心力衰竭能量代谢重构及治疗的最新研究进展

近来,能量代谢重构成为研究心力衰竭发生机制的一大热点。能量代谢重构是一个包括了能量底物利用的转变、 线粒体结构功能的障碍及高能磷酸盐代谢改变的一系列复杂的生物化学反应。通过对这一复杂反应的进一步研究,发现 了治疗心力衰竭的新靶点和新方向。     

高纯度银杏黄酮注射液对记忆功能及心肌组织超氧化物歧化酶的影响

背景:银杏黄酮的多种药用价值已被国内外认可,许多西方国家大量进口银杏叶提取物制成注射液出口,国内银杏叶产量大,但应用少,且没有注射制剂。目的:观察银杏黄酮注射液中总黄酮甙含量的提高和槲皮素甙含量的提高对小鼠记忆力、家兔缺血再灌注损伤心肌组织超氧化物歧化酶含量及家兔血液流变学的影响。设计:随机对照动物实验。单位:河北省职工医学院。材料:实验动物选择昆明种小白鼠(三四个月)90只。日本大耳白家兔(四五个月)32只。自制高纯度银杏黄酮注射液(5mL含银杏叶提取物17.5mg,其中银杏黄酮甙8.7mg,占提取物的49.8%,萜内酯4.61%);德国产银杏黄酮注射液(金纳多):德国威玛舒培大药房生产(标明物含5mL含银杏叶提取物17.5mg,其中银杏黄酮甙4.2mg,占24%)。方法:实验于2002-09/11在河北省职工医学院实验中心动物室完成。①将90只小鼠随机分为6组:自制银杏黄酮注射液1,2mL/kg组,德国产银杏黄酮注射液l,2mL/kg组,模型组和对照组,每组15只。各组分别腹腔注射所试药物,模型组和对照组采用生理盐水腹腔注射。连续10d。于第10天用药lh后,腹腔注射氢溴酸东莨菪碱2mL/kg,复制学习记忆障碍模型。10min后,将其置于跳台仪中,适应后给予36V电压刺激。训练5min,24h复测,记录触电潜伏期及5min内触电次数。②取日本大耳白家兔32只,随机分为正常对照组、德国产银杏黄酮注射液1mL/kg组、自制银杏黄酮注射液1.0,0.5mL/kg组,每组8只。耳缘静脉注射所试药物,3d后取血测血液流变学指标。③将32只家兔随机分为4组,自制银杏黄酮注射液组1,2mL/kg组,德国产银杏黄酮注射液2mL/kg组,生理盐水组,每组8只。制备家兔心肌缺血再灌注损伤模型,家兔冠状动脉结扎30min再松解方法造成心肌缺血灌注损伤,并于再灌注时即刻由颈动脉插管按不同组推注所试药物。于再灌注前分别注射所试药物,于再灌注前、再灌注30min、60min股动脉取血,测定血浆超氧化物歧化酶。处死动物后取心肌组织测定超氧化物歧化酶。主要观察指标:①记忆实验中触电潜伏期及5min内触电次数。②血液流变学指标和心肌组织超氧化物歧化酶含量侧定结果。结果:在实验过程中各组实验动物无死亡,全部进入结果分析。①记忆实验:自制银杏黄酮注射液组与德国产银杏黄酮注射液组跳台实验潜伏期和5min错误次数均明显好于对照组,差异具有显著性意义(P<0.01/0.05)。自制银杏黄酮注射液1mL/kg组5min错误次数少于同剂量德国产银杏黄酮注射液组,差异有显著性意义。②血流变学:自制银杏黄酮注射液1.0,0.5mL/kg组,德国产银杏黄酮注射液组1mL/kg组均可降低全血黏度低切值、红细胞刚性指数、红细胞压积等指标。③超氧化物歧化酶含量:自制银杏黄酮注射液1,2ml/kg与对照组比较均能明显提高缺血心肌超氧化物歧化酶含量,并呈剂量依赖关系。德国产银杏黄酮注射液1ml/kg组能明显提高缺血心肌超氧化物歧化酶含量,自制银杏黄酮注射液1mL/kg组较德国产银杏黄酮注射液2mL/kg组缺血心肌超氧化物歧化酶含量提高显著。结论:自制高纯度银杏黄酮注射液和德国产银杏黄酮注射液均能提高记忆力;且同剂量下自制高纯度银杏黄酮注射液作用优于德国产银杏黄酮注射液。     

