马鞭草醇提液对滋养层细胞SDH抑制作用的研究

我们已经证实马鞭草乙醇提取液能抑制体外培养的滋养层细胞的生长及其 HCG的分泌功能。本实验用定量组织化学的方法研究了马鞭草乙醇提取液对滋养层细胞中与能量代谢密切相关的琥珀酸脱氢酶的影响 ,揭示了马鞭草抗早孕作用的又一作用机理。1　材料和方法1 .1　药剂　马鞭草乙醇提取液由南京医科大学附属医院药剂科提供 ,浓度为 1 mg/ml,p H7.0～ 7.2 ,渗透压为 2 95～ 31 0 mmol/ml。1 .2　绒毛组织的分组和培养　取停经 50天左右健康妇女人流绒毛组织 ,用灭菌 Hank's液漂洗 ,修去蜕膜 ,剪成 2 mm3左右的小块 ,置于培养瓶内 ,培养瓶中加含…     

马鞭草醇提液中有效部位的提取及筛选

以人早孕滋养层细胞体外培养作为实验手段 ,筛选出对马鞭草有明显抑制作用的醇提液有效部位 ,并对其作用机制进行了研究。根据极性大小 ,利用系统溶剂法萃取 ,得出 4个不同的部位 ,即石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位及正丁醇部位。以体外培养人早孕分离纯化的绒毛膜滋养层细胞和人绒毛膜癌JAR细胞作为实验手段 ,应用MTT细胞增殖抑制实验 ,筛出了其中一个有效部位。氯仿部位 (C部位 )能明显抑制两种滋养细胞增殖 ,能使孕鼠胎盘滋养层细胞及蜕膜细胞染色质边聚 ,核空泡化 ,细胞固缩等退行性改变 ,明显抑制胎鼠生长 ,胚重 (0 .10 0± 0 .0 8) g、胚长 (0 .2 3± 0 .12 )cm ,与生理盐水对照组胚重 (0 .2 3± 0 .12 )g、胚长 (0 .84±0 2 4)cm相比有显著差异。应用图像分析系统对胎盘微血管分布的绝对面积与相对面积进行定量分析 ,结果发现明显小于对照组。一定浓度的马鞭草C部位能致滋养细胞及蜕膜退行性改变 ,胎盘组织萎缩 ,血流量减少 ,从而影响胚胎正常的生长发育     

马鞭草醇提液对绒毛膜癌JAR细胞增殖的影响

目的　探讨马鞭草醇提液 (ae Vo)对绒毛膜癌 JAR细胞株的影响。方法　 JAR细胞株与人肝癌 SMMC- 772 1细胞株及人胚肺 2倍体成纤维细胞株 (2 BS)体外培养比较 ,应用溴化甲噻唑基四唑 (MTT)法、荧光法测得细胞相对生长曲线及增殖抑制率。结果　 ae Vo对 JAR细胞有明显抑制作用 ,于加药后 4 8h,增殖抑制率为 (71.9± 4 .0 ) %及 (69.6± 2 .0 ) % ,MTT法及荧光法所测结果无明显差异 (P>0 .0 5 )。 ae Vo对 SMMC- 772 1细胞及 2 BS细胞无明显影响。结论　 ae Vo具有抗绒癌作用 ,且作用具有特异性 ,有关机制需进一步研究     

早孕期人绒毛组织的体外培养及绒毛膜促性腺激素分泌的动态观察

建立人孕６～８周绒毛组织块直接体外贴壁静止培养方法，对培养的绒毛滋养层细胞进行形态观察，并对绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）分泌的动态进行观察。结果表明：培养第２天滋养层细胞开始向外生长，第５天最旺盛，细胞生长可维持１０天左右。ＨＣＧ于培养第５天达高峰，第７天开始下降，第１３天降至可测水平以下。这种培养方法的建立不仅为抗早孕药物筛选提供一个离体模型，而且有助于滋养层细胞功能的研究。     

马鞭草醇C部位抗人绒毛膜癌JAR细胞作用机制的研究

应用MTT法及3H -TdR同位素标记细胞增殖抑制实验 ,在马鞭草醇提液中筛出其中一个活性部位 ,命名为C部位。一定浓度的马鞭草C部位能明显抑制JAR细胞的增殖 ,加药后 48h细胞增殖仅为相应对照组的 3 0 0 5 % ;EGFR的表达为对照组的2 7 0 4% ;见明显的凋亡小体 ;琼脂糖凝胶电泳可见典型的“阶梯状”条带 ,流式细胞术出现凋亡峰。马鞭草C部位已确定对绒癌细胞具有明显的促凋亡作用 ,故而该药有望能成为治疗绒毛膜癌或逆转多药耐药的有效药物     

马鞭草对体外培养绒毛形态及HCG分泌影响的研究

本研究以正常妊娠６～８周早孕绒毛体外培养为实验手段，观察马鞭草乙醇提取液不同剂量对绒毛细胞形态及绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）分泌功能的影响，探讨了马鞭草抗早孕的细胞学作用机理。结果表明：２５ｍｇ／ｍｌ和５０ｍｇ／ｍｌ马鞭草乙醇提取液能明显抑制绒毛细胞生长及激素分泌。于加药后２４小时，部分细胞变圆，培养液中ＨＣＧ量下降，４８小时大多数细胞固缩死亡，ＨＣＧ仅为对照组的１／４。一定浓度的马鞭草乙醇提取液可直接破坏滋养层细胞，抑制ＨＣＧ分泌，为临床进一步用于抗早孕提供理论依据     

马鞭草醇提液对绒毛膜癌JAR细胞增殖及表皮生长因子受体？…

用溶剂蒸馏法制备了马鞭草醇提液(EV),分别作用于体外培养的绒毛膜癌JAR细胞、人肝癌SMMC-7721细胞及人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)。MTT法及荧光法检测结果表明,EV对JAR细胞增殖有明显抑制作用,两种方法测得抑制率分别为71．9％±4．0％和69．6％±2．0％;同时还测得EV对JAR细胞质中表皮生长因子受体(EGFR)的表达也有明显抑制作用,含25mg／ml和50mg／mlEV的培养液对其抑制率分别为36．7％和80．6％。而EV对SMMC-7721细胞及2BS细胞则无明显影响。EV对体外培养的绒毛膜癌JAR细胞有明显抑制作用,且具有特异性,这一作用可能与抑制EGFR的表达有关。