急性髓系白血病Evi1基因表达的研究

目的 :探讨急性髓系白血病中 Evi1基因表达及意义。方法 :应用 RT- PCR方法检测了 94例急性髓系白血病 (AML ,包括初治 4 9例 ,复发 2 3例 ,缓解 2 2例 )患者及 1 0名正常对照 Evi1基因的表达。结果 :1 0名正常人骨髓单个核细胞中无 Evi1 m RNA的表达。AML 患者 Evi1基因总的阳性表达率为 1 8.1 % (1 7/94 ) ,M5型未见表达 ,其中初治、复发、缓解组的 Evi1基因阳性率分别为2 6 .5 %、1 7.4 %、0 ,初治和复发组差别无显著性 (P=0 .5 5 4 )。M3患者中 Evi1、PML /RARα双阳性组与 PML /RARα单阳性组相比复发率高 (P<0 .0 5 ) ,早期死亡率高。 Evi1阳性的 AML患者多数生存期短。结论 :Evi1基因是一个原癌基因 ,在髓系白血病的发病中起重要作用 ,是髓系白血病预后不良的一个指标。     

流式细胞仪测定成人急性白血病骨髓细胞DNA含量的临床意义

目的 探讨成人急性白血病患者骨髓细胞异倍体检出率,细胞周期时分布的临床意义。方法 应用流式细胞仪检测５４例成人ＡＬ骨髓细胞ＤＮＡ倍体及细胞周期时相分布。结果 （１）成人ＡＬ异倍体检出率为３５．１９％,其中急性非淋巴细胞白血病为３５．５５Ｚ％,急性淋巴细胞白血病为３３．３３％。（２）１２例初诊检出异倍体中８３．３３％达ＣＲ时异倍体消失。（３）１９例初诊时检出的异倍体中亚二倍体占７３．６８％,超二倍体     

MA或MOED方案联合造血生长因子动员自体外周血干细胞效果观察

目的：探讨米托蒽醌(MIT)为主的MA或MOED化疗方案联合造血生长因子对自体外周血干细胞(APBSC)的动员效果。方法：12例患者用MA联合造血生长因子动员方案(Ⅰ组)，8例患者用MOED联合造血生长因子动员方案(Ⅱ组)，两组均在白细胞(WBC)降至最低点开始回升时。皮下注射G-CSF或G-CSF+GM-CSF至采集结束。wBC恢复至＞2.5×109／L，CD34)+细胞比例＞1.0％时，用血细胞分离机连续2天采集APBSC。当累计采集的单个核细胞(MNC)达到4×108／kg以上时停止采集。以文献报道的环磷酰胺联合造血生长因子动员方案为对照(Ⅲ组)。结果：Ⅰ组动员方案在两次采集的CD34)+细胞数量优于Ⅱ组动员方案。Ⅰ组和Ⅱ组两种动员方案在第1次采集的CD34)+细胞数、采集次数、骨髓抑制强度方面优于Ⅱ组动员方案，但是第2次采集CD34)+细胞较少。20例患者连续采集APBSC 2次，共采集到MNC(4.36±2.08)×108／kg，CD34)+细胞(9.87±7.30)×106／kg，CFU-GM(2.86±2.10)×104／kg。18例接受自体外周血干细胞移植(APBSCT)者造血功能均获得满意重建。结论：以MIT为主的化疗联合造血生长因子是一种安全、高效的APBSC动员方法。     

骨髓增生异常综合征患者血清甲状腺激素测定及其临床意义

本文采用放射免疫法（ＲＩＡ）对３１例骨髓增生异常综合征（ｍｙｅｌｏｄｇｓｐｌａｓｔｉｃ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＭＤＳ）患者进行甲状腺激素水平检测。其目的了解甲状腺激素在ＭＤＳ中的变化，寻找其变化与疾病的相互关系。现将结果报告如下。 资料和方法 一、对象： （一）正常对照组：共３０例（男２０，女１０），年龄１９～５８岁，中位年龄３４岁。均为本院健康职工和医学院学生，无肝、肾、内分泌系统等相关性疾病。 （二）ＭＤＳ组：共３１例（男１４，女１７），年龄１５～６４岁，中位年龄３６岁。其中ＭＤＳ（ＲＡ）期９例；Ｍ…     