血府逐瘀汤对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护机制

目的：观察血府逐瘀汤对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用，为其临床上治疗心肌梗死等疾病，促进心功能的恢复提供理论依据。 方法：实验于2005-05在河北省职工医学院病理生理学教研室完成，清洁级大耳白兔40只，雌雄不限，体质量2．0-2．3b。随机分组5组。每组8只，即假手术组，模型组，血府逐瘀汤0．78g／mL组、血府逐瘀汤1．46g／mL组、血府逐瘀汤2．34g／mL组。血府逐瘀汤：当归9g，生地9g，桃仁12g．红花9g，枳壳6g，赤芍6g，柴胡3g，甘草6g，桔梗4．5g，川芎4．5g，牛膝9g。煎前经清水漂洗，蒸馏水浸泡30min后。直火煮沸30min，药渣再加蒸馏水，煎沸20min，合并两次滤液、过滤，浓缩至每毫升含生药0．78g、1．46g及2．34g 3种，冷藏备用，生药由保定市中药公司提供。假手术组与模型组生理盐水灌胃，血府逐瘀汤组分别以0．78g／mL，1．46g／mL，2．34g／mL血府逐瘀汤药液灌胃10mL／d：共7d，末次灌胃1h后行手术。采用结扎兔左冠状动脉前降支的方法制备缺血再灌注模型，观察血府逐瘀汤对兔血清中磷酸激酶，心肌组织的丙二醛、超氧化物歧化酶、肌酸激酶含量的影响；对心电图ST段的影响；对血液流变学的影响。采用光镜观察，标本用甲醛固定。石蜡包埋，苏木精-伊红染色．400倍光镜观察心肌形态结构。 结果：实验动物全部进入结果分析。①兔心肌缺血再灌注后模型组心肌组织肌酸激酶、丙二醛含量与假手术组比较差异显著[（155．469&;#177;29．196），（250．415&;#177;37．533）U／mg；（6．474&;#177;1．741），（3．278&;#177;0．782）mol／g；P〈0．01]；血府逐瘀汤0．78g／mL，1．46g,／mL，2．34g／mL组肌酸激酶、丙二醛含量、超氧化物歧化酶、磷酸激酶与模型组比较差异显著（P〈0．01）。②模型组ST段显著抬高，同模型组比较。血府逐瘀汤0．78g／mL，1,46g／mL，2．34g／mL组ST段抬高的程度呈下降趋势。③血府逐瘀汤1．46g／mL，2．34g／mL组全血黏度（5s^-1 ,30s^-1,200s^-1）、血浆比黏度、纤维蛋白原与对照组比较差异均有显著性（P〈0．01-0．05）。④假手术组心肌形态结构基本正常。有少量中性粒细胞浸润；模型组有心肌间质出血、细胞变性、组织灶性坏死和炎性细胞浸润，有较大范围细胞凝聚、崩解；血府逐瘀汤0．78g／mL组少量细胞变性、组织灶性坏死，血府逐瘀汤1．46g／mL，2．34g／mL组仅有少量炎细胞漫润和间质出血。 结论：血府逐瘀汤通过抑制脂质过氧化反应，减少对超氧化物歧化酶的消耗，减少血清中磷酸激酶、心肌组织中的丙二醛，有效的保护心肌细胞，对心肌缺血再灌注损伤有较强的保护作用。     

