N-乙酰氨基葡萄糖对骨折修复中成骨细胞活性和骨形态发生蛋白的影响

背景：已证实甲壳质及其衍生物具有免疫凋节、促进伤口愈合、止血笔生物学作用，N-乙酰氨基葡萄糖作为甲壳质的衍生物。是否能够产生声骨折愈合的影响。目的：在骨折修复过程中介入N-乙酰氨基葡萄糖．观察成骨细胞活剥和骨形态发生蛋白的变化。设计：随机对照实验．单位：青岛大学医学院的人体解剖学教研室。材料：实验于2002-03／08在青岛大学医学院神经解剖实验室完成。遄用健康新西兰兔70只，随机分为3组：生理盐水组23只，接骨片组23只，N-乙酰氨基葡萄糖组24只。方法：所有动物均制备右桡骨中段3mm骨缺损模型，模型建立后生弱盐水组给予生理盐水1.00mL／kg，接骨片组给予接骨片1．00mL／kg，N-乙酰氨基葡萄糖组给予N-乙酰氨基葡萄糖0.28g／kg，每天灌胃给药直至取材为止。分别于术后9．17，30，42d进行取材。通过X-线片与苏木精-伊红染色观察各组骨折愈合情况．骨形态发生蛋白的表达采用免疫组织化学法观察。主要观察指标：①各组动物术后大体情况。②术后不同时间各组骨折叠合X线观察结果。③术后不同时间各组骨缺损断端间骨形态发生蛋亡表达的平均吸光度值．④术后不同时间各组组织形态学观察结果、结果：按意向处理分析，实验纳入70只兔均进入结果分析：①术后不忙时间各组骨折愈合评级X线观察结果：术后9，17，30，42dN-乙酰氨孝葡萄糖组骨折愈合程度均高于生理盐水组和接骨片组（P均〈0．05）．键术后不同时间各组骨缺损断端间骨形态发生蛋白表达的平均吸光膳值：与生理盐水组比较，术后9，17d接骨片组与N-乙酰氨基葡萄糖纣骨形态发生蛋白的表达均呈上升趋势，N-乙酰氨基葡萄糖组尤为明蜀（P均〈0.05）：而术后30．42d时骨形态发生蛋白的表达降低。③术定不同时间各组组织形态学观察结果：术后9d．N-乙酰氡基葡萄糖组墙端间隙变小，有比较均匀的骨小梁形成，成骨细胞排列较整齐：生理型水组断端间隙较大，少有或偶有不均匀的骨小梁形成，成骨细胞无或枉少．术后30d，N-乙酰氨基葡萄糖组断端之间全部为骨小梁填充，骨蜃腔骨小梁将要穿通，骨小梁周围成骨细胞排列整齐间有破骨细胞；生型盐水组断端之间大部分为骨小梁，但有中间部分未衔接．断端间软骨缉胞极少。术后42d，N-乙酰氨基葡萄糖组断端处骨板编织骨初始形成骨髓腔贯通。破骨细胞多而活跃，有骨小窝：生理盐水组断端之间充帮骨小梁．但连接线不清，髓腔将要贯通，成骨细胞排列较为整齐，有破骨细胞出现。结论：N-乙酰氨基葡萄糖能够促进骨折的愈合，可能与其促进成骨细Ⅲ活性和早期增加骨形态发生蛋白在骨折愈合中的表达有关。     

调控Tim-3通路在免疫性肝损伤大鼠中对Th17细胞的影响

目的 建立免疫性肝损伤模型,探讨Tim-3通路在阻断或激活时对Th17细胞的影响。方法 大鼠尾静脉注射刀豆蛋白A (ConA) 8周,建立免疫性肝损伤模型。无菌取脾脏制备脾淋巴细胞,取外周血分离血清后于-20℃保存,取肝脏组织放入4%的多聚甲醛中固定备用。在96孔板上将脾淋巴细胞平均分成5组,即阻断实验组、阻断对照组、激活实验组、激活对照组和ConA对照组。用Tim-3的单克隆抗体即Anti-Tim-3来阻断Tim-3通路;用Tim-3的重组配体galectin-9来激活Tim-3通路,37℃、5% CO₂培养箱中培养72 h,收集细胞上清液于-20℃保存。生化分析法测血清中ALT、AST和ALB的表达;HE染色观察肝脏组织的病理变化;免疫组化法测肝脏组织中IL-17A和ROR-γt蛋白的表达;ELISA法测细胞上清液中IL-17A及IL-6的表达;实时定量PCR测各组脾淋巴细胞ROR-γt mRNA的表达。结果 与对照组相比,模型组HE染色可见明显的炎性细胞浸润、肝脏组织损伤及较多的假小叶,免疫组化可见IL-17A和ROR-γt蛋白的表达明显升高;与阻断对照组相比,阻断实验组中IL-17A和IL-6的水平升高(P<0.05);与激活对照组相比,激活实验组中IL-17A和IL-6的水平降低(P<0.05);实时定量PCR显示与阻断对照组相比,阻断实验组中ROR-γt mRNA的表达明显增加(P <0.05)。结论 免疫性肝损伤的发病与Th17细胞密切相关,免疫调控Tim-3通路可通过影响Th17细胞效应,进而参与免疫性肝损伤的发病机制。     

