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61.
背景与目的:在恶性转化的肿瘤细胞中有β-1,4-半乳糖基转移酶V(beta—1,4-galactosyhransferase V,β-1,4-GalT V)基因的高表达。我们在以往的研究中发现:随着人脑星形胶质起源肿瘤恶性程度的增高,β-1,4-GalT V的基因表达也相应增高。为研究β-1,4-GalT V与人脑星形胶质细胞起源肿瘤恶性行为的关系,本研究检测β—1,4-GalT V对星形胶质细胞起源肿瘤细胞株SHG-44的迁移和增殖能力的影响。方法:采用划痕试验的方法,将转染了β—1,4-GalT V正义、反义和空载体的SHG-44细胞株接种于包被有纤连蛋白或层连蛋白的板上,观察划痕后不同时间向划痕处生长不同距离的细胞数。同时采用MTT法分析SHG-44细胞转染不同质粒后对细胞增殖的影响。结果:与转染空载体的SHG-44细胞株相比,转染正义β—1,4-GalT V的SHG-44细胞迁移和增殖速度均加快,而转染反义β—1,4-GalT V的SHG-44细胞迁移和增殖速度均减慢。结论:β—1,4-GalT V对SHG-44细胞的迁移和增殖能力均有影响,提示β—1,4-GalT V可能与SHG-44细胞的恶性生物学行为有关。 相似文献
62.
63.
64.
p27kip1为CIP/KIP家族的主要成员,对细胞周期起负调节作用.由于p27kip1的蛋白水平主要受到S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)介导的细胞周期依赖性、底物特异性的泛素-蛋白酶体途径调节,因此p27kip1降解水平的调节对其正常生物学功能的发挥至关重要.Skp2为人类F-box蛋白家族成员,介导p27kip1的多聚泛素化及随后的蛋白水解[1]. 相似文献
65.
p27kip1和Skp2在大鼠坐骨神经夹伤后脊髓中的表达变化 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究p27~(kip1)和Skp2在正常和坐骨神经夹伤后大鼠脊髓中的表达变化。方法:Westem印迹法,免疫组织化学,免疫荧光双标。结果:Western印迹结果显示坐骨神经夹伤后,脊髓中p27~(kip1)表达下降后又有所恢复,并且p27~(kip1)和Skp2在脊髓中的表达变化呈负相关。免疫组织化学及免疫荧光双标显示,p27~(kip1)和Skp2在正常和损伤后的脊髓神经元和胶质细胞中都有表达。坐骨神经夹伤后p27~(kip1)和Skp2在脊髓腹角阳性细胞数目变化呈负相关。结论:坐骨神经损伤后p27~(kip1)。和Skp2在脊髓腹角神经元及其周围的胶质细胞表达变化相关,对研究脊髓损伤和修复的分子机制有重要意义。 相似文献
66.
为了制备小鼠 β-1,4-半乳糖基转移酶 ( β-1,4-galactosyltransferase ,β-1,4-Gal T- )地高辛标记的 RNA探针以探讨β-1,4-Gal T- m RNA在坐骨神经组织的表达定位 ,本研究用提取的小鼠脑总 RNA,采用 RT-PCR方法 ,得到β-1,4-Gal T- 的 DNA片断 ,将其克隆到 p GEM-T载体 ;采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ;运用点杂交的方法分析标记探针的灵敏度 ;最后应用该探针 ,通过原位杂交的方法 ,分析 β-1,4-Gal T- m RNA在小鼠坐骨神经的表达。结果 :构建了β-1,4-Gal T- /p GEM-T质粒 ,获得了高效价的地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ,应用该探针发现 β-1,4-Gal T- 在小鼠坐骨神经髓鞘中有表达。以上结果表明 ,制备的地高辛标记的正、反义 β-1,4-Gal T- RNA原位杂交探针可特异地检测β-1,4-Gal T- m RNA在组织中的表达。本研究为进一步分析β-1,4-Gal T- 在坐骨神经及其它神经组织发育和损伤过程中的表达奠定基础。 相似文献
67.
68.
目的 :研究原代Schwann细胞转染持续激活型原癌基因Ha Ras后β1,4 半乳糖基转移酶I,II ,V(β 1,4 galactosyltransferaseI ,II ,V ;β 1,4 GalT I,II,V)表达变化。方法 :构建Ha Ras表达质粒和分离纯化大鼠Schwann细胞 ,将Ha Ras表达质粒转染到Schwann细胞中。采用NorthernBlot方法分析转染细胞中Ha Ras转染情况和转染后β 1,4 GalT I,II,V的表达变化。结果 :原代Schwann细胞转染持续激活型Ha Ras后 ,β 1,4 GalT I随转染时间延长而表达增高 ,而 β 1,4 GalT II及V的表达无变化。 结论 :β 1,4 GalT I随Schwann细胞转染时间Ha Ras延长而表达增高 ,提示原代细胞表面的 β 1,4 GalT I可能与Ha Ras影响原代细胞增殖的信号途径相关。 相似文献
69.
目的探讨cyclimE、survivin及PTEN在结直肠癌中的表达及与临床病理特征的相关性。方法采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶法(S-P法)检测cyclinE、survivin及PTEN基因蛋白在95例结直肠癌组织及40例正常结直肠组织中的表达;在上述95例结直肠癌中,52例同时采用RT-PCR方法分别检测cy-clinEmRNA、survivinmRNA及PTENmRNA表达状况。结果95例结直肠癌组织中cyclinE、survivin及PTEN基因蛋白的阳性率分别为45.3%、48.4%及36.8%,40例正常结直肠组织中3种基因蛋白的阳性率分别为0、0及95.0%。CyclinE表达与结直肠癌组织学分级、TNM分期有关(P〈0.01),Survivin表达与结直肠癌组织学分级有关(P〈0.05),PTEN表达与结直肠癌肿瘤浸润深度、组织学分级、TNM分期均有关(P〈0.05)。cvclinE或survivin表达的阳性率与PTEN表达的阳性率之间呈明显的负相关(P〈0.05)。CyclinEmRNA、survivinmRNA及PTENmRNA在52例结直肠癌的表达与组织学分级及TNM分期均有关(P〈0.05)。结论结直肠癌中cyclinE、survivin及PTEN的mRNA或基因蛋白的表达与一些临床病理特征具有相关性.检测这3种基因蛋白对于评估结直肠癌的生物学行为具有重要价值。CyclinE和survivin表达上调与PTEN表达下调可能在结直肠癌的发生和进展中发挥协同作用。 相似文献
70.