小型猪慢性心肌缺血模型的建立与无创遥测技术的应用

为建立小型猪慢性心肌缺血模型和应用无创遥测技术的评价方法,本研究采用维生素D3和异丙肾上腺素复合高脂饮食的方法建立了小型猪慢性心肌缺血模型;并利用无创遥测技术对小型猪慢性心肌缺血模型的症状进行检测与评价,同时对五指山小型猪、巴马小型猪和西藏小型猪的运输应激和高脂诱导发生动脉粥样硬化(AS)的危险因素进行评估。建立了巴马小型猪慢性心肌缺血模型与评价技术规范,明确了无创遥测技术可用于心肌缺血模型的症状检测和评价,界定了小型猪运输应激后需4周以上的适应恢复期。并发现了高脂环境下五指山小型猪、巴马小型猪和西藏小型猪发生高血脂、高血压、高胰岛素血症等AS危险因素的不同特征,这为小型猪在心血管疾病研究中的选择和应用提供参考。     

高脂诱导五指山小型猪动脉粥样硬化模型的建立及Lp-PLA2的表达调控

目的 高脂诱导建立五指山小型猪动脉粥样硬化（AS）模型,观察脂蛋白相关磷脂酶A₂（Lp-PLA₂）在AS模型血浆和斑块中的表达变化。方法 将10只五指山小型猪随机分为正常对照（Ctr）组4只饲喂普通饲料、AS模型（AS model）组6只饲喂高脂饲料,连续造模24周。造模24周时,空腹取前腔静脉血测定总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、甘油三酯（TG）、C-反应蛋白（CRP）、Lp-PLA₂活性和成分的变化,并取主动脉进行油红O染色以及取腹主动脉血管行HE染色和IL-6免疫组化染色,观察血管脂质沉积和斑块病理以及IL-6蛋白表达变化。采用RT-PCR和Western Blot法观察腹主动脉组织中Lp-PLA₂mRNA和蛋白的表达情况。结果 与正常对照组比,AS模型组体重、体质量指数（BMI）、TC、LDL-C、HDL-C、CRP、Lp-PLA₂活性和成分均显著升高（P < 0.05,P < 0.01）,同时主动脉脂质沉积明显（P < 0.01）和AS斑块形成,腹主动脉组织中Lp-PLA₂mRNA和蛋白表达以及IL-6蛋白表达均显著升高（P < 0.05）。结论 长期高脂饮食24周能诱发五指山小型猪AS,且Lp-PLA₂在参与血管炎症和AS斑块形成中发挥了关键作用。     

基于3.0 T磁共振成像系统初步观察WHBE兔脑部形态解剖结构

目的 基于3.0 T磁共振成像（MRI）技术,活体观察WHBE兔脑部形态解剖结构,累积WHBE兔脑的影像学基本生物学数据,为进一步拓宽WHBE兔的应用提供背景资料。方法 成年雄性WHBE兔9只,用3%戊巴比妥钠溶液静脉注射麻醉,行3.0 T MRI加兔脑专用线圈常规横断面和矢状面扫描,并测量分析脑部的各种结构大小。结果 MRI扫描可成功获得活体WHBE兔脑矢状面和横断面T2WI或T1WI图像,可完整清晰地观察到活体WHBE兔的嗅球、大脑、小脑和垂体等基本结构,并发现了4只兔脑T2WI中左右两侧颞叶海马区高信号,相应区域在T1WI出现低信号外,其余均无异常。同时,获得了额叶、海马、大脑、侧脑室、垂体等相关解剖结构的参考值。结论 采用3.0 T磁共振成像系统加上兔脑专用线圈,可以清晰地观察到WHBE兔脑部的各种形态解剖结构,并初步建立了WBHE兔脑影像学基本数据。     