人参皂苷对体外培养低氧海马神经元的保护作用

目的 观察人参皂苷（Rg2）对大鼠低氧海马神经元的保护作用及其机制。方法 取新生Wistar大鼠海马神经元体外培养14d,随机分为对照组、5μmol/L尼莫地平组（尼莫地平组）、Rg2 0．025mmol/L组（Rg2 1组）、Rg2 0．050mmol/L组（Rg2 2组）。将相应药物加入到培养液中孵育4h后,连续充以体积分数0．95N2＋体积分数0．05CO2混合气体,建立急性低氧细胞模型。台盼蓝染色计数存活细胞,吉姆萨染色观察细胞形态,荧光分光光度计法测细胞内Ca^2＋浓度。结果 尼莫地平组、Rg2两个剂量组的细胞死亡率均明显低于对照组,以Rg2 2组最低,差异均有显著性（X^2=3．37,P〈0．05）。海马神经元细胞内Ca^2＋浓度在尼莫地平组、Rg2两个剂量组均明显低于对照组,以Rg2 2组最低,差异均有显著性（F=466．58,q=6．76～48．82,P〈0．01）。结论 Rg2可显著降低体外培养大鼠低氧海马神经元的细胞死亡率,其机制可能是通过减少Ca^2＋内流而发挥作用。     

壮骨液治疗骨缺损相关血生化学指标的检测

①目的　探讨中药壮骨液对骨缺损愈合的促进作用及其机制。②方法　将新西兰兔 80只 (雌雄各半 ) ,制成骨缺损模型后 ,随机分成 4组 ,实验组口服壮骨液 1 6 35mg/kg(大剂量组 )、32 7mg/kg(小剂量组 ) ,对照组分别口服接骨片 2 2 4mg/kg和生理盐水。分别于骨缺损后第 9、1 7、30、4 2天测定血清钙、磷的浓度和碱性磷酸酶 (ALP)的活性。③结果　实验组血清钙浓度于术后第 1 7天明显高于生理盐水对照组 (F =1 3.1 1 ,q =5 .6 1、5 .2 6 ,P <0 .0 5 ) ;血清磷浓度于术后第 1 7天明显低于生理盐水对照组 (F =1 5 .6 1 ,q =6 .6 1、7.2 4 ,P <0 .0 5 )。④结论　壮骨液能促进新西兰兔骨缺损的愈合     

甲壳质衍生物促进骨折愈合的实验研究

目的 观察甲壳质衍生物促进兔桡骨骨折愈合的作用。方法 新西兰兔，制备右桡骨中段3mm骨缺损模型，随机分组，每日灌胃给药。并于术后定期拍X-线片观察各组的骨折愈合情况。结果 X-线片显示甲壳质衍生物饲养组术后9d、17d的骨折愈合情况比对照组好，差异显著；而术后30d、42d比较，差异有极显著性。结论 甲壳质衍生物能促进骨折修复愈合。     

甲壳质衍生物对新西兰兔骨缺损愈合相关血生化指标的影响

本文在制备新西兰兔实验性骨缺损模型的基础上 ,探究甲壳质衍生物对骨缺损愈合的促进作用及其机理。实验将新西兰兔 80只 ,雌雄各半 ,制成骨缺损模型后 ,随机分成四组 ,实验组口服N 乙酰氨基葡萄糖和壳寡糖 ,对照组口服接骨片和生理盐水。骨缺损后第 9、17、30、4 2d进行血清生化指标测定。结果显示 ,实验组血清碱性磷酸酶 (ALP)浓度于术后第 17d明显低于生理盐水对照组 (P <0 .0 5 ) ;血清钙浓度于术后第17d明显高于生理盐水对照组 (P <0 .0 5 ) ;血清磷浓度在术后各时间段内虽有所降低 ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结果表明 ,甲壳质衍生物口服能促进新西兰兔骨缺损的愈合。     

