松果体区肿瘤切除术中对Galen静脉及其属支的处理

目的　为了有效地显露松果体区 ,探讨切断阻挡手术入路的大脑大静脉 (Galen静脉 )的属支的可行性。方法　总结过去 10年来本院 2 6例松果体区肿瘤病例 ,经Poppen入路或经Krause入路切除肿瘤时对Galen静脉及其分支的处理情况。结果　 15例经Krause入路的患者小脑表面的桥静脉被离断 ,有 8例切除了一侧小脑中央前静脉 ,另有 2例双侧该静脉被切断 ;11例Poppen入路的患者中 ,有 9例离断一侧的枕内静脉 ;有 12例四叠体的静脉一支或两支被切断。结论　在处理阻挡术野的静脉时 ,应观察该血管走行、位置、直径、吻合支以及引流情况 ,特别要注意是否存在变异 ,不宜贸然将其灼断。     

Knocking-down of Nogo-A Gene Expression in PC12 Cell Line by Plasmid-based RNAi

To study the inhibitory effect of Nogo-A shRNA on cell line PC12, the Nogo-A shRNA （short hairpin RNA, or shRNA） was designed and synthesized. The annealed shRNA template was inserted into plasmid pGenesil-1 containing enhanced green fluorescent protein （EGFP） gene by gene cloning technique to generate eukaryotic expression vector. The recombinant plasmid was transfected into PC12 cells by lipofecamine2000 and the mRNA and protein expression level of Nogo-A gene was detected by RT-PCR and Western blotting 48 h after the transfection. Gene sequencing showed that that the Nogo-A shRNA eukaryotic expression vector was successfully constructed. No significant change was found in the Nogo-A mRNA and protein expression level in empty vector-transfected group as compared with controls （P〉0.05）, while the expression level in shRNA-transfected group decreased significantly （P〈0.05）. It is concluded that the pGenesil-1/Nogo-AshRNA recombinant plasmid can effectively suppress the expression of Nogo-A gene in PC12 cells.     

NgR靶向治疗胶质瘤的分子生物学机制

神经轴突生长抑制因子受体(NgR)是髓鞘相关抑制因子Nogo-A、髓鞘相关糖蛋白(MAG)和少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)的共同作用途径.NgR在胶质瘤细胞黏附迁移、凋亡、神经干细胞分化及血管再生重塑等方面发挥着重要作用,有望成为针对神经胶质瘤进行分子靶向治疗的关键分子.     

NgR1复合物的实验研究进展与干扰策略

成年哺乳动物周围神经系统损伤后可有效再生,但中枢神经系统损伤后却很难再生。在分子途径促进损伤中枢神经系统轴突再生的研究中,发现了3种髓磷脂相关抑制性蛋白：Nogo、髓鞘相关糖蛋白（myelinassociatedglycoprotein,MAG）、少突胶质细胞髓鞘糖蛋白（oligodendroeytemyelinglycoprotein,OMgp）在中枢神经系统损伤后发挥着抑制轴突生长的作用,并发现Nogo—A、MAG、OMgp存在于中枢白质的髓鞘内外环和少突胶质细胞的表面,通过与共同受体NgR1特异性结合诱导生长锥塌陷并抑制轴突生长。进而提出了通过阻断NgR1复合物及其下游的信号转导途径来促进神经元轴突再生的设想。本文拟对近年来关于NgR1复合物的研究加以综述。     

Nogo-A短发夹样RNA真核表达载体的构建

目的:构建靶向Nogo-A基因的短发夹样RNA(shorthairpinRNA,shRNA)真核表达载体。方法:根据Genebank中提供的Nogo-A基因核苷酸序列,设计并化学合成2条shRNA,退火后克隆到pGenesil-1质粒的U6启动子下游从而构建重组载体,行限制性内切酶酶切和基因测序进行鉴定。结果:序列分析结果表明,两个重组质粒的shRNA编码序列均成功插入到预定位置。结论:成功构建靶向Nogo-A的shRNA真核表达载体,为进一步研究Nogo-A蛋白的功能及轴突再生抑制的基因治疗提供了新的方法。     

枕部经小脑幕入路切除松果体区肿瘤的并发症

松果体区肿瘤位于颅腔内深在部位,术中需分离、解剖的结构复杂,容易造成损伤,致术后出现各种并发症.本研究总结湖北省新华医院和华中科技大学同济医学院附属协和医院近10年来采用枕部经小脑幕入路切除松果体肿瘤的病例,对术后并发症进行探讨,现报道如下:     

钙离子参与Nogo-A抑制轴突生长的作用

目的探索胞内钙离子在Nogo-A抑制轴突生长中的作用,以进一步了解Nogo-A抑制轴突生长的信号转导机制。方法利用激光共聚焦显微镜技术,检测Nogo-A作用于小脑颗粒细胞后不同时段胞内钙离子的浓度,并观察加入钙通道阻滞剂——尼莫地平对Nogo-A抑制轴突生长的影响。结果小脑颗粒细胞内钙离子浓度升高发生于加入Nogo-A后5min,30min时达到最高,然后逐渐下降,2h后恢复至正常水平;加入尼莫地平组的轴突生长与对照组相比有显著差异。结论钙离子可能参与了Nogo-A抑制轴突生长的信号转导。     

局灶性脑缺血再灌注致大鼠大脑皮质tau蛋白异常高度磷酸化

目的 探讨局灶性脑缺血再灌注后大鼠顶叶皮质神经元tau蛋白磷酸化的变化,及其与神经细胞凋亡的关系,以阐明脑梗死和阿尔茨海默病间的关系.方法 制作局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫印迹法检测局灶性脑缺血再灌注后大鼠顶叶皮质tau蛋白在Serl99/202、Ser396、Ser404和Tyr231位点磷酸化和不溶性磷酸化tau蛋白的变化;TUNEL法和免疫荧光双标法检测脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和磷酸化tau蛋白的关系.结果 缺血再灌注6 h后顶叶皮质tau蛋白在Ser199/202、Ser396、Ser404和Tyr231位点发生异常高度磷酸化,不溶性磷酸化tau蛋白显著增加.脑缺血再灌注后3 d神经细胞的凋亡和tau蛋白高度磷酸化呈显著正相关关系.结论 脑缺血再灌注后发生阿尔茨海默病样病理变化,脑梗死可能促进了阿尔茨海默病的发生、发展.     

去垢剂法提取脂质筏及鉴定

目的：建立一种用去垢剂提取脂质筏的方法。方法：依据脂质筏在4℃时不溶于去垢剂的特性，用去垢剂处理去除细胞器和细胞核碎片的细胞膜成分，溶解非脂质筏成分，再用蔗糖密度梯度离心法将去垢剂不溶组分分离出来。用窖蛋白-1(caveolin-1)作为脂质筏的特异性标记，Western-blot分析检测caveolin-1的表达。结果：在离心管15％～20％蔗糖溶液界面处可见一条白色的闪亮环带，Western blot结果显示DAB染色后在相对分子质量24000处可见棕色条带。结论：去垢剂法是一种简单、有效提取脂质筏的方法，成功分离脂质筏是研究它参与信号转导过程的首要条件和基础。