三聚氰胺对大鼠肾脏毒性损害的病理研究

目的：大鼠喂食含三聚氰胺饲料后观察肾脏损害的病理所见、生化改变及其超声表现。方法：实验动物随机分为2组,每组20例,第1组为正常对照组,给予正常维持鼠料20d;第2组为研究组（亚急性损害组）,喂食掺有三聚氰胺的鼠料20d,每组完成饲养后先做超声检查,观察大鼠肾脏的形态、大小、皮质厚度、实质回声情况及肾内是否有结石形成,然后留取尿液、静脉血做相关检验,最后解剖大鼠,留取双侧。肾脏标本,福尔马林浸泡,待病理切片观察。结果：正常对照组病理所见、生化结果、超声表现未见异常改变。研究组超声显示20只大鼠的40个肾脏实质部回声增强,肾内均可见散在多发的细小强回声结石影,较大者位于集合系统内,伴有声影;8个肾脏出现集合系统分离;实验室检查14只大鼠出现结晶尿,其中8只出现三聚氰胺结晶,20只大鼠尿素升高,10只肌酐增高,14只出现二氧化碳结合率降低;研究组有不同程度病理损害,典型表现有肾组织广泛淤血伴灶性出血,’肾小管伴有点状坏死及成纤维细胞增生,数个肾小管（以皮质肾小管为多）内可见黄绿色针状扇形排列结晶体,相应肾小管扩张,部分区域间质内可见数个淋巴细胞浸润。结论：三聚氰胺可引起大鼠肾脏病理损害,并可导致结石形成,沉积于肾脏,造成肾损害。     

高纯度银杏黄酮对衰老小鼠学习记忆功能的影响

目的：观察高纯度银杏黄酮对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆功能的影响并探讨其作用机制,并与脑蛋白水解物的效果相比较.方法：实验于2004-11/2005-01在河北省职工医学院实验中心动物实验室进行,取ICR小鼠120只随机分为5组,每组24只：①银杏黄酮5,10 mL/kg组：腹腔注射D-半乳糖400 mg/kg,然后腹腔注射银杏黄酮5,10 mL/kg.②脑蛋白水解物组：腹腔注射D-半乳糖400 mg/kg和脑蛋白水解物注射液5 mg/kg（0.4 mL）.③模型组：腹腔注射D-半乳糖400 mg/kg和生理盐水0.4 mL.④正常对照组：腹腔注射生理盐水0.4 mL.以上用药均共1次/d,连续8周.8周后跳台实验观察和测定各组小鼠学习记忆能力,然后颈椎脱臼处死小鼠,测定脑组织中乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶和超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量.结果：经补充后120只进入结果分析.①跳台实验结果：银杏黄酮5,10 mL/kg组和脑蛋白水解物组小鼠学习记忆训练时的错误次数均少于模型组（P＜0.05）,潜伏期长于模型组（P＜0.05）,但3组间比较无差异.②脑组织中乙酰胆碱酯酶活力：银杏黄酮5,10mL/kg组和脑蛋白水解物组低于模型组[（14.00&;#177;0.53）,（11.00&;#177;2.90）,（18.84&;#177;0.49）,（24.50&;#177;1.96）nkat/g,P＜0.05],但银杏黄酮5,10mL/kg组间比较无差异.③单胺氧化酶活力：银杏黄酮5,10 mL/kg组和脑蛋白水解物组低于模型组[（14.49&;#177;2.50）,（18.43&;#177;3.98）,（22.32&;#177;.86）,（26.85&;#177;5.46）nkat/g,P＜0.05],但3组间比较无差异.④超氧化物歧化酶、丙二醛水平：银杏黄酮5,10 mL/kg组和脑蛋白水解物组高于模型组（P＜0.05）,但3组间比较无差异.结论：高纯度银杏黄酮治疗可明显改善D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆能力,其机制可能与增强脑组织乙酰胆碱及单胺类递质活性、清除自由基、抗脂质过氧化等作用有关.其作用与脑蛋白水解物相似,但不同剂量间无差异（5,10 mL/kg）.     

