马钱子发酵品中生物碱化学成分研究

目的研究马钱子经朱红栓菌固体发酵产物(发酵品)的生物碱成分。方法采用溶剂提取、硅胶柱色谱等方法对马钱子发酵品的生物碱成分进行分离纯化,根据化合物的理化常数和波谱数据鉴定其结构。结果从马钱子发酵品中共分离得到10个生物碱成分,分别鉴定为士的宁(1)、马钱子碱(2)、伪士的宁(3)、16-甲氧基士的宁(4)、番木鳖次碱(5)、士的宁氮氧化物(6)、马钱子碱氮氧化物(7)、士的宁氯甲氯化物(8)、马钱子碱氯甲氯化物(9)和喜树次碱(10)。结论马钱子发酵品的大部分化学成分仍然是吲哚类生物碱,其中仅有10是单萜吡啶生物碱,为首次从该种植物中分离得到;化合物4是首次从该植物的种子中分离得到;化合物8和9可能为氯仿提取过程中产生的人工加合物。迄今未见朱红栓菌中含有上述生物碱的报道。与生品相比,马钱子发酵品中生物碱成分发生了一定的变化,其中化合物4、6、7和10可能为发酵品新增成分,这些生物碱成分的鉴定为马钱子发酵"去毒存效"原理提供了理论依据。     

知母中具抑瘤活性的芒果苷的微波辅助提取工艺

目的?优化知母中微波辅助提取芒果苷的工艺条件,研究其对人乳腺癌细胞株MDAMB231的增殖抑制作用。方法?采用单因素试验,考察乙醇浓度、提取时间及固液比对提取得率的影响。以四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）观察不同浓度芒果苷对MDAMB231细胞生长的影响。结果?微波辅助提取芒果苷的最佳工艺条件为乙醇浓度30%,提取时间60s,固液比1∶40（g/mL）,在此条件下,芒果苷的得率为1.82%。MTT法显示,不同浓度的芒果苷对MDAMB231细胞均有抑制作用,其中1、5、10μmol/L 浓度芒果苷对MDAMB231细胞抑制作用最为显著,其24h抑制率分别为 20.55%、22.26%和22.94%。结论?微波辅助提取省时,操作简单,收率高;芒果苷能明显抑制人乳腺癌细胞株MDAMB231的增殖。      

2种HPLC检测器测定莲子心中3种酚性生物碱含量的比较

目的?建立反相HPLC荧光检测（fluorescence detector,FD）法,测定中药莲子心中莲心碱（liensinine,Lien）、异莲心碱（isoliensinine,Iso）和甲基莲心碱（neferine,Nef）等3种酚性生物碱的含量,并与HPLC紫外检测器（ultravioletvisible detector,UVD）的测定结果进行比较。方法?采用Phecda C₁₈色谱柱（5μm,4.6mm ×250mm）,乙腈 0.015mol/L十二烷基磺酸钠冰醋酸（55∶45∶1）为流动相;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃。FD的激发波长为280nm,发射波长为319nm;UVD的检测波长为282nm。结果?用FD检测莲子心中3种酚性生物碱的回归方程和相关系数（r）分别为:A_Lien =134994C_Lien +970790,r_Lien = 0.9990;A_Iso =330030C_Iso +647307,r_Iso = 0.9993;A_Nef =165207C_Nef +807442,r_Nef =0.9995。三者均具有良好的加样回收率（>95%）,且所得莲子心中Lien、Iso和Nef的含量与UVD测得值基本一致。结论?HPLCFD法测定莲子心中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱含量方法可靠、结果准确,与HPLCUVD法一样适用于莲子心药材中酚性生物碱的定量控制。      

短刺小克银汉霉对马钱子生物碱盐转化工艺的研究

目的 为提高短刺小克银汉霉对马钱子中马钱子碱与士的宁的转化率,构建高效的短刺小克银汉霉微生物转化体系。方法 根据菌种的生长代谢规律,采用单因素实验法,以马钱子碱硫酸盐和士的宁硝酸盐作为底物,以对底物的转化率作为指标,对可能的影响因素进行了考察。结果 获得了优化的转化工艺,即接种量为4%、发酵时间为2.5 d、底物质量浓度为20 mg/L、转化时间为3 d、培养温度为28 ℃、培养基初始pH值为6.5、摇床转速为150 r/min。在此工艺条件下,2种底物的平均转化率分别达到了77.75%与77.10%。结论 短刺小克银汉霉对2种底物的平均转化率分别提高了约17%与22%,此微生物转化体系能够满足马钱子减毒存效研究的需要。     

