某医疗机构160名放射工作人员职业健康监护状况分析

目的 进一步了解医用放射工作人员的职业健康状况,为切实保障其安全与健康提供依据。方法 对石家庄市某医疗机构160名放射工作人员一年的个人剂量监测和职业健康检查情况进行了调查,同时在该医疗机构选取了相近的非接触射线的160名工作人员作为对照组,并将相关调查结果进行了统计分析。结果 放射工作人员年有效平均剂量在0.675 3~2.312 mSv之间;各职业类别年有效平均剂量存在统计学差异（P<0.05）,放射治疗组的年平均有效剂量最高为1.552 3 mSv;不同职业的调查对象剂量当量分布情况不同,核医学、放射治疗组的调查对象年平均有效剂量在5~10 mSv范围内人数较多;放射组的晶状体异常率（11.25%）高于对照组（3.75%）,且差异具有统计学意义（P<0.05）;放射组外周血的白细胞数（5.03×10⁹/L）、血红蛋白（146.34 g/L）、血小板（180.87×10⁹/L）均低于对照组（6.33×10⁹/L、169.48 g/L、222.12×10⁹/L）;放射组的染色体畸变细胞率（0.04%）与对照组（0.03%）无统计学差异（P>0.05）,但微核细胞率（10.63‰）显著高于对照组（4.88‰）,差异有统计学意义（P<0.01）;结论 规范的职业健康监护至关重要,因此应建立健全的防护措施、增强自我防范意识,切实提高医用放射工作人员的健康水平。     

突触后密度蛋白-93在大鼠脊髓损伤后的表达变化

目的 探讨突触后密度蛋白-93(PSD-93)在脊髓损伤(SCI)后的表达变化以及定位情况.方法 使用改良Allen法制备大鼠急性脊髓损伤模型,致大鼠脊髓(T9、T10)重度撞击伤.采用实时定量PCR(Real-time PCR)和Western blotting测定损伤后各时间段PSD-93 mRNA及其蛋白水平在脊髓中的表达变化.采用免疫荧光双标方法检测PSD-93在正常脊髓中的分布以及损伤后的定位改变.结果 PSD-93 mRNA水平在SCI后呈现逐渐下降的趋势,在3d降到最低水平;蛋白水平则在SCI后显著上调,于1d达高峰.免疫荧光双标显示,PSD-93在SCI后除与神经型一氧化氮合酶(nNOS)存在着共定位之外,还高表达于损伤局部活化的小胶质细胞和星形胶质细胞.结论 脊髓损伤后PSD-93在基因和蛋白水平呈现明显的时相变化,并且与nNOS、活化的胶质细胞存在共定位,提示PSD-93参与了脊髓继发性损伤过程.     

β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ影响雪旺细胞衰老的研究

目的:探讨β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ与雪旺细胞衰老的相关性.方法:以不同浓度的β-1,4-GalT-Ⅰ表达质粒转染雪旺细胞,观察衰老相关半乳糖苷酶染色情况.以Ha-Ras转染雪旺细胞诱导衰老,采用Northern blot 方法检测转染后不同时间β-1,4-GalT-Ⅰ表达变化.结果:随着转染β-1,4-GalT-Ⅰ表达质粒浓度的提高,细胞衰老相关半乳糖苷酶染色阳性率增高;随着Ha-Ras转染时间的延长,β-1,4-GalT-Ⅰ表达逐渐增高.结论:β-1,4-GalT-Ⅰ与雪旺细胞的衰老相关,并可能在周围神经雪旺细胞的增殖调节中发挥重要作用.     