血府逐瘀汤对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护机制

目的:观察血府逐瘀汤对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用,为其临床上治疗心肌梗死等疾病,促进心功能的恢复提供理论依据。方法:实验于2005-05在河北省职工医学院病理生理学教研室完成,清洁级大耳白兔40只,雌雄不限,体质量2.0～2.3kg。随机分组5组,每组8只,即假手术组,模型组,血府逐瘀汤0.78g/mL组、血府逐瘀汤1.46g/mL组、血府逐瘀汤2.34g/mL组。血府逐瘀汤:当归9g,生地9g,桃仁12g,红花9g,枳壳6g,赤芍6g,柴胡3g,甘草6g,桔梗4.5g,川芎4.5g,牛膝9g。煎前经清水漂洗,蒸馏水浸泡30min后,直火煮沸30min,药渣再加蒸馏水,煎沸20min,合并两次滤液、过滤,浓缩至每毫升含生药0.78g、1.46g及2.34g3种,冷藏备用,生药由保定市中药公司提供。假手术组与模型组生理盐水灌胃,血府逐瘀汤组分别以0.78g/mL,1.46g/mL,2.34g/mL血府逐瘀汤药液灌胃10mL/d,共7d,末次灌胃1h后行手术。采用结扎兔左冠状动脉前降支的方法制备缺血再灌注模型,观察血府逐瘀汤对兔血清中磷酸激酶,心肌组织的丙二醛、超氧化物歧化酶、肌酸激酶含量的影响;对心电图ST段的影响;对血液流变学的影响。采用光镜观察,标本用甲醛固定,石蜡包埋,苏木精-伊红染色,400倍光镜观察心肌形态结构。结果:实验动物全部进入结果分析。①兔心肌缺血再灌注后模型组心肌组织肌酸激酶、丙二醛含量与假手术组比较差异显著[(155.469±29.196),(250.415±37.533)U/mg;(6.474±1.741),(3.278±0.782)μmol/g;P<0.01];血府逐瘀汤0.78g/mL,1.46g/mL,2.34g/mL组肌酸激酶、丙二醛含量、超氧化物歧化酶、磷酸激酶与模型组比较差异显著(P<0.01)。②模型组ST段显著抬高,同模型组比较,血府逐瘀汤0.78g/mL,1.46g/mL,2.34g/mL组ST段抬高的程度呈下降趋势。③血府逐瘀汤1.46g/mL,2.34g/mL组全血黏度(5s-1,30s-1,200s-1)、血浆比黏度、纤维蛋白原与对照组比较差异均有显著性(P<0.01～0.05)。④假手术组心肌形态结构基本正常,有少量中性粒细胞浸润;模型组有心肌间质出血、细胞变性、组织灶性坏死和炎性细胞浸润,有较大范围细胞凝聚、崩解;血府逐瘀汤0.78g/mL组少量细胞变性、组织灶性坏死,血府逐瘀汤1.46g/mL,2.34g/mL组仅有少量炎细胞浸润和间质出血。结论:血府逐瘀汤通过抑制脂质过氧化反应,减少对超氧化物歧化酶的消耗,减少血清中磷酸激酶、心肌组织中的丙二醛,有效的保护心肌细胞,对心肌缺血再灌注损伤有较强的保护作用。     

