人骨形成蛋白2真核表达载体的构建和体外表达

背景：骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2) 是已知的所有生长因子中对骨的形成作用最强的生长因子，被认为是最具有前途的骨诱导物质。 目的：构建人骨形成蛋白2真核表达载体并观察其体外表达情况。 设计、时间及地点：自身对照实验，于2005-07/2006-05在华中科技大学同济医学院分子生物中心实验室完成。 材料：pcDNA3.1(+)载体由华中科技大学同济医学院左石博士惠赠；成骨肉瘤组织由华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科提供。 方法：从人成骨肉瘤细胞中提取细胞总RNA，利用反转录-聚合酶链反应方法扩增获得人BMP-2基因cDNA，将基因片断重组到pGEM-T质粒中构建pGEM-T- hBMP-2重组质粒载体，转化到大肠杆菌DH5α后筛选阳性克隆，利用限制性酶切和DNA序列分析鉴定重组质粒。分别用RcoRI和NotI双酶切pGEM-T- hBMP-2质粒和pcDNA3.1真核表达载体，将克隆载体中人骨形成蛋白2基因重组到pcDNA3.1真核表达载体，提取质粒作酶切电泳、聚合酶链反应鉴定及DNA测序后，用脂质体体外转染小鼠骨髓基质细胞，反转录-聚合酶链反应检测BMP-2的表达。 主要观察指标：①人骨肉瘤细胞总RNA 反转录-聚合酶链反应结果。②重组质粒pGEM-T-hBMP-2 和pcDNA3.1-hBMP-2的构建和酶切鉴定。③BMP-2在小鼠骨髓基质细胞内的表达。 结果：人骨肉瘤细胞总RNA经反转录-聚合酶链反应扩增后，获得1.2 kb条带。经酶切电泳、聚合酶链反应鉴定及DNA测序证实实验成功克隆BMP-2基因，重组质粒pcDNA3.1- hBMP-2构建正确;该重组质粒能在体外培养的小鼠骨髓基质细胞中有效表达BMP-2。 结论：实验成功克隆人骨形成蛋白2基因并构建了此基因的真核表达载体。     

内侧髌骨股骨韧带重建手术技术

复发性髌骨脱位是临床常见疾病[1]。以往的治疗方法包括髌骨外侧支持带松解[2-5]、髌骨内侧支持带紧缩重叠缝合[3,6]、胫骨结节内移截骨[7]、股内侧肌止点移位术[8]等。近来,内侧髌股韧带(medial patellofemoral ligament,MPFL)重建对于治疗复发性髌骨脱位取得良好的临床效果[9     

生理水平的雄激素对亚急性衰老小鼠学习记忆能力的影响

目的探讨生理剂量的外源性丙酸睾酮对亚急性衰老小鼠学习记忆能力的影响。方法将C57BL/6J雄性小鼠38只随机分为对照组(10只)、去势组(10只)、D半乳糖组(9只)、丙酸睾酮组(9只),3个月后对各组小鼠进行水迷宫和避暗穿梭实验,检测脑、肝脏组织的丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)水平,并由Nissl染色观测海马神经元的变化情况。结果去势组小鼠各项行为学指标均劣于对照组,大脑和肝脏的丙二醛水平明显升高,SOD水平明显下降(P0.05),大脑海马CA1区结构松散,神经元数量明显减少(P0.01);与去势组比较,D半乳糖组的行为学指标进一步恶化,大脑丙二醛水平明显升高,SOD水平明显下降,大脑海马CA1区结构紊乱,神经元丢失严重(P0.05);而丙酸睾酮组的上述各项指标与对照组比较,差异无统计学意义。结论雄激素可以逆转亚急性衰老小鼠学习记忆能力的衰退。降低体内氧自由基水平,改善大脑海马CA1区形态,增加CA1区神经元数量,可能是其机制之一。     

生理剂量睾酮通过雄激素受体改善小鼠行为学能力的研究

目的 探讨生理剂量的雄激素对小鼠行为学的影响及其机制.方法 29只4 w龄的C57BL/6J雄鼠分为正常组、去势组、去势+丙酸睾酮(TP)组,16只4 w龄的不表达有活性雄激素受体(AR)的睾丸女性化(tfm)雄鼠分为tfm组、tfm+TP组,造模3个月后对各组小鼠进行自主活动能力、避暗穿梭实验和水迷宫实验测定,最后由Nissl染色观测海马区的细胞形态学变化.结果 各项行为学检测及大脑海马区Nissl染色结果均一致,正常组、去势+TP组小鼠的各项指标结果皆显著优于去势组、tfm组和tfm+TP组小鼠,而去势组、tfm组和tfm+TP组之间未见统计学差异.结论 雄激素通过AR途径维持大脑海马区的正常形态来改善小鼠的自主活动能力、学习记忆能力.     

