血府逐瘀胶囊对兔主动脉SMC增殖脂质过氧化的影响

目前,经皮冠状动脉腔内成形术(percutaneous trans.1uminal coronary angioplasty,PTCA)已发展成为一种较成熟的介入性治疗手段,但PTCA术后约有25%～50%患者在PTCA术后3～6个月内发生再狭窄.PTCA术后再狭窄的形成是一复杂机制.血管平滑肌细胞(VSMC)增殖是PTCA术后再狭窄形成的关键环节[1].有资料显示[1],再狭窄的危险因素与自由基和脂质过氧化物有关.血府逐瘀汤源于<医林改错>,作为活血化瘀的经典名方在防治PTCA术后再狭窄的研究中,已经取得了一些成果,但尚未见有用含PTA术后动物血清合并药物血清进行离体定位靶细胞药理研究的实验.本实验主要观察PTA术后血府逐瘀胶囊治疗药物血清对SMC增殖、脂质过氧化的影响.     

三七提取物对MNNG转化后GES-1细胞的促凋亡作用

目的:应用流式细胞测定法研究灌服三七提取物后的犬血清对胃癌前细胞的促凋亡作用.方法:采用被N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitroso-guanidine, MNNG)进一步转化后的永生化人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞(以下简称MC细胞)作为胃癌前病变细胞的体外研究模型;以三七水提物给彼格犬一次性灌胃,取给药前的血清、给药后2 h和6 h的血清作为实验药物血清.以流式细胞测定法分别检测2 h和6 h两个采血时间点上不同浓度的药物血清对MC细胞作用72 h后的促凋亡作用.结果:这两个时间点的含药血清能明显促进MC细胞的凋亡,与同样条件下用空白血清培养的MC细胞相比其凋亡率显著增加(P<0.05).在两个时间点的药物血清作用下的MC细胞,其G0/G1期细胞比例明显下降(P<0.05),而G2/M期细胞比例显著增加(P<0.05),但S期细胞比例并没有一致性的变化.结论:两个时间点的药物血清对MC细胞都有显著的促凋亡作用,且能显著降低G0/G1期的MC细胞比例及显著增加G2/M期的MC细胞比例,这可能是其抑制MC细胞增殖及促凋亡的原因之一.     

黄芪、三七对下肢缺血患者骨髓干细胞体外分化作用的影响

目的探讨黄芪、三七对骨髓干细胞体外分化作用的影响。方法常规采集下肢缺血患者骨髓血,密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,在黄芪、三七不同浓度条件下贴壁扩增细胞。3周后行镜下细胞的形态学观察,流式细胞仪检测CD34 细胞的百分比。结果细胞呈梭形,束状排列,间杂有少量圆形细胞。与对照组比较,黄芪中剂量和低剂量组、三七中剂量组和高剂量组CD34 细胞的百分比均显著增加,差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。结论黄芪、三七有促进骨髓干细胞向血管内皮前体细胞(EPC)转化和增殖的作用。     

益气、活血药对血管紧张素Ⅱ建立的心肌细胞模型的影响

目的 研究益气、活血药对心肌细胞模型的影响。方法 血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用心肌细胞建立模型,用不同剂量的益气、活血药及其配伍复方进行干预。结果 益气、活血、益气活血药物均有保护心肌细胞的作用,益气活血复方疗效优于益气药和活血药,且较小剂量益气药与较大剂量的活血药配伍后作用明显(P<0.05)。结论在一定条件下,益气药与活血药配伍应用可增强疗效,且存在量效关系。     

心气虚证与血浆核酸含量关系的研究

菲啶溴红具有与核酸特异性结合生成较强荧光的特性,因此以菲啶溴红为探针测定核酸的荧光方法可检测组织匀浆及血浆中的核酸含量。利用此方法测定了36例正常人和41例心气虚患者的血浆核酸含量。结果显示心气虚患者的血浆核酸含量明显低于正常人,两者之间差异显著(P<0.01),提示心气虚证可影响脾胃的运化功能,增加全血及血浆粘度,从而使血流速度减慢,而造成体内核酸合成及代谢障碍,从而使患者血浆核酸含量下降。     

用酶免疫测定法检测原发性肺癌的癌胚抗原(CEA)和甲胎蛋白(AFP)

 本文用酶免疫测定法,将特制玻珠为载体,经戊二醛等处理使纯化抗体与之结合,共检查了42例原发性肺癌病人血清中CEA和AFP的含量。这些病人均经X线及病理细胞学或组织学确诊。部分病人在治疗期间作了CEA和AFP的动态观察,并对予后作了初步探讨,还对25例肺部炎症患者和46例正常人检查了血清CEA。50例正常人检查了血清AFP以兹比较。我们尚未查到国内有关这方面的资料,现将结果整理报告如下.     

