用于中枢神经系统Waller变性研究的新型大鼠视神经夹伤模型

本实验旨在建立可用于中枢神经系统Waller变性研究的大鼠视神经(ON)损伤模型。成年SD大鼠12只,用夹持力为148g、镊端宽1mm的小号动脉阻血镊于球后2mm处夹持左侧视神经,致伤时间10s。术后随机分为两组(每组6只):一组动物术后立即于双侧上丘表面放置逆行荧光染料荧光金(FG),72h后处死。取视网膜铺片,ON冰冻连续切片。另一组动物术后72h常规灌注固定,取ON冰冻连续切片,分别行β-tubulin及NF-160免疫组化染色和HE染色。结果显示:左侧ON夹伤后3d,同侧视网膜内未见FG逆行标记的视网膜神经节细胞,ON夹伤部位形成一条宽达1mm的损伤带,ON基质连续,FG标记的神经纤维被阻断于损伤远侧,损伤远侧的β-tublin阳性纤维多已崩溃,NF-160阳性纤维数量较多,部分纤维末梢形成膨大的回缩球。上述结果表明ON夹伤后神经元轴突完全离断,中枢神经基质的连续性得以保持,损伤远侧段轴突发生典型的Waller变性,从而为中枢神经Waller变性及其药物治疗研究的筛选和评估提供了简单实用的实验模型。     

嗅鞘细胞在含Schwann细胞冻融周围神经移植物内的存活及对成年大鼠视神经再生的影响

为了研究嗅鞘细胞(OECs)在含Schwann细胞(SCs)及预先溃变的冻融周围神经内的存活及对成年大鼠视神经再生的影响,我们将30只动物左视神经眶内断端分别移植冻融周围神经、预溃冻融周围神经、含OECs预溃冻融周围神经、含SCs冻融周围神经或含OECs和SCs冻融周围神经,4周后观察OECs在神经移植物中的存活和分布,计数各组以5%荧光金逆行标记的再生RGCs数量。结果显示,OECs仅存活于含SCs冻融周围神经移植物内,含OECs-SCs冻融周围神经组及含SCs冻融周围神经组视网膜内可见荧光金标记的RGCs,前组再生RGCs均数(346±42)较后组(205±59)显著增高(P<0.05)。这些结果提示预溃冻融周围神经不适宜OECs生存。OECs在含有SCs的冻融周围神经移植物中能够存活,并发挥较单用SCs更强的促进视神经再生的作用。     

脊髓损伤与修复

急性脊髓损伤是后果极为严重的创伤,在多数发达国家的年发生率为15～40例/百万人口,美国则高达30～70例/百万人.我国约有40余万脊髓损伤导致的截瘫患者,每年增加约1万例.脊髓损伤多发生于青壮年,常需数十年的治疗与康复,对个人及其家庭和社会都是巨大的负担.脊髓损伤的修复涉及大量医学、生物学基础理论和应用基础研究,正如美国国立卫生研究院1996年度报告所说,是医学领域最激动人心的前沿之一.     

预先溃变周围神经移植对成年金黄地鼠视网膜节细胞再生的影响

0　引言　本研究探讨了移植预先溃变周围神经对促进视网膜节细胞 (下称节细胞 )的轴突再生 ,是否比正常周围神经更有效这一仍有争议的问题 [1 ,2 ] .1　材料和方法1.1　材料　成年雌性金黄地鼠 2 4只 ,体质量 90～ 10 0 g.随机分为预先夹断、预先切断线扎、预先切断非线扎和对照 4组 ,每组 n=6 .1.2　方法　移植前 8d将左侧坐骨神经主干以显微手术镊夹断 (夹断组 )或切断 ,远侧段断端以细丝线结扎 (线扎组 )或不扎 (非线扎组 ) .距眼球后极 0 .5 mm切断左侧视神经 ,将已夹断或切断的神经远侧段或正常坐骨神经 (对照组 ) ,移植于视神经眶侧断…     

轴突损伤距离对成年金黄地鼠视网膜节细胞轴突在正常或预先溃变周围神经移植物中再生的影响

目的　系统研究轴突损伤的距离与轴突再生之间的关系 ,以及预先溃变周围神经移植物对视网膜节细胞 (简称节细胞 )轴突在不同距离损伤后再生的影响。　方法　在距成年金黄地鼠眼球后极 0 .5、1、1.5、2、3或7m m处切断左侧视神经 ,视神经眶侧断端同正常 (正常组 )或预先溃变 (溃变组 )的周围神经移植物相吻合。　结果　移植术后 2 8d,两组荧光金逆行标记的发出再生轴突的节细胞数量均随轴突损伤距离的增加而下降 ,并以 0 .5～3m m距离点之间下降最为明显。比较两组对应距离点 ,溃变组标记节细胞数量在 2、3mm距离点较正常组显著增多。　结论　成年金黄地鼠节细胞轴突损伤的距离 ,决定了发出再生轴突的节细胞数量。预先溃变周围神经移植物对节细胞轴突再生具有促进作用 ,并以轴突损伤距离为条件。     