多排螺旋CT容积重建技术在Q角测量中的应用价值分析

目的 依据Q角定义,结合现代影像学多排螺旋CT容积重建技术(VR)和影像处理工作站的技术特点,完整再现股四头肌与髌骨解剖关系,并且在重建的三维影像上完成Q角的测量,获得了精确的测量数据,指导临床治疗.方法 2006年-2008年,拟行手术治疗的髌骨不稳定的病例62例(男21例,女41例),年龄14～45岁,平均年龄22.1岁.术前行64排CT螺旋扫描,自编VR重建协议,在容积重建影像上进行Q角测量.所得数据与临床体表划线测量Q角数据进行配对t检验统计分析.结果 采用多排CT容积重建影像测量的Q角,62例健侧x±s为12.5°±4.8°.采用临床体表划线62例健侧x±s为14.5°±5.5°.两种方法对照有统计学意义(P<0.05).结论 采用多排螺旋CT容积重建影像测量Q角,与临床体表划线测量法比较,数据准确可靠.Q角测量数据的一致性好.为临床制定手术方案提供了准确的影像学数据,并有利于随访观察.     

Segond骨折与前交叉韧带损伤相关性的临床研究

Segond骨折是指胫骨平台外侧的撕脱骨折，也称外侧关节囊征，经常出现在新鲜的膝关节损伤中，几乎都伴随着前交叉韧带的损伤，现对我院收治的41例前交叉韧带损伤合并Segond骨折的患者的诊断及手术治疗经验进行总结。     

交叉韧带囊肿MR影像与临床表现分析

目的:分析交叉韧带囊肿的MR影像和临床表现。方法:对7例交叉韧带囊肿患者进行回顾性分析,其中男性5例,女性2例。年龄22~38岁(平均年龄30.6岁)。对所有患者的临床表现,包括症状、症状持续时间、体征、外伤病史以及MR影像进行了分析。结果:本组病例有5例前交叉韧带囊肿和2例后交叉韧带囊肿,所有囊肿形态为椭圆形或分叶状。大多数位于交叉韧带的后方。采用关节镜手术对所有患者的囊肿进行切除和吸取,术后症状消失并且经过随访未出现复发。结论:膝关节内的交叉韧带囊肿较为少见。它可能造成膝关节疼痛,屈伸功能受限。MRI检查是有助于确立诊断、指导治疗的有效手段。这类损伤经过关节镜手术治疗可获得满意疗效。     

国家男子举重队赛前训练期生化参数分析

为探索我国高水平举重运动员赛前训练期间机能变化规律 ,利用血红蛋白 (Hb)、尿素氮 (BUN)、肌酸激酶 (CK)和血睾酮 (T)指标 ,对 16名国家男子举重队优秀运动员赛前训练的机能状况进行了监测。结果显示 :Hb基本在 14 8g/L和 15 6g/L之间波动 ,CK呈明显周六高、周一低的“W”型曲线 ,T稳定在 15nmol/L和 2 2nmol/L之间 ,BUN在 6 .1mmol/L和 5 .3mmol/L之间起伏波动。     

血浆致动脉硬化指数与冠心病相关性的年龄差异性研究

目的：观察血浆致动脉粥样硬化指数(AIP)与冠心病(CAD)的相关性是否存在年龄差异。方法：选取2017年7月—2020年11月在深圳市龙岗中心医院心内科行冠状动脉造影(CAG)的1 313例患者作为研究对象，分为青年组(≤44岁)、中年组(45～64岁)、老年组(≥65岁)，各组再按CAG结果进一步分为非冠心病组(N-CAD)与CAD患者。比较各年龄段中血脂指标与CAD的相关性。结果：CAD患者的血脂存在显著的年龄差异，逻辑回归分析显示AIP是青、中年组CAD的独立危险因素，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)是所有年龄段CAD的独立危险因素。受试者工作特征曲线显示，青、中年组中AIP对CAD的诊断价值与其他血脂指标相近。结论：AIP与CAD的相关性存在年龄差异，AIP是青、中年人群CAD的独立危险因素，其诊断价值与传统血脂指标类似，老年人群中AIP与CAD没有相关性。