脊髓损伤过程中β-1,4半乳糖基转移酶的表达研究

目的 探讨β-1,4半乳糖基转移酶(β-1,4-GalT)在横断性脊髓损伤后的时空表达变化以及细胞定位情况.方法 将42只成年SD大鼠随机分为假手术组和T9横断伤8 h、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d组,每组6只.采用实时定量PCR测定损伤后各时间段β-1,4-GalT在脊髓中的表达变化;采用原位杂交与免疫荧光标记方法检测β-1,4-GalT在脊髓中的分布以及伤后的定位改变.结果 脊髓横断损伤后,β-1,4-GalT-Ⅴ在损伤上、下段表达高峰分别出现在损伤后8 h和1 d,之后逐渐下降,至伤后14 d降低至假手术组水平.增高的mRNA主要分布于损伤周围的细胞中及脊髓后角浅层的感觉神经元中.荧光原位杂交结果显示,β-1,4-GalT-Ⅴ主要分布于巨噬细胞和小胶质细胞以及病理状态下的少突胶质细胞.同时β-1,4-GalT-Ⅴ mRNA在损伤后大量表达于富含P物质和IB-4的脊髓后角浅层的感觉神经元中.结论 脊髓损伤后β-1,4-GalT在基因和细胞水平呈现明显的时空变化,并且与巨噬细胞和小胶质细胞以及病理状态下的少突胶质细胞存在共定位.该酶可能参与了损伤后的继发性损伤,即伤后早期的炎性反应,并可能与脊髓损伤后的神经病理性疼痛有关.     

旧放射治疗装置技术性能检测与分析

旧放射治疗装置技术性能检测与分析王连知沈爱国冀维锋史立波刘玉珠张素英王瑞林放射治疗的质量保证和质量控制工作，早就受到了ＷＨＯ和国内放射治疗专家的重视。确保放疗装置的技术性能符合国家标准的要求，是做好放疗质量保证工作的关键，也是做好放射防护管理工作的基...     

β-1,4-半乳糖基转移酶V对胶质细胞瘤细胞SHG-44粘附的影响

目的：研究β-1，4-半乳糖基转移酶V(β-1，4-GalT V)对星形胶质瘤细胞株粘附能力的影响及其与细胞恶性行为的关系。方法：将转染正义、反义β-1，4-GalT V和空载体的SHG-44细胞株接种于包被有纤连蛋白(FN)或层连蛋白(LN)的板上，观察细胞粘附力的变化：采用Western Blot的方法检测整合蛋白β1表达变化及局部粘着斑激酶(FAK)的蛋白水平和FAK的酪氨酸磷酸化水平：结果：在FN和LN包被的板上，与转空载体的SHG-44细胞株相比，转正义β-1，4-GalT V比转反义β-1，4-GalT V的细胞在纤连蛋白和层连蛋白上的粘附能力增高，B1蛋白表达水平升高，FAK及其酪氨酸磷酸化水平增强。结论：β-1，4-GalT V对SHG-44细胞的粘附能力确有影响，提示β-1，4-GalT V的表达可能与胶质瘤的侵袭性有关。     

β-1,4-半乳糖基转移酶I影响雪旺细胞衰老的研究

目的:探讨β-1,4-半乳糖基转移酶I与雪旺细胞衰老的相关性。方法:以不同浓度的β-1,4-GalT-I表达质粒转染雪旺细胞,观察衰老相关半乳糖苷酶染色情况。以Ha-Ras转染雪旺细胞诱导衰老,采用Northern blot方法检测转染后不同时间β-1,4-GalT-I表达变化。结果:随着转染β-1,4-GalT-I表达质粒浓度的提高,细胞衰老相关半乳糖苷酶染色阳性率增高;随着Ha-Ras转染时间的延长,β-1,4-GalT-I表达逐渐增高。结论:β-1,4-GalT-I与雪旺细胞的衰老相关,并可能在周围神经雪旺细胞的增殖调节中发挥重要作用。     

β1,4-半乳糖基转移酶I影响雪旺氏细胞增殖的机制

目的:探讨β1,4-半乳糖基转移酶I影响雪旺氏细胞增殖的机制。方法:将不同浓度的β-1,4-GalT-I表达质粒转染雪旺氏细胞,采用Westernblot方法检测增殖相关信号分子cyclinD1、p16INK4以及p27Kip1的表达水平,North-ernblot方法检测p19ARF的表达变化。结果:随着β-1,4-GalT-I在雪旺氏细胞中的表达增加,cyclinD1表达降低,而p16INK4a和p19ARF呈现相反的变化;p27Kip1变化不明显。结论:β-1,4-GalT-I影响雪旺氏细胞增殖可能与cyclinD1、p16INK4a和p19ARF介导的信号传导途径有关。     

