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131.
抑癌基因APC启动子甲基化检测及其在肺癌诊断中的应用 总被引:5,自引:4,他引:5
目的 建立抑癌基因APC启动子部位甲基化的检测方法 ,并对肺癌临床样品进行初步检测研究。方法 :对肺癌组织提取的DNA及转甲基后的脐带血DNA进行化学修饰 ,以甲基化特异性引物进行基因扩增 (methylationspecificPCR ,MSP)和甲基化序列分析 (methylationsequencing ,MS)。结果 :经转甲基的人脐带血DNA样品MSP检测为阳性 ,其序列与预期相符 ,未经转甲基样品为阴性。 17例肺癌患者的肿瘤及其正常肺组织APC甲基化检测阳性率分别为 4 7% (8/ 17)和 18% (3/ 17) ,1例肺部良性肿瘤及其正常肺组织的检测结果均为阴性 ;对MSP检测为阴性的 9例肺癌患者肿瘤及其正常肺组织进行MS检测分析 ,有 4例APC启动子部位存在CpG甲基化。结论 :利用MSP和MS两种甲基化检测分析手段 ,对 17例临床确诊肺癌组织的检测总阳性率可达 71% (12 / 17)。MSP操作简便 ,价格低廉 ,可适合于大规模肿瘤患者样本的筛查 ;而对于MSP检测为阴性的临床样品 ,可以利用MS进行进一步的确认 ,为临床肺癌诊断提供更准确的信息。 相似文献
132.
目的 探讨ELISA法检测β淀粉样蛋白(Aβ)1-42自身抗体在诊断阿尔茨海默病(AD)中的临床应用价值.方法 用Aβ1-42蛋白片段包被PVC板,使AD患者血清与小鼠抗Aβ1-42IgG形成竞争,以辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG作为二抗体,通过竞争ELISA法测定和比较健康人、高血压性脑栓塞患者及不同年龄的AD患者血清Aβ1-42抗体水平.结果 ELISA检测Aβ1-42自身抗体法的灵敏度约为1 ng/ml,回收率介于96.5%~104.7%之间;对Aβ1-42自身抗体被吸附去除后的人血清以及马血清的Aβ1-42抗体水平<1 ng/ml.37例AD患者血清Aβ1-42自身抗体水平为(5.1±1.9)ng/ml,明显低于同龄健康人的(12.6±3.3)ng/ml和高血压性脑栓塞患者的(12.5±3.3)ng/ml,差异均有统计学意义(双样本成组等方差t值分别为:6.237、7.973、6.224,P均<0.01).结论 AD患者可能清除Aβ能力不足,所以血清Aβ1-42自身抗体水平明显偏低. 相似文献
133.
目的探讨不同分子分型乳腺癌患者血清肿瘤标志物CEA、CA125和CA15-3的表达差异,以及其与复发转移的相关性。方法回顾性分析212例乳腺癌患者的病历及随访资料,并根据激素受体表达情况分为Luminal A型、Luminal B型、Her-2过表达型和Basal-like型4个分子亚型。比较不同分子分型乳腺癌患者术前血清肿瘤标志物CEA、CA125和CA15-3的表达水平及其临床特征,并分析影响乳腺癌患者复发转移的因素。结果不同分子分型的乳腺癌患者各肿瘤标志物的表达水平存在差异,其中,Her-2过表达型患者CA15-3的表达水平较其他3组明显升高(χ~2=7.98,P=0.04)。此外,不同分子分型乳腺癌患者肿瘤细胞的分化程度不同,Her-2过表达型患者低分化的比例明显高于其他3组(χ~2=12.42,P=0.006)。4个亚组间的复发转移率也存在明显差异,Her-2过表达型患者的复发转移率最高(F=8.69,P=0.034)。多因素Cox回归分析显示,肿瘤直径、组织分化程度和有无脉管瘤栓是乳腺癌患者复发转移的独立危险因素(P均0.05)。结论 Her-2过表达型乳腺癌患者CA15-3水平高,预后差,提示临床应该结合分子分型、肿瘤标志物以及相关危险因素进行个体化治疗。 相似文献
134.
维拉帕米影响丝裂霉素C抗人肺腺癌作用的体外研究潘世扬,毕志刚,殷凯生,丁小健,陈德才南京医学院第一附属医院临床实验研究室(南京·210029)有人试图某些本身并无抗癌作用的药物采增强抗癌药的杀瘤细胞效果。Tsuruo指出钙离子拮抗剂及钙通道抑制剂能够... 相似文献
135.
目的监测并分析南京地区2006-2009年中段尿培养病原菌分布和耐药性变迁,为临床合理选用抗菌药物提供最新依据。方法采用VITEK系统或API系统鉴定细菌和真菌,细菌药物敏感性测定采用纸片扩散法(K-B法),真菌药物敏感性测定采用Rosco纸片法,应用WHONET5.3软件分析中段尿培养标本所分离的病原菌的分布及药敏情况。结果 2006-2009年的尿路感染仍然以细菌感染为主,大肠埃希菌位居首位占42.3%~46.1%,有下降趋势;肠球菌属和真菌感染的比例有所升高,2009年分别升高至14.6%和12.7%;大肠埃希菌产ESBLs酶的检出率明显升高,从2006年的12.5%升至2009年的34.1%;大肠埃希菌对碳青霉烯类药物的敏感性依然较高,对头孢菌素类的耐药率明显升高;肠球菌属在2009年对万古霉素和替考拉宁的耐药率分别为5.3%和3.0%;葡萄球菌属对万古霉素和替考拉宁仍高度敏感,未发现耐药菌株。结论定期监测和分析当地患者尿路感染病原菌种类及其耐药性变迁,对临床合理使用抗菌药物具有重要指导意义。 相似文献
136.
