非清除性异基因骨髓移植治疗小鼠白血病的实验研究

目的　研究非清除性异基因骨髓移植 (BMT)及其加供者淋巴细胞输注 (DLI)治疗小鼠白血病是否在保留移植物抗白血病效应 (GVL)的同时 ,又能减轻移植物抗宿主病 (GVHD)及移植相关并发症。方法　采用L6 15淋巴细胞白血病小鼠模型 ,非清除性预处理后移植BALB c小鼠骨髓细胞和脾细胞。分 4组 :清除性BMT对照组 (A组 )、非清除性预处理组 (B组 )、非清除性BMT组 (C组 )、非清除性BMT +DLI组 (D组 )。通过受鼠生存期、外周血白细胞和L6 15细胞计数、死亡鼠尸解观察GVL效应 ;通过体重改变、弓背、翘毛、腹泻等表现和肝脏、小肠、皮肤病理学检查观察GVHD ;通过染色体检查和PCR检测嵌合状态。结果　A、B、C、D组生存时间分别为 (2 0 .3± 13.4 )d、(15 .9± 1.1)d、(2 1.6± 1.7)d和 (37.8± 2 .0 )d ,C组和A组生存时间无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,C组生存时间长于B组 (P <0 .0 1) ,D组长于C组 (P <0 .0 1) ;A组有 6 0 %出现GVHD表现及病理学改变 ,而C组和D组均无典型GVHD表现和病理学改变 ;A组有 4 0 %在 2周内死于移植相关并发症 ,C组和D组均无移植相关死亡发生 ;A组一直保持异基因嵌合 ,C组渐被排斥。结论　非清除性BMT有一定的GVL效应 ,加DLI能增强GVL效应 ;非清除性BMT能减轻GVHD及移植相关并发症。     

昆明山海棠提取物对异基因骨髓移植小鼠调节性T细胞的影响

目的 研究昆明山海棠（THH）提取物减轻异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病（GVHD）作用及可能机制。     

同源异型盒基因CDX1和CDX2使食管腺癌细胞恶性降低

目的探讨同源异型盒基因CDX1和CDX2对食管腺癌细胞表型的影响。方法用携带人CDX1或CDX2的表达载体转染食管腺癌细胞系SEG-1,观察形态、生长率变化、分裂指数、致瘤性等。结果CDX1或CDX2单独作用都使SEG-1出现类腺样生长排列、生长率下降、分裂指数降低、致瘤性减弱,CDX2的作用大于CDX1。结论CDX1和CDX2均能促进食管腺癌细胞SEG-1分化,减低其恶性。     

腹部按摩加热敷治疗剖宫产术后腹胀疗效观察

目的：观察腹部按摩加热敷治疗剖宫产术后发生腹胀的临床效果。方法：选择剖宫产术后腹胀产妇60例，随机分为实验组和对照组，每组30例。实验组采用腹部按摩加热敷，对照组采用肛管排气方法。方法实施后密切观察及记录肛门排气时间、腹胀消失时间，倾听产妇主诉，观察和记录不适反应。结果：两组产妇经治疗后取得临床效果即肛门开始排气后腹胀消失时间、需实施次数、实施不适反应，比较有显著差异（P〈0．05），实验组明显优于对照组（P〈0．05）。结论：腹部按摩加热敷治疗剖宫产术后腹胀见效快、操作简便，有推广价值。     

Evi-1反义寡核苷酸对人红白血病细胞系HEL的抑制作用

Evi 1(ecotropicvirusintegrationsite 1)定位于染色体3q2 6 ,为一原癌基因 ,与髓系恶性肿瘤的发生密切相关[1 ] 。Evi 1基因编码含两个锌指区的蛋白 ,能特异地结合基因启动子DNA序列 ,发挥转录调节作用[2 ] 。正常人骨髓和外周血细胞Evi 1mRNA表达阴性[1 ] 。我们的初步研究结果表明 ,近 5 0 %的骨髓增生异常综合征 (MDS)患者Evi 1基因表达阳性 ,Evi 1的表达水平与MDS向急性髓系白血病 (AML)演变有关[3,4 ] 。为进一步探讨Evi 1在AML发生和发展中可能的作用 ,我们观察了Evi 1反义寡核苷酸 (Evi 1 AS)对人红白血病细胞系HEL增…     

论民营医院参与医疗卫生服务供给的公平性

随着社会经济发展和医药卫生体制改革的深化,我国全民医保这一目标已基本实现。新形势下,人民群众的医疗卫生服务需求增长迅速,在大型公立医院“空间失配”的情况下,“看病难”的问题依然十分严重。该文试图以公共治理为出发点,从提高医疗卫生服务的供给能力和效率的角度来讨论民营医院参与医疗卫生服务供给的公平性。     

