清除补体避免猪到猕猴异种心脏移植超急性排斥反应的实验研究

目的 观察纯化的眼镜蛇毒因子(CVF)对猪到狱猴异种心脏移植超急性排斥反应的影响。方法 以幼猪为供者，施行猪到狱猴腹腔内异位心脏移植，实验组(n＝4)使用CVF完全清除受者体内补体，对照组(n＝5)不使用CVF，两个组术后均采用环抱素A、甲泼尼龙和环磷酰胺抑制排斥反应，通过检测血清C3、C4水平及总补体活性验证CVF的效果，移植心停跳时切取移植心进行病理检查。结果 在使用CVF后，实验组血清C3降为0，总补体活性CH50值也几乎为0，末发现明显毒副反应，移植猪心存活时间平均为lld，最长达13d，病理学提示均发生了延迟性异种排斥反应；对照组3个移植心在移植后60min内发生超急性排斥反应，另2个分别存活22h及6d。结论 纯化的CVF有良好的清除补体的作用，且末见明显副作用；使用CVF可克服猪到狱猴异种心脏移植超急性排斥反应的发生。     

术前使用FTY720诱导小鼠对同种异体心脏移植物的耐受

目的　观察术前使用FTY72 0对小鼠同种异体心脏移植物存活时间的影响。方法　以小鼠颈部异位心脏移植为模型 ,供者为BALB/c小鼠 ,受者为C57BL/ 6小鼠。受鼠分为 4组 :A组为空白对照组 ;B组术前 3d至术后 1 1d每日管饲FTY72 0 ;C组手术当天至术后 1 4d每日管饲FTY72 0 ;D组仅在术前 3d至手术当天每日管饲FTY72 0。FTY72 0的剂量都为 3mg·kg- 1 ·d- 1 。结果　A组移植物中位存活时间 (MST)为 8d ;B组所有移植物存活时间均超过 2 7d ,有半数 (6/ 1 1 )移植物存活超过1 0 0d ;C组移植物存活时间显著延长 (MST =1 6d) ;D组移植物中位存活时间为 1 4d ,并有 1只超过1 0 0d。结论　术前使用FTY72 0可以延长同种异体心脏移植物的存活时间 ,诱导受者对同种异体心脏移植物的耐受     

CTLA4-Ig重组腺相关病毒载体的构建及转染表达效果

重组腺相关病毒 (recombinantadeno associatedvirus,rAAV)载体是目前基因治疗领域中倍受瞩目的载体之一。本研究通过构建CTLA4 Ig基因重组腺相关病毒载体 (rAAV CTLA4 Ig) ,研究其对大鼠转染的表达效果及规律。大肠杆菌Sure 2和 2 93细胞均由武汉同济医院心血管内科研究室提供 ;质粒pUF1 CTLA4 Ig、pXX2和pXX6由美国匹兹堡大学分子生物实验室XiaoX教授提供 ;近交系Lewis大鼠 ,2 0 0～ 2 5 0g,雄性 ,购自中国医学科学院实验动物研究所。仓鼠抗小鼠的CTLA4 Ig购自Pharm ingen公司 ,辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG购自Vec…     

单核细胞、NK细胞和T细胞在猪-猕猴延迟性异种移植排斥反应中的作用

目的观察单核细胞、NK细胞和T细胞在猪-猕猴延迟性异种移植排斥反应(DXR)中的作用。方法建立湖北白猪-云南猕猴的腹腔异位心脏移植模型，实验分为2组：对照组(n=5)，不使用中华眼睛蛇毒因(Y-CVF)；实验组(n=4)应用Y-CVF完全清除受者体内补体。2组受体猴均采用环孢素A(CsA)，环磷酰胺(CTX)和甲基强的松龙(MP)三联免疫抑制治疗。免疫组织化学方法检测移植心组织中细胞间黏附分子(ICAM)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α、单核细胞、NK细胞和T细胞的表达。结果对照组3个移植心在15～60min内发生超急性排斥反应(HAR)，另2个分别存活22h及6d，移植心均未见明显的炎性细胞浸润及ICAM-1和TNF-α的表达。实验组移植心存活时间分别为8、10、13和13d，移植物浸润细胞中可见大量的单核细胞(50％)，少量的NK细胞(8％～10％)，CD4^ T细胞(15％)和C08^ T细胞(25％)。移植物血管内皮细胞表面出现ICAM-1的表达上调，移植物间质中出现TNF-α的表达增加。结论单核细胞、NK细胞和T细胞介导的移植物损伤，在应用Y-CVF处理的猪-猕猴DXR发生中发挥重要作用。     

