著增加(P<0.05).在两个时间点的药物血清作用下的MC细胞,其G0/G1期细胞比例明显下降(P<0.05),而G2/M期细胞比例显著增加(P<0.05),但S期细胞比例并没有一致性的变化.结论:两个时间点的药物血清对MC细胞都有显著的促凋亡作用,且能显著降低G0/G1期的MC细胞比例及显著增加G2/M期的MC细胞比例,这可能是其抑制MC细胞增殖及促凋亡的原因之一.     

益气、活血药对血管紧张素Ⅱ建立的心肌细胞模型的影响

目的 研究益气、活血药对心肌细胞模型的影响。方法 血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用心肌细胞建立模型,用不同剂量的益气、活血药及其配伍复方进行干预。结果 益气、活血、益气活血药物均有保护心肌细胞的作用,益气活血复方疗效优于益气药和活血药,且较小剂量益气药与较大剂量的活血药配伍后作用明显(P<0.05)。结论在一定条件下,益气药与活血药配伍应用可增强疗效,且存在量效关系。     

心气虚证与血浆核酸含量关系的研究

菲啶溴红具有与核酸特异性结合生成较强荧光的特性,因此以菲啶溴红为探针测定核酸的荧光方法可检测组织匀浆及血浆中的核酸含量。利用此方法测定了36例正常人和41例心气虚患者的血浆核酸含量。结果显示心气虚患者的血浆核酸含量明显低于正常人,两者之间差异显著(P<0.01),提示心气虚证可影响脾胃的运化功能,增加全血及血浆粘度,从而使血流速度减慢,而造成体内核酸合成及代谢障碍,从而使患者血浆核酸含量下降。     

用酶免疫测定法检测原发性肺癌的癌胚抗原(CEA)和甲胎蛋白(AFP)

 本文用酶免疫测定法,将特制玻珠为载体,经戊二醛等处理使纯化抗体与之结合,共检查了42例原发性肺癌病人血清中CEA和AFP的含量。这些病人均经X线及病理细胞学或组织学确诊。部分病人在治疗期间作了CEA和AFP的动态观察,并对予后作了初步探讨,还对25例肺部炎症患者和46例正常人检查了血清CEA。50例正常人检查了血清AFP以兹比较。我们尚未查到国内有关这方面的资料,现将结果整理报告如下.     

黄芪、三七对下肢缺血患者骨髓干细胞体外分化作用的影响

目的探讨黄芪、三七对骨髓干细胞体外分化作用的影响。方法常规采集下肢缺血患者骨髓血,密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,在黄芪、三七不同浓度条件下贴壁扩增细胞。3周后行镜下细胞的形态学观察,流式细胞仪检测CD34 细胞的百分比。结果细胞呈梭形,束状排列,间杂有少量圆形细胞。与对照组比较,黄芪中剂量和低剂量组、三七中剂量组和高剂量组CD34 细胞的百分比均显著增加,差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。结论黄芪、三七有促进骨髓干细胞向血管内皮前体细胞(EPC)转化和增殖的作用。     

活血注射液对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞活化的影响

目的：观察活血注射液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达及与人单核细胞黏附作用的影响，并探讨核转录因子kappa B(NF-κB) 在其中的调控作用。方法：HUVEC与单核细胞的黏附率用蛋白定量法检测；ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达分别用RT-PCR技术和流式细胞仪检测；NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值用免疫细胞化学法测定。结果：ox-LDL作用HUVEC后12,24 h时，人单核细胞与HUVEC的黏附率显著升高, HUVEC中ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高, HUVEC的NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值明显增高，明显高于正常组(P<0.05，P<0.01)，而活血注射液可明显降低人单核细胞与HUVEC的黏附率和HUVEC ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达水平，以及显著降低HUVEC中NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值，与ox-LDL组相比均有显著性差异(P<0.05，P<0.01)，这种作用随着剂量的增加而增强。结论：活血注射液能通过下调内皮细胞表面ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达抑制单核-血管内皮细胞黏附,其可能机制是其通过抑制内皮细胞NF-κB p65的活性，从而发挥对血管内皮细胞的保护作用。     

常规制备家兔血清对人脐静脉内皮细胞-304的影响

目的：探讨中药血清药理学研究中常规制备的正常家兔血清浓度变化对培养体系中细胞的影响。方法：常规制备无污染、无溶血正常家兔血清，通过细胞形态学、台盼蓝染色活细胞计数、细胞毒四唑盐（MTT）比色试验、乳酸脱氢酶（LDH）及血管紧张素转换酶（ACE）等指标，观察5％、10％、20％、40％、60％和80％家兔血清对人脐静脉内皮细胞（VEC）－304的影响。结果：5％和10％两浓度组各指标均无变化，对VEC－304没有损伤作用。40％、60％和80％3个浓度组家兔血清浓度对细胞均有不同程度的损伤，而且随着浓度的增加，呈现出损伤加重的趋势，而20％的浓度从细胞形态、台盼蓝染色活细胞计数、MTT及ACE方面没有表现出明显的损伤作用，只有LDH含量差异有显著性（P＜0．01）。结论：常规制备的家兔血清在无污染和无溶血的情况下，其对细胞的作用浓度是有一定限制的，当达到40％或更高浓度时有较为明显的损伤。所以，在中药血清药理学研究中，应进行常规制备正常血清及含药血清的细胞毒实验，以尽量减少血清本身带给实验的影响。