小檗碱苦参碱抗外阴阴道念珠菌病混合菌生物被膜形成作用研究

目的研究中药有效成分小檗碱、苦参碱抗外阴阴道念珠菌病混合菌生物被膜形成的作用。方法体外建立白念珠菌、铜绿假单胞菌混合菌的生物被膜,采用四唑鎓盐(tetrazolium salt,XTT)减低法及形态学方法观察白念珠菌混合菌生物被膜的形成过程;采用形态学观察、活菌计数法评价小檗碱、苦参碱对白念珠菌混合菌生物被膜的最小抑制浓度。结果白念珠菌混合菌培养48h形成成熟的生物被膜;125mg/L小檗碱能抑制白念珠菌混合菌生物被膜的形成。500mg/L苦参碱未见有抑制白念珠菌混合菌生物被膜形成的作用。结论小檗碱具有抗生物被膜形成的作用,可用于预防外阴阴道念珠菌病。     

中医院校医学免疫学课堂教学的思考与实践

医学免疫学是中医院校一门重要的医学基础课，但其内容抽象，不易为学生掌握。在课时压缩的情况下，如何利用有限时间让学生乐于学习并学有所成，是授课老师课堂教学一项艰巨而又重要的使命。作者结合自身教学经验和授课感悟，从提前教学准备、勾勒课程轮廓、把握讲授深浅和基础联系临床等方面交流了一些体会和思考，旨在调动学生积极性，提高教学质量。     

清淋冲剂体外及小鼠体内抗菌作用的研究

目的研究清淋冲剂体外及小鼠体内抗菌作用。方法采用琼脂稀释法测定清淋冲剂最小抑菌浓度,通过小鼠体内抗菌试验了解对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌感染小鼠体内的保护作用,计算ED50。结果抗菌试验显示:清淋冲剂在体外有明显的抑菌作用和对感染小鼠的保护作用。结论清淋冲剂在体内外均有明显的抗菌作用,因此在急性尿路感染治疗中将会取得良好的疗效。     

白头翁汤正丁醇提取物对热带念珠菌毒力因子的影响

目的:探讨白头翁汤正丁醇提取物butyl alcohol extract of Baitouweng decoction,BAEB对热带念珠菌(Candida tropicalis)毒力因子细胞表面疏水性、菌丝及生物膜形成的影响。 方法:采用微量稀释法测定BAEB对热带念珠菌的最低抑菌浓度(MIC);XTT还原法测定BAEB对热带念珠菌生物膜抑制作用(SMIC₈₀),Time-Kill法检测BAEB对热带念珠菌活菌数的动态影响;水-烃两相法测定BAEB对热带念珠菌细胞表面疏水性(cell surface hydrophobicity,CSH)的影响;荧光显微镜观察BAEB对热带念珠菌菌丝形态的影响;扫描电镜观察BAEB对热带念珠菌生物膜形态的影响;激光共聚焦显微镜检测BAEB对热带念珠菌生物膜荧光信号强度的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测菌丝及生物膜相关基因UME6,NRG1,ALST3的表达量变化。 结果:BAEB对9株热带念珠菌的MIC在64~128 mg·L^-1,对热带念珠菌生物膜的SMIC₈₀为256~512 mg·L^-1,FLZ对热带念珠菌的MIC在1~1 024 mg·L^-1,SMIC₈₀为1 024 mg·L^-1或以上,Time-Kill曲线显示256,512 mg·L^-1BAEB具有明显的杀菌作用,CSH实验显示128,256,512 mg·L^-1BAEB均能够降低其表面疏水性,SEM观察到512 mg·L^-1BAEB能够有效抑制热带念珠菌在硅胶导尿管上生物膜完整度,CLSM显示256,512 mg·L^-1BAEB可以明显降低生物膜荧光信号强度,qRT-PCR检测显示在256,512 mg·L^-1BAEB作用下,ALST3,UME6基因表达量显著下调,NRG1无明显变化。 结论:BAEB可以抑制热带念珠菌细胞表面疏水性、菌丝及生物膜形成等毒力因子。     

鱼腥草素钠抑制铜绿假单胞菌致病相关运动能力的研究

鱼腥草素钠(sodium houttuyfonate,SH)是一种有效抑制致病菌感染的传统中药鱼腥草的活性成分的衍生物,但其抑菌机制尚没有被阐明.本研究通过铜绿假单胞菌运动能力试验发现,SH可在有效抑制与细菌致病性相关的浮泳运动、蹭行运动和集群运动能力.平板分析法实验结果表明24 h内SH对浮泳运动、蹭行运动和48 h内SH对集群运动的抑制趋势呈现显著的浓度依赖性特点;并且在1倍SH最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC) (512 mg·L-1)条件下,细菌的运动能力和阳性对照阿奇霉素(1倍MIC 16mg·L-1)一样基本丧失.进一步,基因表达分析发现SH显著抑制铜绿假单胞菌的鞭毛和菌毛结构基因flgB和pilG的表达,提示SH抑制细菌运动能力的可能机制是通过抑制细菌运动相关的特殊结构鞭毛和菌毛的合成而产生.因此,该研究结果首次证明SH可有效抑制细菌的运动能力,并探讨了抑制机制,为该药物在临床上治疗条件性致病菌铜绿假单胞菌提供理论依据.     

黄连解毒汤醋酸乙酯提取物对白色念珠菌毒力因子的作用

目的 探讨黄连解毒汤醋酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Huanglianjiedu Decoction,EAHJD)对白色念珠菌毒力因子的作用.方法 分别采用卵黄培养基法检测磷脂酶(PL)活力、牛奶平板法检测天冬氨酸蛋白酶(Sap)活力、橄榄油乳化法检测脂肪酶(Lip)活力;水-烃两项测定实验检测细胞表面疏水性(CSH);RT-PCR法检测毒力因子相关基因的表达.结果 EAHJD对PL的活力无影响;1 250 μg/mL EAHJD可显著抑制Sap与Lip的活力,312 μg/mL EAHJD效果次之;EAHJD对CSH呈现剂量依赖性抑制,CSH1分别下调了7.69、3.57、2.95倍;分泌型酶相关基因在EAHJD作用下呈现不同倍数的变化,其中PLC1、Sap2、Sap3、Sap9、Lip3、Lip4、Lip6下调,PLB1、PLC2、Sap10、Lip5无明显变化.结论 EAHJD可抑制白色念珠菌毒力因子的活力.     

黄连解毒汤乙酸乙酯提取物抑制白念珠菌菌丝的形成

目的:探讨黄连解毒汤乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Huanglian Jiedu decoction, EAHD)对白念珠菌菌丝形成的影响。 方法:以0, 78, 312, 1 250 mg·LEAHD干预白念珠菌6 h, 采用倒置显微镜、荧光显微镜及扫描电镜分别观察白念珠菌菌丝形态;固体培养基上观测菌落形态;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测白念珠菌菌丝形成相关基因HWP1, ALS3, UME6, SUN41, CSH1, CaPDE2的表达量。 结果:312, 1 250 mg·LEAHD可显著抑制白念珠菌菌丝的形成及菌落的形态;qRT-PCR检测显示1 250 mg·LEAHD使HWP1, ALS3, UME6, CSH1表达分别下调4.13, 3.64, 2.46, 2.75倍, SUN41表达上调7.26倍, CaPDE2表达无变化。 结论:EAHD可能通过抑制HWP1, ALS3, UME6, CSH1等相关基因的表达来抑制白念珠菌菌丝的形成。