猪-猕猴延迟性异种移植排斥反应的发生机制

目的：探讨猪．猕猴延迟性异种移植排斥反应(DXR)的发生机制。方法：建立湖北白猪-云南猕猴的腹腔异位心脏移植模型，应用中华眼镜蛇毒因子(Y-CVF)完全清除受者体内补体，并应用环孢素A(CsA)、环磷酰胺(CTX)和甲泼尼龙(M．P)三联免疫抑制治疗。检测血清C3、C4、抗猪内皮细胞天然抗体，免疫组化方法染色检测移植物中C3、C5b-9、IgG、IgM、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核巨噬细胞(CD68)、NK细胞(CD57)、CIM T细胞和CD8 T细胞的表达。结果：移植心存活时间分别为8、10、13和13天，血清C3和补体总活性均下降为0，抗猪内皮细胞天然抗体水平在移植后则有一个更为明显的下降，在移植心失功前2～4天开始天然抗体稍有回升，但较术前正常时仍明显偏低。移植心有程度不等的C3、C4、C5b-9、IgG及IgM沉积，大量的单核细胞(50％)，少量的NK细胞(8％～10％)、CD4 T细胞(15％)和CD8 T细胞(25％)。移植物血管内皮细胞表面出现ICAM-1的表达上调，移植物间质中出现TNF-α的表达增加。结论：体液免疫和细胞免疫参与猪-猕猴DXR排斥反应的发生。     

建立猪心脏移植至猕猴腹腔内的异位心脏移植模型

目的 评价改进后的猪心脏移植至猕猴腹腔内的异位心脏移植模型的效果。方法 建立21例猪心脏移植至猕猴腹腔内的异位心脏移植模型，其中采用传统手术方法11例，改进方法10例。改进方法为缩短供心缺血时间，调整了手术顺序，先游离受者供吻合的腹主动脉及下腔静脉段后，再行供心切取，并且改进了切取供心的方法。比较2种手术方法的热缺血时间、移植心功能恢复情况及术后并发症。结果 采用传统手术方法时，移植心准备时间为20～30min，热缺血时间为3～5min，总缺血时间为80～90min，再灌注后均未恢复正常的全心搏动，仅见右心收缩，移植后发生并发症较多（包括出血、吻合口血栓形成、肠道并发症及静脉回流不畅等）。改进手术方法后，移植心准备时间为5～10min，热缺血时间〈1min，总缺血时间为35～40min，再灌注后有6例恢复全心搏动，发生并发症较少。结论 改进后的猪心脏移植到猕猴腹腔内的异位心脏移植模型，其手术方法明显优于传统方法。     

早期肠内营养在减轻急性胰腺炎急性期反应及改善疾病转归中的作用

目的 探讨早期肠内营养在减轻急性胰腺炎急性炎症反应和改善疾病转归中的作用。方法 检测62例急性胰腺炎患者的APACHEⅡ积分，C反应蛋白，血清内毒素及CT积分，按严重程度分类并随机接受肠外或肠内营养7d后再检测上述指标。结果 肠内营养组全身炎症反应综合征（SIRS），脓毒血症，器官功能不全发生率及重症监护时间明显降低，急性炎症反应性指标C反应蛋白及疾病严重程度积分指标APACHEⅡ明显改善，肠外营养组上述指标未见改变；并有内毒素升高，肠内营养组内毒素无变化。结论 早期肠内营养可缓和急性胰腺炎患者的急性期反应，改善 疾病转归和预后，调节胰腺炎症和脓毒性反应，对临床有利。