大鼠发育过程中脊髓组织CAPON与Dexras1 mRNA表达的实验研究

为探讨大鼠发育过程中神经型一氧化氮合酶羧基末端PSD-95/DLG/ZO-1(PDZ)结合配体(carboxy-terminal PDZ ligandof nNOS,CAPON)与Dexras1 mRNA的表达及二者的相关性,本实验采用大鼠发育模型,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime-PCR)及原位杂交组织化学(ISH)与免疫组织化学相结合的技术检测脊髓组织中CAPON及Dexras1 mRNA的表达变化。结果表明:在胚胎14~18d的脊髓组织中,CAPON mRNA呈低水平表达,生后1d表达升高并达到高峰。从形态上看,表达于尚未分化成熟的前角,随后呈逐渐下降趋势。在生后12w,表达于脊髓后角。而Dexras1 mRNA在胚胎14d呈低水平表达,16~18d时表达升高,同样在生后1d出现表达高峰并定位于尚未分化成熟的前角,随后表达逐渐下降。生后12w,在后角有表达。根据Real-time PCR结果作直线相关分析,在生后脊髓发育过程中CAPON与Dexras1 mRNA表达呈高度相关,于生后1d共定位于脊髓前角。形态学结果显示CAPON与神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达于相同细胞,但亚细胞定位不同。本研究表明,大鼠发育过程中,脊髓组织中CAPON及Dexras1 mRNA存在共表达,提示CAPON可能通过调节nNOS,进而激活Dexras1,在神经元的分化、突触的可塑性及突触发生过程中发挥一定的作用。     

N-糖链合成相关β-1,4半乳糖基转移酶在人星形胶质细胞瘤中的表达

目的分析与N-糖链合成相关β-1,4半乳糖基转移酶-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ(β1,4-galactosyltransferaseⅠ、Ⅱ、Ⅴ,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ)mRNA在正常脑组织和各级人星形胶质细胞瘤的表达变化。方法采用RT-PCR方法,分析β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人星形胶质细胞瘤的表达存在。以扩增的3种同工酶cDNA片段作为探针进行标记,Northernblot分析其mRNA在正常脑组织和各级人星形胶质细胞瘤中的表达变化。结果RT-PCR检测到β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人星形胶质细胞瘤中的表达存在。northernblot发现β-1,4-GalT-Ⅱ、Ⅴ在正常脑组织中有表达,但β-1,4-GalT-Ⅱ的表达较低,而β-1,4-GalT-Ⅰ在正常脑组织中表达极低。β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在星形胶质细胞瘤中的表达显著高于正常脑组织。其中,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ在各级胶质瘤中的表达没有明显差异。而β-1,4-GalT-Ⅴ的表达随胶质瘤分级的增高而增加。结论N-糖链合成相关的β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人脑星形胶质细胞瘤发生过程中的表达不同,尤其是β-1,4-GalT-Ⅴ的表达与人星型胶质瘤的恶性程度显著相关。     

NIDD基因TaqMan探针的制备及其在实时荧光定量PCR方法中的应用

目的：制备NIDD基因TaqMan探针建立检测NIDD基因荧光定量PCR（FQ-PCR）,以进一步研究NIDD的表达情况。方法：采用RT-PCR法,从出生后一天的SD大鼠脑组织mRNA中扩增NIDD基因的部分编码序列区（CDS）片段,克隆入pGEM-T载体,筛选阳性克隆、酶切鉴定及序列测定。采用TaqMan探针,以重组质粒为模板绘制标准曲线。结果：RT—PCR法扩增出一特异产物与预期长度112bp相符,DNA序列测序的结果与C,eneBank提供的已知序列（AB098078）比较,所克隆的NIDD基因片段与其中的112bp完全相同,与NIDD基因100％同源。以重组质粒为模板绘制标准曲线,相关系数r大于0．99,反应效率显示为1,各点变异系数小于10％。结论：采用RT．PCR和T载体技术成功制备出可应用于FQ-PCR的NIDD基因TaqMan探针。     

河北省放射卫生技术服务机构现状调查与分析

目的 进一步加强对放射卫生技术服务机构的管理,规范其服务行为,探索对放射卫生技术服务机构的监管对策.方法 设计调查表,对服务机构的基本情况、专业技术人员、设备配置及开展检测项目、工作量等进行了调查.结果 至2019年底,我省共有放射卫生技术服务机构23家,其中疾控和职防院所类8家,占34.8％,第三方(民营)机构类15...     

C-Jun结合蛋白在肝癌细胞组织中的高表达及其意义

目的 探讨C-Jun结合蛋白(JAB1)在肝癌细胞(HCC)组织中的表达及临床病理意义.方法 收集76例HCC及癌旁组织,10例肝血管瘤旁肝组织的临床病理档案资料,采用免疫组织化学方法检测JAB1蛋白质在这些组织中的表达,并与增殖细胞核抗原(Ki67)的表达相比较.应用统计学方法对结果进行分析.结果 HCC组织中JAB1蛋白质表达的阳性率(68.85%)显著高于癌旁组织(38.72%)(P＜0.001)和血管瘤旁肝组织(34.36%)(P＜0.001).JAB1的表达与肝癌组织分化程度,血清AFP值及转移有关(P=0.000,P=0.015及P=0.000),但与患者的年龄、性别、肿瘤组织学类型、肿瘤大小等无关.HCC组织中Ki67表达的阳性率为41.45%,明显高于癌旁组织2.11%(P＜0.1301)和血管瘤旁肝组织2.01%(P＜0.001).相关性分析表明HCC组织中JAB1蛋白质表达与Ki67表达呈正相关(r=0.6192,P＜0.001).结论 JAB1在HCC组织中呈高表达,且显著高于非癌肝组织,与HCC的发生发展有关;JAB1可作为HCC细胞增生程度的潜在临床病理标记.