Evi1基因在急性髓系白血病中的表达及意义

目的　探讨急性髓系白血病 (AML)中Evi1基因的表达及意义。方法　应用半定量RT -PCR方法检测了HEL白血病细胞系 (Evi1阳性细胞株 )、94例AML(初治 49例 ,复发 2 3例 ,缓解 2 2例 )患者及 10名正常对照Evi1基因的表达。结果　① 10名正常人骨髓单个核细胞中无Evi1mRNA的表达 (阴性 ) ,HEL细胞系Evi1阳性。②AML患者Evi1基因总的阳性表达率为 18.1% (17/94) ,M5型未见表达 ,M1～M4各型的阳性率无差异 (P >0 .0 5)。AML初治、复发、完全缓解的Evi1基因阳性率分别为 2 6.5%、17.4%、4.5% ,各组间无明显差异 (P >0 0 5)。③AML初治患者中Evi1阳性表达者首次完全缓解 (CR1)后缓解持续时间短于Evi1阴性表达者 (P <0 0 1) ,早期病死率 (确诊后 3个月内死亡 )明显升高 (P <0 .0 1)。结论　Evi1基因在AML的发病中可能起一定作用 ,可作为判断AML预后不良的一个指标     

Ⅱ类抗原反式激活因子和人白细胞抗原-DR检测方法的比较

目的研究Ⅱ类抗原反式激活因子(CⅡTA)与人白细胞抗原-DR(HLA-DR)表达的相关性，探讨CⅡTA在移植物抗宿主病(GVHD)中检测的意义。方法 从健康人外周血分离获得T细胞，给予干扰素-γ(IFN-γ)l000U／ml后，在不同时间用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CⅡTA mRNA表达，用免疫印迹法检测HLA-DR抗原的表达。然后，给予Statld反义寡核苷酸(As)抑制CⅡTA，分别检测CⅡTAmRNA及HLA-DR抗原在各自表达量最高时间点的变化。结果 CⅡTA mRNA在IFN-γ作用后5h开始表达，至14h表达量最高，此后逐渐下降；HLA-DR抗原在28h可检测出，52h表达量最高，此后逐渐下降，至76h仅可检测到少量抗原的表达；给予As后与对照组相比，CⅡTA mRNA和HLA-DR表达量均下降。结论CⅡTA与HLA-DR表达成正相关性，且先于HLA-DR出现，因此有可能作为检测GVHD的早期指标。     

砷剂与化疗双诱导治疗急性早幼粒细胞白血病疗效观察

我们对急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者应用三氧化二砷 (As2 O3 )同时联合常规化疗方案即双诱导进行诱导缓解期治疗 ,达到完全缓解 (CR)后再用As2 O3 与不同联合化疗交替进行缓解后治疗 ,取得较好效果 ,报告如下。病例和方法1　病例　 17例APL均为我院 1997年 1月至 2 0 0 3年 6月住院患者。其中初治 14例 ,经维甲酸治疗未缓解 1例 ,维甲酸治疗CR后复发 2例。2　诊断与疗效判定2 .1　诊断标准和疗效判定标准 :诊断及治疗效果判断均按照文献 [1]标准。2 .2　PML/RARα融合基因检测 :As2 O3 治疗前、治疗缓解后用巢式聚合酶链反应法…     

含绿色荧光蛋白的慢病毒载体的构建及表达

目的　构建以泛醌启动子 (PUB)驱动绿色荧光蛋白 (GFP)表达的慢病毒载体三质粒表达系统 ,并建立其包装细胞系获得GFP的表达。方法　载体的构建采用限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接等方法。三质粒系统中 ,转移质粒含PUB启动子及标志基因GFP ,包装质粒为ΔNRF ,内含CMV启动子和来自胰岛素基因的Poly(A)位点 ,包膜蛋白质粒编码水疱性口炎病毒G糖蛋白 (VSV -G)。载体构建成功后 ,用磷酸钙沉淀法将三质粒共转染来源于人胚肾细胞系的包装细胞——— 2 93T ,12h后在荧光显微镜下观察绿色荧光的表达情况。转染后 72h收集病毒上清 ,采用 6孔板培养感染细胞 ,荧光显微镜计数GFP阳性细胞法测定病毒滴度。结果　成功构建了含PUB启动子驱动GFP表达的质粒pXZ5。转染 2 93T细胞后 12h在荧光显微镜下均观察到较强的绿色荧光 ,证实了GFP的表达 ,成功构建了慢病毒载体的三质粒系统 ,建立了慢病毒载体的包装细胞系。 72h后 ,GFP的荧光强度较 12h增强 ,每一视野下 ,GFP表达阳性的细胞比例达 5 0 %左右。病毒浓度的测定在未进行超速离心浓缩的情况下达 2× 10 8U L。结论　成功构建了含PUB启动子驱动GFP表达的的慢病毒载体三质粒表达系统 ,转染2 93T细胞后获得了GFP的表达 ,完成了慢病毒载体包装细胞系的建立