内部核糖体进入位点及应用

真核细胞翻译的起始能在两种不同机制下发生,即帽依赖及内部核糖体进入位点方式。后者需通过形成复杂的RNA结构元件称为内部核糖体进入位点／片段(IRES),位于信使RNA 5′端非翻译区(5′-NTR),在反式作用因子存在的情况下可募集核糖体且不需帽子结构启动翻译。随着研究的深入越来越多的病毒及细胞IRES被发现,并逐渐应用到生命科学的研究中。     

血友病基因治疗的研究进展

血友病是由于编码凝血因子的基因异常引起的出血性疾病,基因治疗有望成为治愈血友病最理想的治疗措施。本文就基因治疗中的转基因载体、靶细胞的选择、免疫反应作一综述。     

人凝血因子Ⅷ体外高效表达体系的建立

目的 构建含有人凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因的慢病毒载体pXZ208-BDDhFⅧ,观察其在体外培养细胞中的表达情况.方法 用限制性内切酶酶切法获得B区缺失的人FⅧ基因(BDDhFⅧ cDNA)片段,将其克隆至慢病毒载体pXZ208的多克隆位点,构建慢病毒表达载体pXZ208-BDDhFⅧ,限制性内切酶酶切法鉴定载体的连接方向.采用三质粒共转染293T细胞制备病毒颗粒,包装后感染人肺、肾HLF细胞、张氏肝(Chang-Liver)细胞和成人骨髓基质细胞(MSC),并以pXZ171作为对照.流式细胞术(FCM)检测载体的感染效率,一期法检测细胞培养上清中FⅧ的活性,PCR检测BDDhFⅧ基因的整合.结果 成功构建了慢病毒载体pXZ208-BDDhFⅧ,包装后能有效感染多种靶细胞,感染效率分别为:HLF细胞(74.52±7.57)%、MSC(42.34±5.84)%和Chang-Live细胞(27.24±6.53)%.感染后48 h检测到HLF细胞、Chang-Liver细胞和MSC培养上清中有FⅧ的表达,FⅧ活性分别为(54.1±5.6)%、(22.5±2.9)%和(12.5±2.7)%.PCR检测到目的 基因的整合.结论 成功构建了慢病毒表达载体pXZ208-BDDhFⅧ,在体外可以有效感染多种靶细胞并表达有活性的FⅧ.     

PY20抗体检测慢性髓系白血病细胞内酪氨酸磷酸水平的临床应用

本研究探讨PY20抗酪氨酸磷酸单克隆抗体检测在慢性髓系白血病（CML）诊断中的特异性及其临床应用的可能性。采用抗PY20和CD45抗体标记,通过流式细胞术检测28倒初诊CML患者治疗前后PY20阳性率,比较其与bcr—abl融合基因及Ph染色体结果的符合率。另外,随访监测7例异基因造血干细胞移植后CML患者的PY20阳性率、bcr—abl融合基因及Ph染色体的变化。结果表明：@28例初诊CML患者PY20在慢性期、加速期、急变期表达率分别为（40．31±1．22）％、（77．28±1．14）％,（78．12±1．32）％。CML慢性期PY20袁达率低于加速期或急变期（P〈0．05）,加速期和急变期之间无显著差异（P〉0．05）。②28例初诊CML患者经治疗后获得CR、PR、NR患者的PY20阳性率分别为（15．56±1．51）％、（38．73±2．31）％、（60．43％±2．04）％。CR患者PY20阳性率明显低于PR及NR的患者（P〈0．05）。PR患者低于NR患者（P〈0．05）。③初诊患者PY20与RT—PCRbcr-abl检测的阳性符合率为92．31％,阴性符合率为95．45％;PY20与Ph染色体检测的阳性符合率为88．46％,阴性符合率为95．46％。④7例患者移植后Ph染色体均为阴性,移植后bcr—abl融合基因持续阴性5例,持续阳性2例。此7例PY20细胞表达均为阴性。结论：①流式细胞术检测CML细胞酪氨酸磷酸化水平阳性率有较好的特异性及敏感性,可应用于CML的早期、快速辅助诊断。②PY20阳性率对CML分期、病情监测及疗效判断有一定的临床指导意义。⑧流式细胞术、RT—PCIR及染色体核型分析能相互补充提高CML的诊断率。     

混合骨髓移植

混合骨髓移植(MBMT)可诱导形成混合嵌合体,减轻移植物抗宿主病,同时保留移植物抗白血病效应,是治疗多种血液病和诱导特异性移植耐受的一种有效手段.本文对MBMT作用特点和机制以及临床应用等方面进行综述.