ATP在大鼠胰岛分离中的保护作用研究

目的探讨三磷酸腺苷（ATP）在大鼠胰岛分离过程中抑制胰酶对胰岛细胞的消化作用。方法将20只SD大鼠平均分为两组,处理组在胰岛分离全过程中加用ATP进行干预,对照组则不加ATP处理,采用Ficoll非连续密度离心纯化后对两组胰岛细胞的凋亡、胰岛产量及活力方面进行比较性研究。结果加用ATP的处理组的胰岛细胞凋亡率显著低于对照组（P〈0.01）,处理组胰岛产量和胰岛素释放水平均显著高于对照组（P〈0.01）。结论胰岛分离过程中加用一定浓度ATP对胰岛具有抑制凋亡和保护胰岛活力的作用。     

膀胱癌组织中E-cd和cyclin D1的表达意义

目的 研究上皮钙粘附素(E-cd)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在膀胱移行细胞癌的表达水平及其相关,井探讨其与癌的发生,发展及生物学行为的关系。方法 应用免疫细化LSAB法检测69例膀胱癌和8例正常膀胱组织中E-cd和cyclin D1的表达。结果 膀胱癌组织中E-cd阳性表达率为50.7％(35/69)和cyclin D1阳性表达率为57.9％(40/69),与正常膀胱相比均有显著意义(P<0.05)。Ecd和cyclin D1阳性表达的病理分级分别为1级72.2％、33.3％,Ⅱ级65.2％、56.5％,Ⅲ级25％、71.4％,Ⅰ级与Ⅲ级均有显著意义(P<0.05)。复发组的阳性表达分别为29.7％、62.1％。生存时间大于5年的阳性表达分别为83.3％、39.2％。结论 E-cd的低表达或缺失与膀胱癌的侵袭、复发和预后密切相关,cyclin D1在膀胱癌形成中起重要的作用,二者均可以作为判断膀胱癌的病理分级、术后复发和临床预后的指标。     

FAK和Src在甲状腺乳头状癌中的表达及其在肿瘤侵袭转移中的临床意义及机制研究

目的：探讨黏着斑激酶（FAK）和Src在甲状腺乳头状癌侵袭转移中的临床意义。方法：利用免疫组化检测FAK和Src在100例甲状腺乳头状癌组织中的表达,并分析其与患者临床病理参数的关系。利用Western blot以及qRT－PCR检测FAK和Src在甲状腺癌细胞株中与上皮间质转化（EMT）的相关性。结果：FAK与甲状腺乳头状癌的年龄（P＝0．000）、T分期（P＝0．176）、N分期（P＝0．000）、M分期（P＝0．000）、临床分期（P＝0．038）、局部复发（P＝0．000）、淋巴结侵袭（P＝0．014）以及与患者较低生存期（P＜0．0001）密切相关;Src与甲状腺乳头状癌的N分期（P＝0．000）、M分期（P＝0．002）、淋巴结侵袭（P＝0．000）、包膜侵袭（P＝0．029）以及患者的较低生存期（P＜0．0001）密切相关。并且高表达FAK与Src的细胞其N－cadherin、Vimentin的表达增高,而E－cadherin的表达降低。结论：FAK以及Src与甲状腺乳头状癌的侵袭转移密切相关,并可能通过EMT的方式促进其侵袭和转移。     

比伐卢定对大鼠胰岛细胞凋亡的影响

目的探讨比伐卢定（直接凝血酶抑制剂）在大鼠胰岛分离过程中保护胰岛细胞的作用。方法将SD大鼠分为比伐卢定处理组和对照组,处理组在胰岛分离全过程中加用比伐卢定进行干预,对照组则不加比伐卢定处理,采用Ficoll非连续密度离心纯化后对两组胰岛细胞的凋亡（采用原位末端核苷酸标记法及流式细胞仪检测）、胰岛产量及活力方面进行比较性研究。结果比伐卢定5000U处理组的胰岛细胞凋亡计数（5±4）个/HPF、凋亡率（16.5±3.6）%、Fas-l基因表达水平（4.6±1.9）%均显著低于对照组（P〈0.01）,胰岛产量（315.3±6.1）IEQ、胰岛素释放水平（179.11±2.18）mIU/L和Bcl-2基因表达水平（10.5±1.2）%均显著高于对照组（P〈0.01）,差异有统计学意义。结论胰岛分离过程中加用比伐卢定对胰岛具有抑制凋亡、提高胰岛产量和保护胰岛活力的作用。     