多节段背根节慢性压迫大鼠机械触刺激诱发痛镜像痛的外周机制

目的:研究多节段背根节慢性压迫(chronic compression of multiple dorsal root ganglia,CCD)大鼠机械触刺激诱发痛镜像痛的外周机制。方法:制作单侧L3-L5 CCD模型大鼠,并应用von Frey filaments检测双侧机械触刺激诱发痛行为,利用免疫组织化学方法检测该模型大鼠同侧及对侧DRG大中型和小型神经元中与痛觉信息传递相关的神经肽-降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的表达情况。结果:CCD大鼠表现出明显双侧机械触刺激诱发痛行为;免疫组织化学结果显示,CCD模型大鼠同侧及对侧DRG大和中等大小神经元内,CGRP的表达与正常组大鼠DRG神经元比较有明显升高(P<0.05),而同侧及对侧DRG小神经元,CGRP的表达与正常组大鼠DRG神经元比较无明显变化(P>0.05)。结论:CCD模型大鼠双侧DRG内传递痛觉信息的神经肽CGRP表达升高,提示外周双侧DRG神经元内CGRP的可塑性变化可能参与多节段CCD模型大鼠机械触刺激诱发痛镜像痛的发生。     

发挥多媒体教学优势 提高神经生物学教学效果

神经科学(或脑科学)于20世纪70年代迅速崛起,作为神经科学主体的神经生物学已成为生命科学中发展最迅速的前沿科学之一。神经生物学是研究人和动物的神经系统的科学,揭示人类的感觉、运动、思维、情感、行为、学习记忆等各种神经活动的基本规律,在分子、细胞和整体水平阐明其机制,就是神经生物学的基本内容。由于本学科内容丰富,信息量大,专业性强,有别于生理、病理、生化等传统课程内容,如何在有限的学时内高质量地完成教学任务,成为每个教师面临的主要问题。经过总结历年研究生教学的经验,参考其他教研室的教学实践,笔者认为,在传统的课堂授课基础上,充分发挥多媒体教学的优势,有助于提高神经生物学教学效果。具体主要从三个方面开展:①课前精心准备多媒体课件;②重视课堂授课效果;③拓宽学习途径,开展网络教学。     

不同给药途径的聚乙二醇对大鼠视神经切断后视网膜神经节细胞存活的影响

目的:比较不同给药途径的聚乙二醇(PEG)对成年大鼠视神经切断后视网膜神经节细胞(节细胞)存活的影响。方法:72只成年SD大鼠左眼球后1.5 mm处横断视神经,眶侧断端留置浸有荧光金的明胶海绵以逆行标记存活的节细胞。术后立即尾静脉注射1 ml 30%PEG(尾静脉注射PEG组)或等体积生理盐水(尾静脉注射盐水对照组),或在视神经眶侧断端留置浸有50%PEG(局部PEG组)或生理盐水(局部盐水对照组)的明胶海绵。四组动物(n=18)分别存活2、7 d或14 d(每时间点,n=6)后处死,取术侧视网膜,平铺计数存活节细胞并计算出节细胞密度。结果:术后7 d尾静脉注射PEG组存活节细胞平均密度(1121.43 mm2±42.69/mm2)显著高于尾静脉注射盐水对照组(846.67/mm2±58.19/mm2,P<0.05),而2 d和14 d时间点两组节细胞密度间无显著性差异(P>0.05);局部PEG组节细胞密度在各时间点与局部盐水对照组相比均无显著性差异(P>0.05);在7 d点,尾静脉注射PEG组节细胞密度显著高于局部PEG组(774.43/mm2±50.49/mm2,P<0.05)。结论:PEG能在视神经切断后一定时间内延缓节细胞死亡,且这种神经保护作用有赖于PEG的给药途径。     

嗅神经鞘细胞对胚胎大鼠脊髓后解神经元突起生长的促进作用

实验证实,嗅神经鞘细胞(olfactory ensheathing cells, OECs)可促进多种神经元轴突的生长,如背根节神经元、视网膜节细胞以及向脊髓投射的皮层神经元、前庭神经元、中缝核神经元,等等.近年OECs移植用于脊髓损伤后再生研究,已成功促进下行传导路纤维的再生和运动功能的恢复[1].但目前就OECs对脊髓后角神经元的作用目前还缺乏研究.本实验的目的就是观察原代培样的OECs对胚胎脊髓后角神经元的突起生长有无促进作用,从而为进一步的体内移植实验提供依据.     

人胚胎雪旺细胞脊髓内移植治疗晚期脊髓损伤

目的 采用人胚雪旺细胞移植治疗晚期脊髓损伤,并探讨其疗效及安全性。方法 显微镜下切除脊髓损伤节段增厚的瘢痕组织,松解粘连,切开囊腔或空洞。取人胚胎背根神经节,培养成雪旺细胞并贴附于可吸收薇乔3-0紫色线及薇乔网的载体上,然后将其移植到脊髓损伤部位。本组共治疗53例,其中男42例,女11例,年龄2～58岁,伤后时间为4个月～19年。结果 雪旺细胞移植后2～8w时随访,按美国脊髓损伤学会（ASIA）脊髓损伤神经功能分类国际标准评价,53例患者的脊髓功能均有部分恢复,其中运动功能由术前（41.49±15.83）分提高到术后（44.62±15.39）分,轻触觉由（57.89±22.87）分提高到（63.94±23.67）分,针刺觉由（55.96±20.99）分提高到（59.68±20.57）分。患者术后无脊髓感染、功能损伤加重及死亡等并发症。术后复查MRI示脊髓无瘤样增生及空洞扩大。结论 人胚雪旺细胞移植治疗晚期脊髓损伤安全可行,能促进晚期脊髓损伤患者脊髓神经功能的部分恢复。