高纯度银杏黄酮注射液对记忆功能及心肌组织超氧化物歧化酶的影响

背景：银杏黄酮的多种药用价值已被国内外认可．许多西方国家大量进口银杏叶提取物制成注射液出口。园内银杏叶产量大，但应用少，且没有注射制剂。 目的：观察银杏黄酮注射液中总黄酮甙含量的提高和槲皮素甙含量的提高对小鼠记忆力．家兔缺血再灌注损伤心肌组织超氧化物歧化酶含量及家兔血液流变学的影响。 设计：随机对照动物实验。 单位：河北省职工医学院。 材料：实验动物选择昆明种小白鼠（三四个月）90只。日本大耳自家兔（四五个月）32只。自制高纯度银杏黄酮注射液（5mL含银杏叶提取物17．5mg。其中银杏黄酮甙8.7mg，占提取物的49．8％，萜内酯4．61％）；德国产银杏黄酮注射液（金纳多）：德国威玛舒培大药房牛产（标明物含5mL舍银杏叶提取物17．5mg，其中银杏黄酮甙4．2mg，占24％）。 方法：实验于2002—09／11在河北省职工医学院实验中心动物室完成。①将90只小鼠随机分为6组：自制银杏黄酮注射液1.2mL／kg组，德国产银杏黄酮往射液1.2mL／kg组．模型组和对照组．每组15只。各组分别腹腔沣射所试药物，模型组和对照组采用生理盐水腹腔注射。连续10d。于第10天用药1h后，腹腔注射氢溴酸东茛菪碱2mL／kg．复制学习记忆障碍模型。10min后，将其置于跳台仪中，适应后给予36V电压刺激。训练5min，24h复测，记录触电潜伏期及5rain内触电次数。㈤取口本大耳自家兔32只，随机分为IE常对照组．德国产银杏黄酮注射液1mL／kg组、自制银杏黄酮注射液1，0，0．5mL／kg组。每组8只。耳缘静脉注射所试药物，3d后取血测血液流变学指标。②将32只家兔随机分为4组，自制银杏黄酮注射液组1.2mL／kg组，德国产银杏黄酮注射液2mL／kg组．生理盐水组，每组8只。制备家兔心肌缺血再灌注损伤模型．家兔冠状动脉结扎30min再松解方法造成心肌缺血灌注损伤，并于再灌注时即刻由颈动脉插管按不同组推注所试药物。于再灌注前分别注射所试药物，于再灌注前、再灌注30min、60rain股动脉取血，测定血浆超氧化物歧化酶。处死动物后取心肌组织测定超氧化物歧化酶。 主要观察指标：①记忆实验中触电潜伏期搜5min内触电次数。②血液流变学指标和心肌组织超氧化物歧化酶含量侧定结果。 结果：在实验过程中各组实验动物尢死亡，全部进入结果分析。①记忆实验：自制银杏黄酮注射液组与德国产银杏黄酮注射液组跳台实验潜伏期和5min错误次数均明显好于对照组，差异具有显著性意义（P〈0．01／0．05）。自制银杏黄酮注射液1mL／kg组5min错误次数少于同剂量德国产银杏黄酮注射液组，差异有显著性意义。②血流变学：自制银杏黄酮注射液1．0．0．5mL／kE组，德国产银杏黄酮注射液组1mL／kg组均可降低全血黏度低切值、红细胞刚性指数、红细胞雎积等指标。③超氧化物歧化酶含量：自制银杏黄酮注射液1.2ml／kg与对照组比较均能明显提高缺血心肌超氧化物歧化酶含量，并呈剂量依赖关系。德国产银杏黄酮注射液1ml／kg组能明显提高缺血心肌超氧化物歧化酶含量，自制银杏黄酮注射液1ml／kg组较德国产银杏黄酮注射液2ml／kg组缺血心肌超氧化物歧化酶含量提高显著。 结论：自制高纯度银杏黄酮注射液和德国产银杏黄酮注射液均能提高记忆力；且同剂量下自制高纯度银杏黄酮注射液作用优于德国产银杏黄酮注射液。     