高脂饮食对西藏小型猪胰岛素抵抗及肝胰岛素受体底物1、2表达的影响

目的 探讨高脂饮食对西藏小型猪胰岛素抵抗（IR）及肝胰岛素受体底物（IRS）1、2表达的影响。方法 将10只西藏小型猪随机分为正常对照组（Ctr）5只饲喂普通饲料、IR模型（IR model）组5只饲喂高脂饲料,连续造模12周。造模12周后,称重并测量体长,计算体质量指数（BMI）,空腹取前腔静脉血测定总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）、空腹血糖（FBG）和胰岛素（insulin）,计算胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment-estimated insulin resistance,HOMA-IR）;同时进行糖耐量试验,并计算糖耐量曲线下面积（AUC）;取肝组织检测IRS-1和IRS-2基因和蛋白表达,并行油红O、PAS和HE染色,分别观察肝脂质沉积、糖原及组织病理变化。结果 与正常对照组比,IR模型组体重、BMI指数、TC、LDL-C、HDL-C、FFA、FBG、insulin和HOMA-IR指数均显著升高（P<0.05,P<0.01）;糖耐量试验显示血糖和胰岛素水平曲线下降延缓,而AUC_血糖和AUC_胰岛素均明显升高（P<0.05,P<0.01）;肝组织中出现脂质沉积、糖原增加和局部肝细胞浊肿、部分胞核消失或被挤向一端,偶见淋巴细胞浸润;同时肝组织中IRS-1和IRS-2 mRNA和蛋白表达均显著降低（P<0.05,P<0.01）。结论 高脂饮食可引起西藏小型猪胰岛素抵抗,肝组织IRS-1和IRS-2表达降低是高脂饮食影响西藏小型猪胰岛素敏感性的分子机制之一。     

区域折射人工晶状体SBL-3对年龄相关性白内障的治疗效果

目的：观察区域折射人工晶状体SBL-3在年龄相关性白内障患者中的临床应用效果。

方法：选取2016-02/2017-12期间本院诊治的年龄相关性白内障患者90例90眼,随机分为对照组(45例45眼)和观察组(45例45眼)。对照组植入单焦点人工晶状体,观察组植入区域折射人工晶状体SBL-3。比较两组患者手术前后的裸眼视力、VF-14量表评分、角膜内皮细胞情况及术后对比敏感度。

结果：术前两组患者的裸眼视力、VF-14量表评分及角膜内皮细胞情况无明显差异(均P>0.05)。术后12wk,观察组患者的裸眼视力、VF-14量表评分优于对照组,明光及暗光对比敏感度低于对照组(均P<0.05),而角膜内皮细胞情况、明光眩光及暗光眩光对比敏感度无明显差异(均P>0.05)。

结论：区域折射人工晶状体SBL-3在年龄相关性白内障患者中的临床应用效果较好,对患者的视觉质量有积极的改善作用,且对角膜的不良影响较小。     

WHBE兔与日本大耳白兔冠脉结扎致心肌缺血模型的比较研究

目的 复制WHBE兔冠脉结扎所致心肌缺血模型,并与日本大耳白兔比较其心血管系统的敏感性.方法 雄性WHBE兔和日本大耳白兔各20只,随机分成伪手术组和模型组,每组10只,伪手术组只开胸不结扎,模型组采用冠脉结扎复制心肌缺血模型,各组分别在造模前,造模后60 min观察sT段抬高程度,并取血测定血浆AST、CK、LDH活性的变化;用NBT染色法,结合图像分析软件计算心肌缺血梗死程度.结果 与伪手术组比,冠脉结扎后WHBE兔和日本大耳白兔模型组ST段明显抬高（P〈0.01）,梗死面积程度明显增加（P〈0.01）,且血浆AST、CK、LDH活性水平均显著升高（P〈0.05,P〈0.01）;与日本大耳白兔比,WHBE兔冠脉结扎所致心肌觖血的ST段、梗死面积程度和血浆AST、CK、LDH活性水平的上升变化程度均略高于日本大耳白兔,以梗死面积程度变化最为显著（P〈0.05）.结论 WHBE兔对冠脉结扎所致心肌缺血较为敏感,是比较理想的心肌缺血模型,更适合于心血管缺血性疾病的研究.     