超临界CO2萃取山茱萸成分研究

目的 :对山茱萸超临界CO2 流体萃取物进行研究。方法 :萃取条件为 :压力 15MPa,温度 4 0℃ ,时间2h ,液态CO2 流量 2 2 .0kg·h-1,,采用GC MS技术分析山茱萸CO2 超临界萃取物的化学组成。结果 :超临界CO2流体萃取法得率为 2 .4 2 %。鉴定了其中 31种成分 ,并用面积归一化法测定其相对含量。结论 :超临界CO2 流体萃取物主要成分有 1,2 苯二甲酸二 (1 丁基 2 异丁基 )酯 ,异丙基十四 [烷 ]酸酯等。     

^1H—NMR和^13C—NMR在山茱萸环烯醚萜类化合物结构鉴定中的应用

山茱萸，别名枣皮、萸肉等，原植物为山茱萸科未来木属落叶小乔木Cornus officinalis Sibe et Zucc，过去也有将其归为灯台树属植物Microcarpium officinalis(Sieb et Zucc)Nakai。除齐墩果酸、熊果酸等三萜化合物外。山茱萸中还含有多种环烯醚萜类化合物。迄今为止，从山茱萸中提取、分离和鉴定的环烯醚萜类化合物已有10个，分属3种类型。     

广防己中马兜铃酸Ⅰ的提取工艺优选及真菌发酵对其含量的影响

目的:优化广防己中马兜铃酸Ⅰ的提取工艺,并探讨真菌发酵降低毒性作用的可能性。方法:采用L9(34)正交设计,以提取时间、溶剂倍数、甲醇浓度、提取次数4个因素为考察指标,直接加热回流法提取,采用高效液相色谱法(HPLC)测定广防己及其两种药用真菌(F1菌和F2菌)发酵品溶液中马兜铃酸Ⅰ的含量,流动相为乙腈-1%冰醋酸水溶液(51:49),流速为1.0mL/min,检测波长315nm,柱温30℃。结果:最佳制备工艺为粉末40目,加10倍量60%甲醇直接加热回流提取一次1h;与广防己药材相比,两种发酵品GF1和GF2中马兜铃酸Ⅰ的含量均明显下降,下降率分别为68.67%和52.67%,且有新的色谱峰出现。结论:该工艺马兜铃酸Ⅰ提取率高,稳定性好,提示真菌发酵可能对广防己的减毒具有一定的意义。     

反相离子对HPLC同时测定制马钱子中4种生物碱的含量

目的建立同时测定制马钱子中4种生物碱士的宁、马钱子碱、士的宁氮氧化物、马钱子碱氮氧化物含量的反相离子对HPLC法。方法应用Lichrospher S C18色谱柱(4.6mm×300mm,5μm),以乙腈-水(38:62,每1000mL加入磷酸二氢钾3.4g和十二烷基硫酸钠1.7g)为流动相,流速:1.0mL.min-1,柱温:30℃,检测波长:260nm。结果4种生物碱士的宁、马钱子碱、士的宁氮氧化物和马钱子碱氮氧化物的线性范围分别为13.7～219.1,12.55～200.8,0.3743～5.988和0.6225～9.96mg.L-1(r>0.9999),平均回收率分别为98.0%,102.2%,103.3%和99.9%(RSD均小于2.5%)。结论该方法简便、准确,重复性好,适用于制马钱子中士的宁、马钱子碱、士的宁氮氧化物、马钱子碱氮氧化物的含量测定。     

RP－HPLC法测定紫金解毒饮中绿原酸的含量

建立了ＲＰ－ＨＰＬＣ测定紫金解毒饮中绿原酸含量的方法。固定相ＯＤＳ－Ｃ＿（１８）柱，２５０×４．６（ｉ．ｄ．）ｍｍ，流动相甲醇－１‰磷酸水溶液－四氢呋喃（２５：６０：１５），检测波长为３２８ｎｍ。绿原酸的平均回收率为９９．２７％。本法简便、快速、重现性好，可以作为控制紫金解毒饮质量的检测手段。     

胶束HPLC法测定玉清安液中小檗碱型生物碱的含量

建立了一种胶束－反相高效液相色谱法，用来测定玉清安液中小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的含量。固定相为ＹＷＧ－Ｃ１８柱，１０μｍ，４．６（ｉ．ｄ．）×２５０ｍｍ，流动相为０．１ｍｏｌ／Ｌ酒石酸－甲醇－十二烷基磺酸钠（３０：７０：１），检测波长为３４５ｎｍ；小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的加样回收率分别为９９．７７±２．２８％，１００．１１±２．４９％和１０２．６２±２．１０％。