家兔静脉动脉化后充压拉伸实验研究

目的建立家兔静脉动脉化模型,探讨静脉动脉化前后以及动静脉之间力学参数差异。方法 24只家兔随机分成实验组12只、对照组12只。实验组家兔完成静脉动脉化模型的建立,使得静脉桥中流过动脉血,造模完成后术后4周取下静脉桥。同时获取对照组家兔单侧颈外静脉和颈总动脉,三者同时完成充压拉伸力学测试,并采用HE染色和免疫组织化学技术观察。结果 24只家兔无死亡,静脉桥内均血流通畅。随着血管内升压,血管外径变化规律均为先变化而后稳定于某一固定值附近;静脉弹性比动脉更差,静脉血管外径随着血管内升压快速增大并达到其弹性极值;相较而言,动脉血管外径则是缓慢增大。HE染色显示,静脉血管的管壁厚度更薄;静脉动脉化后其管壁厚度增加。静脉动脉化后增殖细胞抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及α-actin阳性表达,证实平滑肌细胞出现增殖,静脉血管桥出现再狭窄趋势。移植入动脉系统后的静脉弹性较移植前有所提升。结论伴随血管内升压,相较动脉,静脉更快地达到其弹性极限,长期处于高压状态下的静脉内膜易因此受损;静脉动脉化后,随着静脉内膜的逐渐增厚,血管腔再狭窄的趋势逐渐明显,其弹性较移植前有所提升。     

胶原蛋白三螺旋重复序列1调控表皮生长因子受体信号通路促进高血压心肌重构形成及其机制

目的 探讨胶原蛋白三螺旋重复序列1(CTHRC1)调控表皮生长因子受体(EGFR)信号通路在高血压心肌重构形成中的作用及其机制。方法 将SD大鼠随机分为以下3组：野生型对照(WTC)组、AngⅡ+Stuffer组和AngⅡ+CTHRC1组,每组10只。AngⅡ+Stuffer组和AngⅡ+CTHRC1组大鼠分别以1×10¹¹v.g.的剂量通过尾静脉注射Stuffer或CTHRC1进行预处理;注射4周后,大鼠接受渗透微型泵给药AngⅡ[1.5 mg/(kg·d)]持续4周以发展高血压,通过经胸超声心动图无创测量心脏功能,并采用Masson三色染相比,AngⅡ+stuffer组高血压大鼠心脏组织纤维化显著增加(P <0.05)。CTHRC1给药进一步加剧了高血压大鼠这些病理变化(P <0.05)。心脏超声显示,AngⅡ+CTHRC1组大鼠左心室射血分数降低和分数缩短程度较AngⅡ+stuffer组更大(P <0.05)。与对照组相比,AngⅡ色评估心脏纤维化。从2至3日龄SD大鼠的心脏中分离出心脏成纤维细胞(CF),分为：Con组、AngⅡ组、Ang...     

三聚氰胺对大鼠肾脏的毒性损害

目的观察三聚氰胺对大鼠肾脏的毒性损害。方法实验动物随机分为2组,每组20例,第1组为正常对照组,给予正常维持鼠料20d;第2组为研究组（亚急性损害组）,喂食掺有三聚氰胺的鼠料20d。完成饲养后先做超声检查,观察大鼠肾脏的形态、大小、皮质厚度、实质回声情况及肾内是否有结石形成,然后留取尿液、静脉血做相关检验,最后解剖大鼠,留取双侧肾脏标本,福尔马林浸泡,待病理切片观察。结果正常对照组病理所见、生化结果、超声表现未见异常改变。研究组超声显示,20只大鼠的40个肾脏实质部回声增强,肾内均可见散在多发的细小强回声结石影,较大者位于集合系统内,伴有声影,8个肾脏出现集合系统分离;实验室检查14只大鼠出现结晶尿,其中8只出现三聚氰胺结晶,20只大鼠尿素升高,10只肌酐增高,14只出现二氧化碳结合率降低;研究组有不同程度病理损害,典型表现有肾组织广泛淤血伴灶性出血,肾小管伴有点状坏死及成纤维细胞增生,数个肾小管（以皮质肾小管为多）内可见黄绿色针状扇形排列结晶体,相应肾小管扩张,部分区域间质内可见数个淋巴细胞浸润。结论三聚氰胺可引起大鼠肾脏病理损害,并可导致结石形成,沉积于肾脏,造成肾损害。