应用Fura—2／AM测定培养人视网膜色素上皮细胞内游离钙浓度的方法

为探索应用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ测定培养人视网膜色素上皮细胞（ＲＰＥ）内游离钙的方法。选用３—５代培养人ＲＰＥ细胞，用０．１％胰蛋白酶消化后，应用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ负载进行荧光测定。结果：培养的人ＲＰＥ细胞具有细胞存活力高，细胞数量充足的优点。在３７℃水浴条件下，Ｆｕｒａ－２／ＡＭ负载３０分钟，ＤＭＥＭ室温温育１０分钟，测定结果快捷、稳定。结论：在静息状态下，ＲＰＥ细胞内钙浓度为１９２±３０．４３ｎｍｏｌ／Ｌ，此值在文献报道范围内，加入乙酰胆碱后钙浓度为２６０．７±２４．４３ｎｍｏｌ／Ｌ，说明乙酰胆碱通过与胆碱能受体结合调节细胞内钙的浓度。     

儿童睫状沟缝合固定人工晶体2例

儿童睫状沟缝合固定人工晶体２例中国医科大学第一临床学院眼科刘汉强，洪晶，訾秀云病例１男７岁１９９２年３月７日左眼被高梁杆刺伤，当时诊断为左眼角膜裂伤、外伤性白内障。缝合角膜。１９９２年７月１７日行左眼晶体皮质吸出术，术中见晶体上方后囊膜破裂严重，未同...     

晶体脱位Ⅰ期睫状沟缝合人工晶体疗效分析

本文探讨晶体脱位的患者行晶体取出，前部玻璃体切割，及睫状沟缝合人工晶体联合手术，以恢复眼部的正常解剖关系，减少并发症，现将我们的手术方法及结果报告如下。病例和方法从１９９２年５月至１９９７年７月，我们对３４例因眼外伤而致晶体后脱位患者行玻璃体切割，晶...     

影响急诊补液室医疗安全的护理因素分析

目的 探讨急诊补液室医疗安全的护理因素,提高急诊患者的输液安全,保证医疗、护理质量,减少医疗纷.必须培养全能急诊护理工作者,建立完善的多科协急诊诊疗抢救体系.方法 由医生、护士、医务科、医技人员、总务科、设备科人员等共同完成急诊补液室患者的输液安全工作.结果 通过各部门参与安全工作,降低了急诊输液患者的安全隐患,提高了医疗服务质量.结论 急诊输液工作涉及医院多个部门,只有紧密合作才能做好此项工作.     

双重荧光标记法检测人视网膜色素上皮细胞吞噬的功能

目的:检测人视网膜色素上皮(humanretinalpig-mentepithelium,HRPE)细胞特异性及非特异性吞噬动力学,比较二者的不同之处。方法:用双重荧光标记法检测HRPE细胞吞噬动力学,即分别用红色染料硫氰酸罗达明(sulforho-damine,SR)、绿色荧光染料异硫氰酸酯荧光素(FITC)标记HRPE细胞和视杆细胞外节膜盘(rodoutersegments,ROS)。用1×1010个/L的FITC-ROS及自发绿色荧光的乳胶微球(leatexbeads,LB)于37℃孵育培养的正常HRPE细胞,在孵育的不同时间(5min￣48h)去除孵育物,终止吞噬反应。用配有特殊三通广谱吸收波长,长工作距离镜头的荧光显微镜实时,活体观察并记录结合及吞噬的数量。用扫描电镜及激光共聚焦扫描显微镜证明HRPE细胞对LB及ROS结合与吞噬。结果:孵育0.25h时ROS已结合于HRPE细胞表面,0.5h时可见极少数的ROS被HRPE细胞摄入细胞内;之后的孵育过程中被结合及被吞噬的ROS数目不断增加,至孵育18h对ROS的结合达到饱和,但摄入过程继续进行,至孵育24h,对ROS的吞噬达到饱和。当HRPE细胞与LB孵育时,至1.5h结合方启动,6h摄入开始;在观察的48h内被结合及被吞噬的LB数目随时间延长而呈线性增加。结论:HRPE细胞的特异性及非特异性吞噬动力学明显不同,HRPE细胞对ROS的结合及吞噬比其对LB的结合及吞噬发生得更早,而且结合及吞入过程均具有时间饱和性。     

雷帕霉素滴眼液抑制大鼠角膜移植的免疫排斥反应

目的:研究雷帕霉素滴眼液眼局部应用对大鼠角膜移植免疫排斥反应的作用。方法:建立大鼠穿透性角膜移植动物模型,以SD大鼠为受体,Wistar大鼠为供体,分为A,B,C,D,E5组。手术后2d起分别以滴眼液基质、0.5g/L雷帕霉素滴眼液、1g/L雷帕霉素滴眼液、2g/L雷帕霉素滴眼液、10g/L环孢霉素A滴眼液滴眼,每次100μL,4次/d,用药至排斥反应发生。对角膜植片进行临床观察,以混浊、水肿和新生血管3项指标作为临床评估标准,并进行组织学检查。结果:角膜植片5组的存活时间分别为11.00±1.85d,19.71±3.86d,22.17±4.07d,31.71±8.44d及25.00±8.85d,各用药组与对照组比较差异有显著性(P<0.01);各浓度雷帕霉素组与环孢霉素A组比较差异无显著性(P>0.01)。组织学发现,术后14d各药物治疗组炎细胞浸润、新生血管形成及水肿程度均明显轻于对照组。结论:0.5,1及2g/L的雷帕霉素滴眼液均能显著延长角膜植片的存活时间,对大鼠穿透性角膜移植排斥反应具有抑制作用,随着药物浓度的增大抗排斥作用增强。     

人骨髓间充质干细胞的培养及细胞增殖测定

目的 分离培养并鉴定人骨髓间充质干细胞.方法 成人骨髓取自非血液系统疾病、非肿瘤及乙肝表面抗原阴性的胸外科手术中摘取的肋骨,采用密度梯度离心法和贴壁筛选法进行培养;免疫细胞化学法鉴定细胞膜抗原.结果 人骨髓间充质干细胞(MSCs)的CD44表达阳性;早、中、晚3代传代培养具有以下共性特征:传代培养潜伏期约为24～36 h;传代培养对数增殖期约为4～6 d;对数增殖期结束后至接种后第9 d,MSCs生长逐渐缓慢,进入平台期.结论 培养的细胞不是骨髓中的造血干细胞或骨髓基质中的成纤维细胞,是处于未分化阶段的骨髓间充质干细胞.     

角膜内皮移植术

既往各种原因引起的角膜内皮细胞失代偿,如Fuch角膜内皮营养不良、外伤和手术等原因引起的角膜内皮细胞损伤及无晶状体眼和人工晶状体眼并发的大疱性角膜病变等,穿透角膜移植(penetrating keratoplasty,PKP)手术是其唯一的选择.虽然随着显微手术技术的提高,手术器械的改进,PKP的手术成功率已有很大的提高,同时有着较高的植片透明率.但PKP还是存在诸多的缺点:手术中由于眼部完全开放,存在着眼内容物脱出和驱逐性脉络膜出血的风险;术后由于创口和缝合等导致角膜曲率的变化和不规则散光限制了视力的恢复;角膜伤口的迟缓愈合,使创口容易因外力而裂开;缝线的刺激可引起角膜植片的感染或诱发排斥反应;而角膜移植后的排斥反应更是导致手术失败最常见的并发症.