输注自体骨髓间充质干细胞延长犬活体肝移植存活的实验研究

目的 探讨输注自体骨髓间充质干细胞延长犬活体肝移植存活的机制.方法 14只受体犬建立活体肝移植模型后,随机分为对照组和处理组,对照组仅做活体肝移植,处理组在活体肝移植的基础上,术中输注自体骨髓间充质干细胞,术后观察两组犬的生存时间、肝功能(AST、ALT)、组织病理变化及移植细胞的分化状况.结果 ①处理组比对照组的中位生存时间明显延长(P<0.01).②肝功能变化:术后两组AST、ALT总体相比较,处理组AST、ALT水平降低,有显著性差异(P<0.01).⑨组织病理变化:术后两组均出现不同程度的免疫排斥反应,且排斥程度相似.④移植细胞分化情况:输注的骨髓间充质干细胞向有功能的肝样细胞分化.结论 输注自体骨髓间充质干细胞可以延长活体肝移植受体犬的存活时间;经门静脉输注的自体骨髓间充质干细胞可向肝样细胞分化.     

人大隐静脉内皮细胞种植人工血管的实验研究

目的　探讨人自体静脉内皮细胞移植到人工血管上的可行性。方法　将人大隐静脉内皮细胞在体外扩增培养１３ ．０８ ±１ ．２４ 天, 将扩增培养的内皮细胞衬里用于纤维蛋白胶预衬的膨体聚四氟乙烯（ｅｘｐａｎｄｅｄ ｐｏｌｙｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｅｔｈｙｌｅｎｅ ｐａｔｃｈ 〔ＧｏｒｅＴｅｘ〕Ｒ, ｅＰＴＦＥ） 人工血管继续培养９ 天。结果　所培养的细胞为二倍体细胞,纯度为９９ ％ 。原代及传代细胞培养上清液中６酮前列环素（６ｋｅｔｏＰＧＦ１α） 和Ｖｏｎ Ｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ 因子（ｖ ＷＦ） 含量差异无显著性意义（ Ｐ＞ ０ ．０５） 。细胞种植后第９ 天人工血管腔面见一层均匀的基质,其表面有一层连续的内皮细胞单层,内皮细胞排列紧密,呈梭形,形态饱满。结论　人自体大隐静脉内皮细胞可有效地移植到人工血管,为人自体细胞内皮化人工血管应用于临床奠定了理论基础。     

去细胞化肝脏生物支架材料的制备

目的探讨制备去细胞化肝脏生物支架(decellularize d liver biological scaffold,DLBS)的新方法,寻找适合肝脏组织工程的新型支架材料。方法 (1)采用化学去垢剂—酶联合去细胞化技术制备去细胞化全肝脏生物支架,并观察去细胞化效果;(2)DLBS与C3A及骨髓间充质干细胞体外共培养,观察DLBS细胞相容性。(3)通过四氮唑盐比色法(MTTAssay)观察DLBS对C3A的增殖作用。(4)将DLBS植入SD大鼠背部皮下,4周后处死大鼠,观察鉴定DLBS的组织相容性。结果通过HE染色、扫描电镜观察证实经过化学去垢剂—酶联合去细胞方法制备的去细胞化全肝生物支架不含细胞成分,只剩下胶原、弹性蛋白等支架成分;体外培养实验发现,L02及骨髓间充质细胞能够与DLBS粘连、生长。MTTAssay检测证实DLBS有促进C3A生长、增殖的作用。结论利用化学去垢剂—酶联合去细胞化技术制备的DLBS脱细胞彻底、细胞外基质保留较完整,并且有促进细胞粘附、增殖和分化的作用,是一种较为理想的生物支架材料。     

单孔腹腔镜胆囊切除术及其新进展

最大限度减少手术创伤并保持良好的美容效果是外科发展的方向.经自然孔道内镜手术(natural orifice trans-luminal endoscopic surgery,NOTES)的出现把微创手术的美容功效发挥到了极致,因术后无遗留瘢痕、疼痛轻等优点而受到关注,但设备限制和潜在的安全因素等问题使之应用有限.比较而言,单孔腹腔镜胆囊切除术是迄今最安全、最可行的微创胆囊切除方法.本文回顾腹腔镜胆囊切除术的历史,着重介绍经脐单孔腹腔镜胆囊切除术及其新进展.     