WHBE兔血气-电解质分析及与日本大耳白兔和新西兰白兔比较研究

目的探讨WHBE兔、日本大耳白兔和新西兰白兔血气、电解质指标的差异性。方法取WHBE兔、日本大耳白兔和新西兰白兔经耳中动脉取肝素抗凝血,在NOVA血气电解质分析仪上测定血气、电解质指标。结果与日本大耳白兔比较,WHBE兔pH值、PCO2、PO2、SO2、BE-ECF、BE-B、SBC、HCO3^-、TCO2、a／A和P02／FI11个指标均明显低于日本大耳白兔（P〈0．05,P〈0．01）,而Osm、Na^＋和Mg^＋＋明显高于日本大耳白兔（P〈0．01）;与新西兰白兔比较,WHBE兔pH值明显低于新西兰白兔（P〈0．01）。而Mg^＋＋明显高于新西兰白兔（P〈0．01）。结论上述结果为WHBE兔标准化提供可靠的生物学数据,同时为WHBE兔在呼吸系统和心血管疾病中的应用提供了实验依据。     

冠心宁片对犬急性心肌缺血时冠脉流量的影响

目的:研究冠心宁片对急性心肌缺血犬冠脉流量的影响.方法:将48只Beagle犬随机分为伪手术组、模型对照组、冠心宁片高、中、低剂量组、阳性对照组.采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制急性心肌缺血模型,观察犬的冠脉流量、心肌血流量、冠脉阻力,并检测结扎前及给药后30、60、120、180min时心肌缺血犬血浆一氧化氮(NO)含量.结果:冠心宁片各剂量组与模型组、伪手术组相比较,冠脉流量、心肌血流量增加(P<0.05),NO表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),冠脉阻力有效降低(P<0.05).结论:冠心宁片主要通过增加冠脉流量、降低冠脉阻力、升高NO表达水平等环节发挥抗心肌缺血作用.     

实验兔面部提升模型的建立及可吸收软组织拉提整形带的应用

目的 建立实验兔面部提升模型,并进一步评估可吸收软组织拉提整形带(整形带)对皮肤的提升作用,为整形带的临床应用提供实验依据。方法 取36只日本大耳白兔随机分成模型对照组(6只)和整形带提升组(30只),均采用面部皮肤切除术制作面部皮肤提升模型,其中整形带提升组面部皮肤切除术后植入整形带,而模型对照组仅行面部皮肤切除提升术;术后观察4周内各组实验兔的一般情况、皮肤提升效果以及植入后整形带的性能分析和皮下组织病理变化。结果 术后各兔在3~7 d内皮肤创口愈合,未见感染发生,植入4周期间未见整形带移位或断裂,仅见二组齿孔周边有局部发白;与模型对照组比,整形带提升组MA和MB距离均显著降低(P<0.01),但整形带在面部皮肤提升模型兔体内的生物学拉力随植入时间延长而有显著增加(P<0.01),4周时生物学拉力达到18.62 N;另外,植入后整形带二组齿和板抗张强度在植入4周时降低显著(P<0.01),且二组齿和板抗张力强度分别保持在35.07 N和53.31 N,同时二组齿/板抗张强度比值在植入4周期间均保持恒定(P>0.05);此外,整形带的重均分子量(Mw)、峰值分子量(Mp)、Z均分子量(Mz)和粘度均有随植入时间的延长而逐渐降低(P<0.01);并且其分散度Mz/Mw比值亦在植入2周后开始逐渐显著降低(P<0.01),并且皮下植入整形带后无明显病理改变。结论 本研究已成功建立了实验兔面部皮肤提升模型,整形带能明显提升皮肤筋膜系统,并在体内完整维持4周以上,可适用于临床衰老性损容病症的面部软组织拉提整形除皱。     

RAPD标记技术用于WHBE兔近交系培育中的遗传分析

目的 探讨用随机引物扩增多态性DNA技术对大耳白黑眼兔近交系培育中的遗传监测作用.方法 选用F4、F5、F6和F7代共70只WHBE兔的皮肤组织样品提取基因组DNA,用60个随机引物对基因组DNA进行PCR扩增,根据电泳结果筛选出其中25个多态性较高的引物进行RAPD-PCR分析,再利用Popgene 3.2统计软件对共检测到的584个扩增片段进行遗传分析,获得实验数据.结果 ①F4代扩增得到124条片段,F5代扩增得到150条片段,F6扩增得到152条片段,F7代扩增得到158条条带;其中F4代与F5代的共有条带数为105,F5代与F6代的共有条带数为119,F6代与F7代的共有条带数为125.②F4代与F5代的遗传相似度为0.7674,F5代与F6代的遗传相似度为0.7984,F6代与F7代的遗传相似度为0.8092.结论 随着WHBE兔近交培育代数的增加,遗传相似度呈上升趋势,说明RAPD技术可以用于WHBE兔近交系培育的遗传检测.