穿心莲内酯衍生物炎琥宁对大鼠体内白念珠菌生物膜的影响

目的:探讨穿心莲内酯(AG)衍生物炎琥宁(YHN)对大鼠体内白念珠菌生物膜的影响。方法:构建白念珠菌生物膜大鼠皮下导管模型,采用YHN(40,20,10,5,2.5 mg·kg-1)腹腔注射治疗,设氟康唑(FLC)阳性对照组(80 mg·kg-1),7d后计数导管的菌落形成单位(CFU),XTT代谢法评估YHN对体外白念珠菌生物膜的影响;扫描电镜(SEM)观察YHN干预大鼠体内生物膜的形态变化;采用实时荧光定量PCR法检测白念珠菌黏附相关基因ALS1,ALS3,HWP1,EAP1和MP65的表达量。结果:YHN组导管片上CFU明显少于空白组;XTT代谢活性也显示YHN组低于空白组,且呈剂量依赖性;扫描电镜照片显示YHN能显著减少白念珠菌对大鼠体内导管的黏附;qRT-PCR结果显示,YHN可下调ALS1,ALS3,HWP1,EAP1和MP65的表达量。结论:YHN能抑制大鼠体内白念珠菌生物膜。     

鱼腥草素钠增强亚胺培南抗铜绿假单胞菌生物被膜的作用

目的：研究鱼腥草素钠联合亚胺培南增强抗铜绿假单胞菌生物被膜的作用。方法：2倍稀释法测定被试药物最小抑菌浓度（MIC）,结晶紫染色法检测1/2MIC,1MIC,2MIC 的鱼腥草素钠（SH）、亚胺培南（IMP）单药组和1/2MIC的SH与IMP各药物浓度联合组对黏附菌的清除量、生物被膜生长量、藻酸盐产生量的影响。FDA-PI荧光素双染法荧光显微镜下观察各药物组膜分散后死活细菌、生物被膜形态。结果：鱼腥草素钠能增强亚胺培南抗绿假单胞菌生物被膜的作用,尤以2MIC药物浓度联合组作用最强（与阴性对照组比较P<0.001）。荧光显微镜下观察死活细菌、生物被膜形态支持了上述结果。结论：鱼腥草素钠联合亚胺培南能增强抗生物被膜作用,预期两药联合会提高相关感染的临床疗效。     

病原微生物检测技术进展

病原微生物种类繁多,变异迅速,快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展前进着。目前,应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因芯片、多聚酶链反应等,该文对这些检测技术进展做一综述。     

复方百肤青对大鼠细菌性阴道病生物膜产生和治愈后复发率的影响

目的：以细菌生物膜（bacterial biofilm ，BF）致病菌造大鼠细菌性阴道病模型，用复方百肤青治疗，观察细菌生物膜的产生以及治愈后复发率，探讨中药体内的抗生物膜作用，为预防细菌性阴道病（bacterial vaginosis，BV）的复发，解决BV复发率高的问题提供依据。方法：用从BV患者阴道分泌物分离得到的加特纳氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄珠菌制成混合菌液，经体外培养证实能产生BF。用混合菌液造大鼠细菌性阴道病模型经不同浓度百肤青治疗，观察生物膜的形成及治愈后复发率。结果：最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）浓度的百肤青能控制BF的形成和BV的复发。结论：中药复方百肤青由于其有抗BF的作用，不仅可用于治疗BV，还有预防BV复发的作用。     

抗霉菌性阴道炎中药复方的体外抗菌实验研究

霉菌性阴道炎是常见的妇科病之一，大约80％～90％的霉菌性阴道炎是由白色念珠菌感染引起的：10％～20％为其他念珠菌及球拟酵母属感染。霉菌性阴道炎是常见的妇科病之一，大约80％～90％的霉菌性阴道炎是由白色念珠苗感染引起的；10％～20％为其他念珠菌及球拟酵母属感染。     

鱼腥草素钠诱导临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡

目的 观察鱼腥草素钠对临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡的影响。方法 利用DAPI染色观察耐药白假丝酵母菌生物膜细胞核的形态;利用FITC-VAD-FMK染色观察耐药白假丝酵母菌生物膜细胞metacaspase活性;分别在JC-1染色和DCFH-DA染色下,采用流式细胞仪检测耐药白假丝酵母菌生物膜细胞内线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;利用Annexin Ⅴ-FITC/PI染色和流式细胞仪检测耐药白假丝酵母菌生物膜细胞的凋亡率。结果 一定浓度的鱼腥草素钠作用下,临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞内ROS水平、生物膜细胞凋亡率、metacaspase酶活性明显升高,MMP水平明显降低,生物膜细胞核出现碎裂和皱缩。结论 鱼腥草素钠能够诱导耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡。     