可视化上颌骨与牙列三维模型的建立

基于美国可视人计划切片图像数据集建立三维模型。图像分割主要在Adobe Photoshop环境下半自动实现，三维模型的构建和修正采用Mercury公司的Amira软件实现骨模型。建立了上颌骨、上牙列精细的三维模型，此模型可精确的显示眶下孔、眶下沟、神经管；且每颗牙齿独立建模，并能严密地与上颌骨的牙槽配合。结果提示重建后的上颌骨与牙列模型三维效果逼真，立体感强，准确地显示了上颌骨、牙列及精细结构，为教学、科研及虚拟手术等提供了准确逼真的模型。     

1000/基于PC机上颅脑CT二维图像的三维重建

目的: 在普通个人计算机上利用颅脑CT二维图像实现对颅骨的三维重建。方法: 利用正常人颅脑CT扫描数据集，采集二维图像数据，利用Amira软件对二维图像数据进行颅骨的图像分割、提取其轮廓线、三维可视化重建。结果：利用颅脑CT二维图像数据在普通计算机上得到了颅骨精细的三维模型。此模型能够多个视角显示和观察，并能单独显示某一分离的结构，同时可对其进行编辑和精确距离测量。结论：在普通计算机上应用软件进行三维重建可以获得颅骨精细的三维模型，解决了传统上只能依赖螺旋CT机进行三维重建的难题，为科研、教学及建立颅脑模型数据库提供方法和积累了资料，为三维重建技术在普通计算机上的广泛应用提供重要理论依据。     

TOLL样受体4拮抗剂干预周围神经损伤后的瓦勒变性

BACKGROUND: The mechanism underlying Wallerian degeneration following peripheral nerve injury is complex. Immune regulation on Wallerian degeneration is beneficial for early repair of perpheral nerve injury. OBJECTIVE: To investigate the effects of Toll-like receptor 4 (TLR4) antagonist on Wallerian degeneration and axonal regeneration after early peripheral nerve injury in rats. METHODS: Fifty male Wistar rats were recruited and randomly divided into treatment group (n=20), model group (n=20) and sham group (n=10). The right sciatic nerves of rats in treatment and model groups were cut and sutured end-to-end, while the sciatic nerves of rats in sham group were only exposed. In the treatment group rats were intravenously injected with 0.15 mg/kg TAK-242 via tail vein 1 hour preoperatively and 7 days postoperatively, and the rats in the other two groups were given intravenous injection of the same volume of normal saline. The sciatic nerves were removed at 24 hours, 3, 4 and 7 days after surgery. RESULTS AND CONCLUSION: Real-time PCR indicated that the mRNA expressions of interleukin-1β and monocyte chemoattractant-1 were significantly increased in the model group compared with the sham group at 24 hours after surgery (both P < 0.001), while the expressions were significantly decreased after TAK-242 injection (both P < 0.001). Immunofluorescence showed that compared with the model group, down-regulated expression of CD68+ and iba1+ cells appeared in the treatment group at 3 days after surgery (P < 0.01, P < 0.05). Luxol fast blue staining revealed that demyelination at the sciatic nerve stump appeared in both model and treatment groups at postoperative 7 days, but myelin debris clearance in the treatment group was significantly reduced compared with the model group (P < 0.05). Hematoxylin-eosin staining showed that a lot of inflammatory cells, Schwann cells and regenerated nerve fibers at the sciatic nerve stump were found in the model group, while there were few inflammatory cells, Schwann cells and regenerated nerve fibers in the treatment group at 7 days after surgery. Immunohistochemistry found that the expression of growth-associated protein-43 in the treatment group was significantly lower than that in the model group at 4 days postoperatively (P < 0.05). Besides, compared with the model group, a significantly decreased sciatic functional index was found in the treatment group at 20, 30 and 40 days after surgery (P < 0.05). These results show that TLR4 antagonists delay early nerve regeneration in rats after sciatic nerve injury probably by inhibiting the TLR4 signaling pathway. 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程