新形势下医学检验技术专业建设实践

<正>高等院校医学检验技术专业教育是培养高级医学检验人才的主要途径,目前正经历重大的改革,学制由5年改4年,学位由医学士改理学士,意味以往的培养方案、教学方法、课程体系需改革[1];培养高素质、能力强、具有创新思维和社会适应性强的检验医学高级人才是教学改革目标,是学科发展要求。我校为适应专业改革需要,对医学检验技术专业建设进行了有益尝试,取得一定的成效。     

基于戊型肝炎病毒中和表位HEV-p179的靶细胞的构建及应用

目的以HEV-p179编码基因为目的片段,构建并筛选戊型肝炎病毒(HEV)的靶细胞,评估HEV疫苗的细胞免疫活性。方法将p179编码基因克隆入pIRES质粒中,构建pIRES-179质粒;将pIRES-179重组质粒转染Sp2/0细胞,用G418压力筛选靶细胞;用间接免疫荧光法和western blot检测靶细胞中目的蛋白p179的表达;用HEV蛋白和基因疫苗免疫BALB/c小鼠,第6周分离小鼠脾淋巴细胞作为效应细胞,用MTT法对细胞进行细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤实验。结果成功构建重组质粒pIRES-179,转染Sp2/0细胞后,经G418的压力筛选,在800μg/mL筛选到单克隆细胞;间接免疫荧光法和western blot分析表明靶细胞能够有效地表达靶抗原p179;CTL杀伤实验结果表明,pVax-p179-C3d3重组质粒免疫组的杀伤活性为(58.26±4.36)%,p179蛋白免疫组为(37.24±3.71)%,对照组为(6.45±1.74)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论经G418压力筛选pIRES-179转染的Sp2/0细胞可作为HEV的靶细胞,用以评估HEV疫苗的细胞免疫活性。     

临床医学专业实验诊断学实验课教学改革和探索

实验诊断学是一门实验性很强的医学课程,高质量的实验课教学不仅能够调动临床医学专业学生学习热情,提高实验操作技能,还能加深学生对理论知识的理解和掌握,锻炼学生临床思维能力和解决问题的综合能力。     

皖江地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因型及耐药性分析凌华志简

目的 研究安徽省芜湖及宿州两地临床产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率、基因型分布及对抗菌药物的耐药性.方法 收集两地大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs确证试验;采用PCR法对产ESBLs株进行β内酰胺酶基因的扩增;微量稀释法测定产ESBLs株对13种抗菌药物的耐药率.结果 两地大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率的差异均无统计学意义（P＞0.05）,但基因型存在一定差异.bla（TEM）＋bla（CTX-M-13）是最常见的基因检出模式.两地产ESBLs株对抗菌药物表现出不同的耐药率,但对亚胺培南和美洛培南均100％敏感.结论 芜湖和宿州地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌存在较严重的抗菌药物选择性压力;酶抑制剂复合制剂及碳青酶烯类是治疗产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染的理想药物.     

α_1-微球蛋白检测对糖尿病肾病的意义

目的　探讨α1 微球蛋白对糖尿病肾小管损害的早期诊断价值。对比分析血、尿中α1 微球蛋白 (α1 MG)在1型和 2型糖尿病患者已发生糖尿病肾病 (DN)与未发生DN之间的关系。方法　采用ELISA技术、免疫比浊技术及化学比色法 ,将 1型和 2型糖尿病者血、尿中α1 微球蛋白以及糖水平 (糖化血浆白蛋白 )与糖尿病肾病相关性进行对比。结果　 1型和 2型糖尿病间无论是否发生DN ,血、尿中α1 MG均增高。尿α1 MG :发生DN组高于未发生DN组。 1型和 2型组未发生DN组间 ,发生DN组间比较 ,其α1 MG含量无显著性差异。血α1 MG :发生DN组与未发生DN组无显著性差异。DN发病与病程长短关系不确切 ,即病程越长发生率不一定越高 ;空腹血糖水平与DN发病有高度相关性。结论　尿α1 MG可作为肾小管功能的敏感检测物 ,早于微量白蛋白尿出现。血α1 MG含量与肾功能无关 ,不能作为肾功能检测指标。糖尿病患者控制血糖 ,可有效降低或控制DN发病。     