目的:探讨肿瘤转移与血浆DNA水平之间的关系,评价早期诊断肿瘤转移的方法。方法:将人肺腺癌SPC-A1细胞接种到BALB/c小鼠腹腔,每周定期检测血浆DNA水平,7周后处死小鼠,观察肿瘤形成及转移情况。结果:小鼠血浆DNA水平呈升高趋势的占75.6%(34/45只);其中接种后第3周起血浆DNA水平均比接种后第1周显著升高(P﹤0.05)。血浆DNA水平升高及持续升高组小鼠中有肺转移瘤形成的占73.5%(25/34只)。无升高组小鼠中有肺转移瘤形成的占27.3%(3/11只)。血浆DNA水平升高组及持续升高组均显著高于无升高组(P﹤0.05)。血浆DNA水平与肿瘤负荷正相关(R2=0.8703)。结论:形成肺转移瘤的BALB/c小鼠血浆DNA水平在早期即显著升高,血浆DNA水平可用于肿瘤转移的早期监测。 相似文献
137.
目的观察病毒白细胞介素-6(viral interleukin-6,vIL-6)对抑癌基因p16启动子区甲基化及蛋白表达的影响。方法以vIL-6真核表达质粒转染293T细胞(转染组)为实验,空载体转染的293T细胞(空载体组)和未转染的293T细胞(未转染组)为对照,3组均采用Western blot法检测DNA甲基转移酶1的表达情况,甲基化特异性PCR法检测p16启动子区甲基化状态,荧光定量RT—PCR和Western blot法检测p16基因的表达。结果转染组DNA甲基转移酶1蛋白表达较未转染组和空载体组增加;转染组p16基因启动子区出现甲基化改变;转染组p16 mRNA表达量明显低于未转染组和空载体组,差异有统计学意义(P〈O.05);转染组P16蛋白表达较未转染组和空载体组降低。结论vIL-6可上调DNA甲基转移酶1表达,导致抑癌基因p16启动子区甲基化,抑制p16基因表达;vIL-6所致的DNA甲基化改变,可能是其致瘤机制之一。 相似文献
138.
目的:对Roche Cobas e601和Abott Architect i2000 分析系统检测主要乙型肝炎血清标志物HBsAg?抗-HBs和HBeAg的结果符合性和相关性进行评价?方法:分别采用两种分析系统对119份?140份?197份标本的HBsAg?抗-HBs和HBeAg进行检测?结果:两种分析系统对HBsAg?抗-HBs?HBeAg检测的定性结果符合率分别为99.1%?95.7%和90.9%,定量数值的相关系数分别为0.566?0.863?0.964,其中抗-HBs浓度存在显著差异(P < 0.05),Abott Architect i2000显著高于Roche Cobas e 601分析系统?结论:两种分析系统在乙型肝炎标志物的定性结果判断中具有较好的符合率,但抗-HBs浓度之间存在差异? 相似文献
139.
摘要:目的:制备抗人非小细胞肺癌(NSCLC)的单克隆抗体(McAb),并对其生物学特性及特异性进行鉴定。 方法:以人肺腺癌细胞株SPC-A1为抗原,免疫BALB/c小鼠,常规细胞融合,间接细胞ELISA法筛选阳性细胞克隆;多种细胞间接ELISA及间接免疫荧光法鉴定其特异性;western blot分析其特异性结合抗原的相对分子量;免疫组化染色分析单抗的组织特异性。 结果:得到1株高效价的、稳定分泌IgG1抗人NSCLC单抗的细胞株(NJ488-1),纯化后效价为2×106;间接细胞ELISA 及间接免疫荧光法证实NJ488-1能特异地识别肺癌细胞系,其识别抗原定位于SPC-A1细胞胞浆区;western blot显示NJ488-1特异性结合的抗原相对分子量(Mr)为70 000左右;免疫组化结果表明NJ488-1与NSCLC组织有强阳性反应。 结论:成功地制备并鉴定了抗人NSCLC单抗NJ488-1,为肺癌的进一步研究及NJ488-1的临床应用奠定了基础。 相似文献
140.
目的:观察病毒白细胞介素6(viral interleukin-6,vIL-6)对甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)表达的影响?方法:vIL-6真核表达质粒转染293T细胞,荧光定量RT-PCR和Western blot法检测DNMT1表达的变化,比色法检测DNMT1的活性?结果:荧光定量RT-PCR和Western blot均表明vIL-6可显著促进DNMT1的表达,且vIL-6能上调DNMT1的活性?结论:vIL-6能诱导DNMT1的表达,可能是卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)致DNA甲基化异常,促进肿瘤发生发展的分子机制之一? 相似文献