活血注射液对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞活化的影响

目的：观察活血注射液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达及与人单核细胞黏附作用的影响，并探讨核转录因子kappa B(NF-κB) 在其中的调控作用。方法：HUVEC与单核细胞的黏附率用蛋白定量法检测；ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达分别用RT-PCR技术和流式细胞仪检测；NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值用免疫细胞化学法测定。结果：ox-LDL作用HUVEC后12,24 h时，人单核细胞与HUVEC的黏附率显著升高, HUVEC中ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高, HUVEC的NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值明显增高，明显高于正常组(P<0.05，P<0.01)，而活血注射液可明显降低人单核细胞与HUVEC的黏附率和HUVEC ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达水平，以及显著降低HUVEC中NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值，与ox-LDL组相比均有显著性差异(P<0.05，P<0.01)，这种作用随着剂量的增加而增强。结论：活血注射液能通过下调内皮细胞表面ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达抑制单核-血管内皮细胞黏附,其可能机制是其通过抑制内皮细胞NF-κB p65的活性，从而发挥对血管内皮细胞的保护作用。     

丹参酮Ⅱ_A对心衰心室重构I型胶原基因启动子活性的影响

目的探讨心衰心室重构中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的调控作用和中药单体丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TSN)药物干预的影响环节。方法将人α1(I)胶原基因上游-2.5 Kb长度的启动子片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因组成重组体pCOLH2.5,采用脂质体法转染至培养的大鼠心肌成纤维细胞和ELISA法测定CAT活性的方法,观察不同浓度TSN对pCOLH2.5活性及由AngⅡ诱导的pCOLH2.5活性的影响。结果AngⅡ可剂量依赖性地促进pCOLH2.5的活性,表现为其剂量增大时重组体CAT活性相对增加,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。TSN能抑制pCOLH2.5的活性,并随着药物浓度的增加,其抑制作用亦增强。与对照组、低浓度组比较,差异有显著性(P<0.05)。而且在与AngⅡ共同作用时,pCOLH2.5 CAT的升高幅度明显减少(P<0.01)。结论在心肌成纤维细胞中,AngⅡ具有促进人α1(Ⅰ)胶原基因启动子的转录活性作用。TSN能下调人α1(Ⅰ)胶原基因启动子的激活,并可部分拮抗AngⅡ的促进作用。     

丹参素和川芎嗪对血管紧张素Ⅱ致心肌间质成纤维细胞增殖相关基因的影响

目的通过研究活血药对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致心肌间质成纤维细胞增殖相关基因的影响,从分子生物学角度探讨活血中药的有效组分丹参素和川芎嗪在AngⅡ诱导心肌肥大反应中的作用机制。方法以胶原Ⅰ和胶原Ⅲ基因表达为心肌间质指标,采用一步法,应用TRIZOL Reagent提取总RNA,然后用RT-PCR方法测定胶原Ⅰ和胶原Ⅲ的mRNA表达。结果AngⅡ可显著增加胶原ⅠmRNA的表达(P<0.01),而Losartan可明显抑制AngⅡ所诱导的胶原ⅠmRNA的表达(P<0.01),而丹参素也可减少胶原ⅠmRNA的表达(P<0.01),川芎嗪虽无统计学意义,但也有减少胶原ⅠmRNA的趋势。AngⅡ同时也增加胶原ⅢmRNA的表达,Losartan可明显抑制AngⅡ所诱导的胶原ⅢmRNA的表达(P<0.01),而丹参素和川芎嗪也可减少胶原ⅢmRNA的表达(P<0.05)。结论活血药的有效组分丹参素和川芎嗪可抑制AngⅡ致心肌间质成纤维细胞胶原Ⅰ和胶原Ⅲ基因表达的增加,具有防止心肌细胞肥大和抗心肌间质纤维化作用,从而防治心脏肥厚。     

三七提取物含药血清对MNNG转化后GES-1细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响（英文）

目的：研究三七提取物犬药物血清作用于胃癌前细胞后,其凋亡相关基因蛋白表达的变化。方法：采用被N-甲基-N＇-硝基-N-亚硝基胍（N-methyl-N＇-nitroso-guanidine,MNNG）转化后的永生化人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞（简称MC细胞）作为胃癌前病变细胞的体外研究模型,用三七提取物一次性灌胃彼格犬,取给药后2 h的血清作为实验药物血清。以免疫组织化学法检测药物血清对MC细胞作用72h后bcl-2、Bax和p21^WAF1 3种凋亡相关基因蛋白表达情况,并与正常培养的MC细胞相比较。结果：药物血清作用后的MC细胞中Bax和p21^WAF1的表达较正常培养的MC细胞升高（P〈0.01）;Bcl-2表达较正常培养的MC细胞降低（P〈0.01）。结论：三七提取物入血后可能是通过影响bcl-2、Bax和p21^WAF1等对于凋亡具有调控作用的基因表达来实现对胃癌前细胞的抑制增殖及促凋亡作用的。