骨髓干细胞向肝样细胞分化的研究进展

骨髓干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)是一类具有自我复制功能和分化潜能的早期未分化细胞,属于成体干细胞中的一种,主要包括造血干细胞(hemopoietic stem cells,HSCs)和间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs).近年来,人们对BMSCs的多向分化潜能性有了越来越全面的认识.BMSCs可以跨越胚层横向分化为各种组织细胞(包括肝样细胞),并且具备取材方便、体外培养技术成熟以及自体移植潜能等优点,因此其有望成为生物人工肝支持系统或肝细胞移植的理想种子细胞.     

恒河猴血管内皮细胞原位获取的实验研究

应用原位获取法从５６条恒可猴中的５４条血管中获取了内皮细胞。、Ａ组用０．１％Ⅱ胶原酶消化２５ｍｉｎ，Ｂ组用０．１％Ⅱ型胶原酶消化１５ｍｉｎ。结果表明，Ａ组的内皮细胞获取率明显高于Ｂ组。Ａ组及Ｂ组中颈外静脉，上肢浅静脉、髂总动脉的内皮细胞获取率明显高于既往的机械获取法，灌注酶解消化法，外翻酶解消化法（Ｐ〈０．０１０，Ｂ组中下腔静脉及腹主 在消化过程中出现胶魇酶自血管壁渗出，使得内皮细胞获取率明显下降     

浅谈外科学课堂教学艺术

提高课堂教学质量,既要求教师具备扎实的专业知识、渊博的学识,还要求教师注意授课的艺术。成功的艺术表现,除有赖于教师的热忱度、事业心、责任感外,还反映了他对教学艺术的理解、研究、应用及经验。从组织艺术和表达艺术两个方面改进外科学课堂教学,并将这些教学艺术运用自如,得心应手,贯穿始终,外科学课堂教学质量一定能得到进一步提高。     

胰十二指肠同源框基因-1在骨髓来源nestin阳性细胞的转染及表达

目的 将真核表达载体pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源nestin阳性细胞,并对其转染条件进行优化以获得较高效率.方法 将已构建好的重组载体转染骨髓来源nestin阳性细胞,改变DNA的量、转染后培养基中的血清浓度,在荧光显微镜下观察荧光并计算转染效率;转染后48 h用RT-PCR检测目的 基因的表达情况.结果 质粒2～10 μg获得最佳的转染效率,提高转染后培养基的血清浓度可提高转染后细胞存活率及转染效率.RT-PCR检测转染后骨髓来源nestin阳性细胞有PDX-1表达.结论 通过优化转染条件提高了pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源nestin阳性细胞的效率,为其成为组织工程的种子细胞提供了实验依据.     

毒品注射引起股动脉假性动脉瘤的外科治疗

我科近年来共收治12例因注射毒品引起的股动脉假性动脉瘤患者,其中男性10例,女性2例,年龄21-35岁,左侧5例,右侧7例,瘤体直径3-10cm,表面皮肤破溃4例。除1例因严重败血症抢救无效死亡外,其余11例患者均成功地进行了假性动脉瘤切除术。术中发现除2例无法进行动脉重建而行股动脉结扎外,其余9例都切除破损的动脉瘤后行动脉重建术,股动脉缺损段2-5.5cm,5例行股动脉端端吻合术,1例行健侧大隐静脉间置移植术。2例股动脉结扎术患者术后1例出现肢体坏死而行膝上截肢术,另1例仅出现轻度下肢缺血改变。其余9例患者术后肢体血供良好。我们的经验是,动脉缺损段的长度可根据患者的具体情况适当延长,在充分游离上下端血管后,缺损段达4.5cm亦可以直接行端端吻合术。在条件许可的情况下,股动脉端端吻合可作为该病首选的治疗方法。     

患肢注射高浓度尿激酶治疗下肢深静脉血栓形成45例报告

探讨下肢深静脉血栓的溶栓治疗与疗效。方法 :经患肢注射尿激酶每日 75万单位溶栓治疗 4 5例下肢深静脉血栓形成。结果 :病程在 2周内溶栓治愈 72 % (18/2 5 ) ,有效率 10 0 % (2 5 /2 5 ) ,病程超过 2周溶栓治愈率 30 % (6 /2 0 ) ,有效率 85 % (17/2 0 ) ,治疗过程无出血倾向。结论 :溶栓时间越早效果越好 ,经患肢注射尿激酶的增加局部的药物浓度而且药物用量可增大