SHG-44胶质瘤细胞表达β-1,-半乳糖基转移酶V后对鬼臼乙叉甙敏感性影响

目的研究鬼臼乙叉甙(Etoposide,P16)对表达β-1,-半乳糖基转移酶V(beta-1,-galactosyltransferase V,β-1,-GalT V)的SHG-44胶质瘤细胞死亡和凋亡的影响,为进一步探讨β-1,-GaIT V与化疗药物敏感性的关系莫定基础.方法通过流式细胞仪(FCM)和Hoechst 33258染色法,分析不同浓度的VP16处理转染了正义(GalTV-HA/SHG-44)、反义β-1,-GalT V(GaITV-AS/SHG-44)和空载体(Mock)的SHG-44细胞后细胞的凋亡和死亡情况.结果①低浓度的VP16(20 μmoL/L)处理24 h后,alTV-HA/SHG-44组的死亡细胞加上凋亡细胞的比例明显低于Mock组(t=4.550 6,＜0.01)和GalTV-AS/SHG-44组(t=5.086 5,＜0.001).GalTV-AS/SHG-44组的死亡细胞加上凋亡细胞比例明显高于Mock组(t=3.287 3,＜0.01).高浓度的VP16(120μmoL/L)处理48 h和72 h后,alTV-HA/SHG-44组死细胞所占比例明显低于Mock组(t=3.3664,P＜0.05;t=5.495 3,＜0.01)和GalTV-AS/SHG-44组(t=3.173 2,＜0.01;t=4.603 5,＜0.001).②MTr分析显示,P16处理48,2h后,alTV-HA/SHG-44组活细胞数明显高于Mock组(t=5.078 3,＜0.05;t=3.8923,＜0.01)和GalTV-AS/SHG-44组(t=4.566 7,P＜0.01;t=4.784 9,＜0.001).③VP16(20 μmoL/L)处理24 h后,用Hoochst 33258染色.镜下观察到死亡或者凋亡细胞中的细胞核仁及断裂的核片段呈新月形,或核固缩并深染.GalTV-AS/SHG-44组平均死亡和凋亡阳性率为41%,大大高于经同样处理的转染空载体和转染正义β-1,-GalT V的SHG-44细胞.结论β-1,-GalTV能够影响抗肿瘤药VP16的杀伤作用,过表达β-1,4-GalT V可以拮抗VP16的作用,为解释胶质瘤的化疗耐药性提供了新的依据.     

Cyclin D3与Ki67在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其意义

目的：探讨cyclinD3和Ki67在我国非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgidn’s lymphoma，NHL）中的表达及其意义。方法：采用免疫组织化学方法检测114例IXTIL和20例反应性增生淋巴结中cyclinD3及Ki67的表达情况。结果：cyclin D3在反应性增生淋巴结(不包括生发中心)中的阳性率明显低于NHL。随着肿瘤侵袭性的增加，cyclinD3表达水平升高。Ki67在反应性增生淋巴结和NHL中的表达情况与cyclin D3一致。NHL中cyclinD3的阳性率与Ki67的表达水平呈明显正相关。结论：cyclinD3和Ki67的表达与NHL的细胞增殖活性和恶性程度密切相关，提示cyclin D3在淋巴瘤的恶性增殖过程中发挥重要作用，为淋巴瘤的诊治提供新的依据和靶点。     

β-1,4半乳糖基转移酶-I在钳夹伤后大鼠坐骨神经中表达的变化

为了观察β-1,4-半乳糖基转移酶-I(β-1,4-galactosyltransferase-I,β-1,4-GalT-I)在正常和钳夹伤后大鼠坐骨神经中表达的变化,本研究采用RT-PCR方法,从小鼠坐骨神经中特异性地扩增β-1,4-GalT-I cDNA片段并将其克隆到pGEM-T载体。采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-GalT-I RNA探针。通过原位杂交和图像分析的方法,观察β-1,4-GalT-I mRNA在正常和夹伤大鼠坐骨神经中的表达及其变化。结果表明:β-1,4-GalT-I mRNA在大鼠坐骨神经的髓鞘中表达,在夹伤坐骨神经后1~2d,β-1,4-GalT-I mRNA在坐骨神经的表达最高,于夹伤后1周开始下降,在夹伤后1个月恢复至正常水平。上述结果提示坐骨神经夹伤后β-1,4-GalT-I mRNA的表达发生变化,并且主要表达在坐骨神经的Schwann细胞。本研究结果为进一步分析β-1,4-GalT-I在周围神经再生中的调控机制奠定了基础。     