PRL-3基因对结直肠癌细胞形态及粘附、运动能力的影响

目的探讨PRL-3的过表达或敲低对结直肠癌细胞相应的生物学特性的影响。方法常规进行细胞培养,应用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞结构;应用运动小室实验检测PRL-3对结直肠癌迁移能力的影响;应用细胞粘附实验测定细胞在I型胶原上的粘附性。结果粘附实验结果表明,与SW480/EGFP/mock和SW480/EGFP细胞相比,SW480-EGFP-PRL-3细胞的粘附能力增强,而SW480-PRL-3-KD1细胞的粘附能力减弱,差异有统计学意义(F=22.013,P<0.01)。运动小室实验证明,SW480/EGFP、SW480-EGFP-PRL-3、SW480/EGFP/mock及SW480-PRL-3-KD1细胞的运动能力差异有统计学意义(F=21.368,P<0.01),说明PRL-3与结直肠癌细胞的运动迁移能力有关。结论 PRL-3基因是结直肠癌细胞粘附、迁移的促进基因。     

RT-PCR检测癫痫手术标本中柯萨奇病毒B感染

目的 观察癫痫病理标本的病理组织学表现,并检测临床诊断癫痫病手术标本中是否存在柯萨奇病毒B感染.方法 显微镜下观察30例癫痫病理切片组织学改变,利用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测柯萨奇病毒B(Coxsackierirus B,CVB)感染情况,并选用20例无癫痫病史的尸体解剖组织作为对照组.结果 30例癫痫标本有共同的病理组织改变,其中14例(46%)CVB阳性,20例正常脑组织均阴性.结论 提示临床诊断为原发性和难治性癫痫的病人其实有相当部分存在嗜中枢神经病毒如CVB的感染,癫痫的发生可能同病毒感染有一定关系,但有时因感染症状为一过性或处于亚临床状态或以癫痫为首要表现,而常被临床医生忽视.所以,当利用各种抗癫痫药物甚至手术治疗都无明显的效果时,临床应该考虑到病毒感染可能是尚未根除的原因之一,并且积极进行病毒学相关检查.     

粘附分子CD29和VEGF在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨胃癌组织中粘附分子CD29的表达水平及其与血管内皮生长因子(vascular endothelial grouth factor,VEGF)的关系.方法:选择胃癌患者84例和浅表性胃炎患者48例对CD29和VEGF抗体SP法免疫组化染色.结果:84例胃癌标本中CD29有68例阳性,阳性率为80.9%,48例浅表性胃炎组织中有12例阳性表达,阳性率为25%(P<0.05).胃癌中70例(83.3%)VEGF阳性表达.其中有63例VEGF与CD29共同表达.具显著正相关(P<0.05).CD29的表达与患者的年龄、性别和肿瘤的大小、组织学类型及浸润深度无关.但与肿瘤的淋巴结转移具有显著的相关性(P<0.05).结论:CD29可通过介导VEGF的表达促进肿瘤新生血管的形成,从而进一步促进肿瘤的生长和转移.     

PRL-3基因对结直肠癌细胞增殖能力的影响

目的:探讨PRL-3的过表达或敲低对结直肠癌细胞增殖能力的影响.方法:利用MTT法、平板克隆形成实验检测PRL-3对细胞体外增殖的影响;应用流式细胞术检测PRL-3对细胞周期的影响.结果:应用MTT法,检测PRL-3对SW480/EGFP、SW480-EGFP-PRL-3、SW480/EGFP/Mock及SW480-PRL-3-KD1细胞体外增殖能力的影响,经析因方差分析,4组差异具有显著性(F=23.463,P=0.000);不同时间点对细胞体外增殖的影响差异具有显著性(F=71.515,P=0.000);各组细胞与各时间组两因素交互效应显著(F=2.128,P=0.008);除第1天外,其他各时间点细胞组间的细胞增殖差异具有显著性.经LSD法多重比较,结果表明,与SW480/EGFP/Mock和SW480/EGFP细胞相比,SW480-EGFP-PRL-3细胞的增殖速度加快,而SW480-PRL-3-KD1细胞的增殖速度减慢.平板克隆形成实验显示SW480-EGFP-PRL-3细胞克隆形成能力明显增强,而SW480-PRL-3-KD1细胞克隆形成能力显著下降,差异具有显著的统计学意义(F=44.411,P=0.000).结论:PRL-3基因可促进结直肠癌细胞的增殖.