基于家系的Tim-1基因启动子多态性与儿童过敏性哮喘的关联研究

目的:以家系资料为基础,利用遗传不平衡原理探讨染色体5q31-33区Tim-1基因启动子3多态性-2562GA、-416CG和-232GA与湖北地区汉族儿童过敏性哮喘的关系。方法:应用限制性片段长度多态性技术分析了118个儿童过敏性哮喘核心家系Tim-1基因-2562GA、-416CG和-232GA多态性位点的基因型;采用基于家系的传递不平衡检验(TDT)分析基因分型数据;应用TRANSMIT软件构建单倍型并进行单体型关联分析。结果:①118个核心家庭TDT分析显示-2562GA、-232GA位点由杂合子父母传递给患病子代的等位基因频率没有偏离50%,差异无显著性(P0.05),-416CG位点由杂合子父母传递给患病子代的G等位位点的观察值明显高于期望值(P0.05)。②TRANSMIT单体型传递不平衡分析显示父母传递给患病子女GCA和GGA单体型的观察值与期望值差异有显著性(P0.05);Globalχ2检验结果显示Tim-1的单体型与儿童过敏性哮喘有关联(χ2=17.26,P0.01)。结论:Tim-1基因启动子的-416CG位点与中国湖北地区汉族儿童过敏性哮喘易感性相关,由其构建的单体型也与哮喘相关。Tim-1基因遗传多态性可能在哮喘的发病中起重要的作用。     

卵巢癌干细胞的分离、鉴定及初步生物学功能研究

目的从人卵巢上皮细胞癌建系的SKOV3细胞中分离出CD133CD117表型卵巢癌干细胞,探讨其相关生物学特性。方法利用免疫磁珠技术分选出CD133CD117癌细胞,继而进行平皿、软琼脂克隆形成试验,无血清培养试验和致瘤试验探讨其初步功能;采用反转录聚合酶链反应检测癌细胞Wnt-2基因表达水平。结果表型CD133CD117癌细胞在平皿、软琼脂和无血清培养基中克隆形成能力明显强于CD133~-CD117~-癌细胞;同时表现出较强致瘤性;Wnt-2基因在不同表型癌细胞中存在差异表达。结论卵巢癌细胞中存在干细胞样癌细胞,利用磁珠分选得到的CD133CD117癌细胞具有干细胞的相关特性,为卵巢癌干细胞生物学特性的研究及靶向治疗提供依据。     

可溶性ST2及其配体IL-33与疾病关系的研究进展

可溶性生长刺激表达基因2蛋白(soluble growth stimulation expressed gene 2,sST2)是白细胞介素受体(interleukin receptor,IL-1R)家族中的一员,作为一种心力衰竭的标志物而被广泛研究.目前已知其参与心肌的重塑和保护,以及糖尿病并发症的发生发展等;其配体...     

肿瘤特异性蛋白70用于乳腺肿瘤良恶性鉴别

目的：探讨肿瘤特异性蛋白70（tumor specific protein 70,SP70）在乳腺肿瘤组织及血液中的表达情况及其对乳腺肿瘤良恶性鉴别的意义。方法：乳腺肿瘤患者125例（乳腺癌65例、良性病变60例）,免疫组化法检测切片中SP70的表达。ELISA检测120例乳腺肿瘤患者（58例乳腺癌、62例乳腺良性疾病）和60例健康体检者血清中SP70蛋白的水平。结果：SP70在乳腺癌组织中的表达阳性率（55.38%）高于乳腺良性病变（15.00%）,差异有统计学意义（χ2=23.846,P<0.001）。乳腺癌患者血清中SP70的水平显著高于乳腺良性疾病患者和健康对照,差异有统计学意义（F=11.884,P<0.001）。SP70在血清中的敏感性高于CA153(53.45% vs. 44.82%),且血清中SP70和CA153的表达无显著相关性（r=0.132,P=0.324）,两者联合能够明显提高检测敏感性（84.38%）。结论：检测乳腺肿瘤组织和血液中SP70的表达对其良恶性的鉴别有重要临床价值。