β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ在CD4+TH细胞中的表达及对其黏附能力的影响

目的研究β-1，4-半乳糖基转移酶I（β-1，4-galactosyltransferase I，β-1，4-GalT I）在CD4^＋TH中的表达与定位以及β-1，4-GalT I对CD4^＋ TH细胞黏附能力的影响。方法采用免疫磁珠阳性分选法分离纯化CD4^＋ TH细胞，通过RT-PCR、荧光免疫细胞化学法和激光共聚焦技术鉴定CD4^＋ TH细胞中β-1，4-GaIT I的表达与定位；分别用rhIL-2、rhIL-12、rhIL-4等细胞因子组合诱导CD4^＋ TH细胞活化分化，通过半定量RT-PCR、FCM检测CD4^＋ TH细胞中β-1，4-GaIT I的表达变化，运用层黏连蛋白结合实验比较CD4^＋ TH细胞黏附能力的改变；用α-乳清蛋白干扰CD4^＋ TH细胞表面β-1，4-GaIT I的活性及底物特异性，用层黏连蛋白结合实验分析其对CD4^＋ TH细胞黏附能力的影响。结果CD4^＋ TH细胞表面和细胞浆内表达长型和短型β-1，4-GalT I；rhIL-2活化的CD4^＋ TH细胞长型β-1，4-GaIT I mRNA水平及细胞膜表面β-1，4-GaIT I表达水平、细胞黏附能力均高于未经活化的CD4^＋ TH细胞，rhIL-2＋rhIL-12诱导培养的CD4^＋ TH细胞增强更明显；CD4^＋ TH细胞长型β-1，4-GaIT I mRNA水平及细胞膜表面β-1，4-GaIT I表达水平均与CD4^＋ TH细胞黏附能力呈正相关；α-乳清蛋白干扰后CD4^＋ TH细胞黏附能力降低。结论β-1，4-GalT I在CD4^＋ TH细胞中表达，且与细胞黏附能力密切相关，提示β-1，4-GalT I可能在CD4^＋ TH细胞的黏附过程中发挥重要作用。     

Galβ-1,4-GlcNAc在钳夹伤后大鼠坐骨神经中的表达变化

目的:分析Galβ-1,4-GlcNAc在正常和钳夹伤后大鼠坐骨神经中的表达变化.方法:采用免疫荧光和凝集素组织化学的方法检测Galβ-1,4-GlcNAc在正常和夹伤的大鼠坐骨神经中的表达定位.然后用图像分析的方法分析Galβ-1,4-GlcNAc在正常和夹伤的大鼠坐骨神经中的表达变化.结果:运用免疫荧光、凝集素组织化学方法和图像分析的方法检测Galβ-1,4-GlcNAc在夹伤后的坐骨神经中的表达定位及变化,发现其表达在外周神经中的雪旺细胞中并于夹伤后的一周达到高峰,于夹伤后两周恢复至正常水平.结论:提示Galβ-1,4-GlcNAc在坐骨神经夹伤后发生表达变化,并且主要表达在坐骨神经的雪旺细胞中,说明Galβ-1,4-GlcNAc在周围神经再生的早期发挥着重要的作用.     

β1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ表达质粒在许旺细胞中的转染与鉴定

目的构建β1,4-半乳糖基转移酶-I(β1,4-galactosyltransferase I, β-1,4-GalT-I)表达质粒,并将其转染到许旺细胞中,为探讨周围神经许旺细胞表达β-1,4-GalT-I的生物学意义提供研究基础.方法构建β-1,4-GalT-I表达质粒,并将其转染到分离培养的许旺细胞中;用特异识别β1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素-I(Ricinus Communis Agglutinin-I, RCA-I)免疫组织化学方法和Northern Blot鉴定转染情况.结果通过酶切鉴定和测序分析,实验成功构建β-1,4-GalT-I表达质粒.将构建的表达质粒转染到许旺细胞中,经鉴定表明,转染的表达质粒在许旺细胞中能表达β-1,4-GalT-I,并随转染浓度增高而表达增加.结论β-1,4-GalT-I在许旺细胞中的转染和表达,对分析许旺细胞表达β-1,4-GalT-I的意义如对其自身增殖的影响和对神经元生长作用,提供了研究基础.     

β-1，4-半乳糖基转移酶Ⅱ、V表达的亚细胞结构定位研究

为了研究β-1，4-半乳糖基转移酶Ⅱ和V(β-1，4-GalT-Ⅱand V)蛋白表达的亚细胞结构定位，本实验构建了β-1，4-GalT-Ⅱ和V融合绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒，分别将构建的质粒转染到PC12细胞和肝癌7721细胞中，在荧光显微镜下观察β-1，4-GalT-Ⅱ和V在其中表达的亚细胞结构定位。发现，β-1，4-GalT-Ⅱ和V主要表达在这两种细胞的细胞核旁的Golgi复合体，说明它们主要分布在Golgi复合体上。提示它们可能是在Golgi复合体参与蛋白质的糖链修饰。