多重聚合酶链反应用于人血小板抗原-2、-4、-5系统基因分型的研究

目的 建立用于检测人血小板抗原（HPA），2、-4、-5系统基因型的多重聚合酶链反应（PCR）。方法 在一个反应体系中同时扩增HPA-2、-4、-5系统特异性目的基因片段。用琼脂糖凝胶电泳确定HPA-2、-4、-5系统基因型；再用多重PCR对75名健康的单采血小板者进行HPA-2、-4、-5系统基因分型，分型结果与PCR-序列特异性引物（PCR—SSP）获得的结果进行比较。结果 HPA-2、-4、-5系统分型的结果为：70名为2a／2a型，5名为2a／2b型；73名为4a／4a型，2名为4a／4b型；66名为5a／5a型，9名为5a／5b型。未发现2b／2b、4b／4b及5b／5b纯合子个体。多重PCR结果与PCR-SSP方法获得的结果一致。结论 多重PCR具有操作简便、快速、准确等特点，可以用于血小板血型抗原基因分型。     

重组抗原用于日本血吸虫病免疫诊断研究进展

目前,用于血吸虫病免疫诊断的最常用的抗原是成虫抗原和虫卵抗原,由于这两种粗抗原的成分复杂,且与其他寄生虫感染血清存在着较严重的交叉反应,血吸虫病诊断的特异性不高,生产的试剂不宜标准化。近年来,随着分子生物学的迅猛发展,很多生物学技术已经用于寄生虫学(病)研究。运用分子克隆等技术可以获得大量纯化的     

线虫多蛋白质变应原

许多种线虫感染的症状可能与ＩｇＥ抗体和免疫病理有关。这已引起了对寄生虫变应原及其在寄生虫重组疫苗构成中作用的关注和讨论。ＭｃＲｅｙｎｏｌｄｓ等综述了对近来鉴定的几种线虫主要变应原所做的工作。     

恶性疟原虫氯喹抗性相关基因的研究进展

恶性疟原虫产生氯喹抗性是疟疾防治中遇到的主要难题之一。存在于恶性疟原虫5号染色体上的多药抗药性基因1 (pfmdr1)和7号染色体上的cg2基因和pfcrt基因被认为是氯喹抗性相关基因。本文就其研究进展作一综述。     

日本血吸虫体表蛋白Tetraspanin 2-A核酸疫苗的构建及其对小鼠的免疫试验

采用PCR法扩增日本血吸虫体表四跨膜家族蛋白2-A（SjTsp2-A）基因,构建重组质粒pcDNA3.1（+）/SjTsp2-A,将其转至大肠埃希菌DH5α制备DNA疫苗pcDNA3.1（+）/SjTsp2-A。24只BALB/c小鼠均分3组,每鼠于左股四头肌注射0.5 mg/ml盐酸布比卡因50 μl。次日,A组同法注射DNA疫苗pcDNA3.1（+）/SjTsp2-A,B组注射重组质粒pcDNA3.1（+）/SjGST,C组注射空质粒pcDNA3.1（+）。注射剂量均为100 μg/只。每隔2周注射1次,共3次,末次免疫后2周各组均经腹部皮下感染日本血吸虫尾蚴40±2条/鼠,45 d后剖杀,计数减虫率和减卵率。ELISA检测抗体效价,A组化分析股四头肌局部组织蛋白表达情况。结果A组的平均检虫数和每克肝组织虫卵数均显著低于B组和C组（P值均<0.05）,A组的减虫率和减卵率分别为44.4%和28.4%。A组血清抗体效价高达1 ∶ 25 600。A、B两组局部组织均有特异性蛋白表达。DNA候选疫苗pcDNA3.1（+）/SjTsp2-A能诱导小鼠产生一定的免疫保护作用。     

Th17细胞因子及炎症趋化因子在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的表达

目的 观察日本血吸虫感染C57BL/6小鼠肝脏Th17细胞因子及其相关炎症趋化因子动态变化和肝脏虫卵肉芽肿病变,探讨其在日本血吸虫虫卵肉芽肿病变形成中的作用.方法 建立日本血吸虫感染C57BL/6小鼠模型,感染后2、4、6、8、10和12周剖杀小鼠,用实时荧光定量PCR法检测小鼠肝脏白介素17(IL-17)、IL-6、...     

日本血吸虫谷胱甘肽转移酶基因片段在真核表达载体中的亚克隆

目的将日本血吸虫谷胱甘肽转移酶(GST)基因片段克隆到真核表达载体 pBKCMV中,以便对其进行核酸疫苗的研究。方法特定寡核苷酸引物的设计和合成,TRIZOL 提取日本血吸虫成虫 RNA,RT-PCR 法扩增 GST 基因编码序列,将扩增产物连接 pGEM-T 克隆载体,再亚克隆到真核表达载体 pBK CMV 中。结果 RT-PCR 法特异性扩增出 SiGST 编码基因片段,其大小约为670bp,经双酶切、PCR 鉴定表明所构建的质粒 pGEM-T-GST 和 pBK CMV-GST中含有目的基因。结论 pBK CMN-GST 重组质粒的成功构建,为进一步表达 GST 及其在血吸虫病免疫诊断、免疫预防中的作用研究提供了条件。     

保护性免疫血清及单克隆抗体筛选日本血吸虫成虫cDNA文库

目的　为寻找有效的抗日本血吸虫感染疫苗候选抗原分子。方法　用紫外线照射致弱尾蚴免疫兔血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,再用同法免疫鼠脾细胞制备的单克隆抗体对所获阳性克隆进行再筛选 ,并对免疫筛选的阳性克隆的cDNA插入片段进行PCR扩增。结果　兔免疫血清确定 12个阳性克隆 ,其中 6个克隆与 2株以上的单抗呈阳性反应 :PCR扩增cDNA插入片段大小约 40 0bp～ 1 4kb左右。结论　已筛选到与致弱尾蚴免疫兔血清及同法免疫制备单抗产生特异反应的阳性克隆 ,获得一批编码可能具有保护性作用的日本血吸虫抗原的基因片段。     

新疾病防控形势下人体寄生虫学教学内容改革方向

目的探讨在新的疫病流行和防控形势下人体寄生虫学的授课策略。方法通过文献搜集分析概述我省现阶段寄生虫病流行的新特点,讨论《人体寄生虫学》课堂教学中的新策略。结果和结论随着社会发展和经济结构的改变,我省寄生虫病已经形成了传统土源性寄生虫病流行率逐年下降,食源性寄生虫病和输入性寄生虫病流行率逐年上升的新趋势。教学主体需要和疾病预防控制、检验检疫相关部门合作,逐步建立国际科研教学新模式,更新教学方式和内容,顺应新时代的教学需求。     

RNA干扰技术及其在寄生虫学研究中的应用

随着1998年RNA干扰在秀丽隐杆线虫中的发现,RNA干扰作为一项在分子生物学及细胞生物学研究的新技术得到了快速发展。该文就近几年来RNA干扰的机制、基因功能研究和基因治疗以及在寄生虫方面的研究进展作一综述。