白头翁汤正丁醇提取物对酸性条件下白念珠菌pH突变株黏附的影响

目的 基于pH信号通路探讨白头翁汤正丁醇提取物（butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB）对白念珠菌黏附的影响。方法 Spot assay检测酸性条件下pH突变株的活性;XTT法检测酸性条件下pH突变株黏附时的代谢活力;荧光显微镜观察酸性条件下pH突变株细胞黏附活力;正辛烷容纳法测定酸性条件下pH突变株疏水性;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测酸性条件下pH突变株黏附相关基因的表达。结果 512 μg/mL BAEB对共培养24、48 h的pH突变株的活性影响不大;phr2/phr2在酸性条件下代谢活性低,512 μg/mL BAEB可明显抑制白念珠菌野生株（WT）、PHR2回补菌株、rim101/rim101、RIM101回补菌株的代谢活性,对phr2/phr2代谢活性影响不大;512 μg/mL BAEB可明显抑制WT、PHR2回补菌株、rim101/rim101、RIM101回补菌株的细胞黏附活力,phr2/phr2加药前后细胞黏附活性无明显变化;512 μg/mL BAEB对WT、phr2/phr2、PHR2回补、rim101/rim101及RIM101回补菌株的细胞表面疏水性影响不明显;qRT-PCR法检测512 μg/mL BAEB对pH突变株在酸性条件下黏附相关基因作用不明显,但1 024 μg/mL BAEB则对大多数黏附相关基因有明显抑制作用。结论 BAEB在酸性条件下能一定程度抑制白念珠菌的黏附。     

尿路清对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的 :观察尿路清对小鼠免疫功能的影响。方法 :参照PFC法 ,MTT法 ,观察对小鼠溶血空斑实验、淋巴细胞转化试验及血清免疫球蛋白的影响。结果 :尿路清高、中、低剂量组及三金片组空斑数明显增高 ,与模型组比较有非常显著性差异 (P <0 0 1) ,优于三金片组。尿路清高、中剂量组能够明显提高淋巴细胞的增殖能力 (P <0 0 1) ,与三金片组比较无差异性。尿路清能够显著提高IgG、IgA含量 (P <0 0 1) ,对IgM无明显影响 ,与三金片组比较无差异性。结论 :尿路清有提高免疫功能的作用。     

云南重楼正丁醇提取物对白念珠菌生物膜形成的抑制作用

目的观察云南重楼正丁醇提取物(BEPP)对体外白念珠菌生物膜形成的影响。方法微量稀释法测定BEPP最低抑菌浓度(MIC),XTT法测定生物膜抑制80%浓度(SMIC80),平板法绘制时间-杀菌曲线,扫描电镜(SEM)观察生物膜形态结构,激光共聚焦显微镜(CLSM)观测生物膜厚度,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测生物膜形成相关基因HWP1、MP65、SUN41表达量的变化。结果 BEPP对白念珠菌的MIC为32~128μg/m L,对白念珠菌生物膜的SMIC80为128~512μg/m L,时间-杀菌曲线显示BEPP具有良好的杀菌作用,SEM观察到BEPP有效抑制白念珠菌生物膜形成,CLSM显示BEPP可以降低生物膜厚度,q RT-PCR检测显示在BEPP作用下,HWP1、MP65、SUN41基因表达量均显著下调。结论 BEPP可以有效抑制体外白念珠菌生物膜的形成。     

白头翁汤正丁醇提取物通过激活BMP信号通路治疗溃疡性结肠炎的作用机制研究

该研究旨在探讨白头翁汤正丁醇提取物(n-butanol extract of Pulsatilla Decoction, BEPD)通过激活骨形态发生蛋白(BMP)信号通路发挥对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)的治疗作用。C57BL/6小鼠分为6组：对照组、模型组、美沙拉嗪组及BEPD低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组小鼠连续7 d自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)建立UC模型,然后进行不同浓度的BEPD和美沙拉嗪灌胃治疗。记录各组小鼠体质量和疾病活动指数(disease activity index, DAI)。处死小鼠后,取结肠组织进行组织学分析,采用阿利新蓝/过碘酸雪夫(AB/PAS)染色法检测杯状细胞的数量及黏液分泌状况,免疫组化法检测结肠组织中增殖标志物ki67、活化半胱天冬酶3(cleaved caspase-3)、粘蛋白2(mucin 2,Muc2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达,免疫荧光法检测结肠组织中紧密连接蛋白的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、...