新一代多克隆抗体抑制异种细胞免疫反应的研究

目的 研究新一代兔抗人免疫细胞多克隆抗体(newRALG)对异种细胞免疫反应的抑制作用.方法 应用活化的淋巴细胞和单核细胞致敏新西兰兔后获得newRALG.将PKH-26标记的猪血管内皮细胞(PEC)和正常人单个核细胞(PBMC)建立混合培养体系,培养液中分别加入newRALG、正常兔IgG、Thymoglobulin和Scavenger受体(SR)阻断剂Poly G,培养后收集PBMC,然后分别加入异硫氰基荧光素(FITC)标记的鼠抗人CD14、CD40、CD80、CD86和HLA-DR单克隆抗体.通过流式细胞术检测单核细胞对PEC膜的吞噬作用;通过淋巴细胞与PEC的混合培养体系,加入newRALG,以观察淋巴细胞的增殖反应和newRALG对增殖反应的阻断作用.结果 PBMC与PKH-26标记的PEC共培养后,PBMC中的CD86+单核细胞表达PKH-26,进一步研究发现PKH-26阳性的CD86+单核细胞不但表达CD14、CD86和HLA-DR,同时上调共刺激分子CD40和CD80的表达水平.正常兔IgG(作为阴性对照)对单核细胞吞噬PEC膜无阻断作用,Thymoglobulin具有较低的阻断效果,newRALG与Poly G相似,均具有较高的阻断作用.正常未经刺激的人淋巴细胞不具备增殖能力,经灭活的PEC刺激后,人淋巴细胞具有高水平的免疫增殖反应.正常兔IgG不能阻断PEC对人淋巴细胞的免疫增殖反应;Thymoglobulin的抑制作用随浓度的降低而增强;高浓度的newRALG不能抑制人淋巴细胞的免疫增殖反应,但低浓度的newRALG则显示出强大地抑制人淋巴细胞免疫增殖反应的作用.结论 单核细胞在异种免疫反应过程中发挥重要作用;newRALG可有效抑制单核细胞的吞噬功能和淋巴细胞的免疫增殖反应,从而有效的抑制异种移植排斥反应.     

DEC1和STAT3在胃癌组织中的表达及意义

目的:探讨DECl和S1-AT3在胃癌组织中的表达及其在胃癌发病机制中的作用.方法:利用免疫组织匕学方法检测59例胃癌组织中DEC1、STAr3 2种蛋白的表达情况,以19例癌旁正常组织作为对照.结果:DECl蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为71.2%,高于癌旁正常组织的阳性表达率(26.3%.P<0.05).胃癌组织中的DECl表达与STAT3表达呈正相关,与肿瘤的分化程度有关,但与患者性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、浸润深度、有无淋巴结转移及远处转移无关;STAT3蛋白的表达与肿瘤的TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小及远处转移无关.结论:DEC1蛋白在胃癌组织中高表达,且与STAT3蛋白的表达相关.DECl和STAT3均为转录调节因子,二者的相互调节很可能在胃癌的发生发展中具有重要作用.     

结核感染T淋巴细胞斑点试验筛查活动性肺结核病人密切接触者结果分析

[目的]探讨利用结核感染T淋巴细胞斑点试验(T-SPOT.TB试验)对学生中的潜伏结核感染者进行筛查的效果及其影响因素,为学校结核病预防和控制提供新的依据.[方法]2008年在山东某学院对1名患有活动性肺结核学生的同年级学生进行T-SPOT.TB试验、胸透和临床症状评估和流行病学调查.[结果]调查对899名学生进行胸透...     

分化型胚胎软骨发育基因1特异性小干扰RNA表达质粒的构建和鉴定

背景:分化型胚胎软骨基因1 可调控肿瘤生长、凋亡、衰老相关因子,与肿瘤的发生发展有着重要的联系.目的:构建针对人分化型胚胎软骨基因1 的小干扰RNA 表达载体.方法:从NCBI 中查找人分化型胚胎软骨基因1 基因全长mRNA 序列,利用Katahdin 提供的在线小干扰 RNA 模板序列设计软件,设计针对分化型胚胎软骨基因1 的2 条shRNA 的 DNA 模板单链,合成靶向分化型胚胎软骨基因1 基因转录可形成茎环结构的寡聚核苷酸,退火后与酶切后的pGreenPuro.shRNA Cloning and Expression Lentivector 质粒连接,在JM-109 菌株中扩增,并进行质粒DNA 琼脂糖凝胶电泳分析、紫外分光光度计检测、菌落PCR 以及测序鉴定.结果与结论:将含有分化型胚胎软骨基因1 目标序列25 bp 的双链 DNA 插入片段,连接到pGreenPuro.shRNA Cloning and Expression Lentivector 质粒形成重组质粒.质粒DNA 琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计分析结果确认所提质粒纯度较高,可用于后续实验.菌落PCR 结果表明产物大小约为170 bp,与预期相符.测序结果表明pGreenPuro.shRNA Cloning and Expression Lentivector 质粒已经插入人分化型胚胎软骨基因1 的干扰合成片段,无碱基突变.成功构建了靶向分化型胚胎软骨基因1-小干扰 RNA 表达载体.     

妊高征孕妇血清中钙镁铜锌含量的测定

1.对象及方法:30例均为符合1983年制定的妊高征临床诊断标准的待产孕妇。其中轻度16例,中度14例;年龄小于30岁。以20例入院待产的正常孕妇作对照。入院后均采外周血3ml,并分离血清。用原子吸收分光光度法测定钙(Ca)、镁(Mg)、铜(Cu)、锌(Zn)含量。 2.结果:见附表。     

前列腺癌的化学预防

前列腺癌的化学预防是一种相对全新的概念。本文就食物干预或药物治疗与前列腺癌预防关系的研究现状作一扼要介绍。     

AFP基因SiRNA表达质粒的构建及鉴定

目的：构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因siRNA表达质粒，为进一步研究AFP基因功能奠定基础。方法：选择RNA干涉靶序列，体外合成两段互补的寡核苷酸，通过与线性化的pSilencer3．0-H1连接、转化大肠杆菌，扩增、纯化得到所需质粒，通过琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列。结果：纯化的质粒的分子量为2．8Kb，插入的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符。结论：成功构建了针对AFP基因的siRNAs表达质粒。     

胃癌与红细胞Lewis表型的相关性研究

目的:探讨人类红细胞Lewis表型的不同是否与胃癌的发生有关。方法:应用微柱凝胶技术对63例胃癌患者及120名健康供血者的血液标本进行Lewis表型检测,比较分析两组人群红细胞Lewis表型的表达频率。结果:胃癌患者红细胞kwis(a-b+)表型频率明显高于健康对照组(79.4%VS 61.7%,P<0.05)。而其Lewis(a+b-)表型频率明显低于健康对照组(9.5%VS 22.5%,P<0.05)。结论:Lewis(a-b+)表型可能是胃癌易发的一个危险因素。     

手术对晚期卵巢癌患者血清DNA抗体的影响

手术对晚期卵巢癌患者血清ＤＮＡ抗体的影响董建春，王鸿云，李家福，孙树三（山东医科大学附属医院）汪运山，马艳秋，刘宗印（济南市中心医院）１９９２年３月至１９９４年４月，我们用ＥＬＩＳＡ法对１８例晚期卵巢癌患者于手术前后分别测定了血清双股ＤＮＡ抗体（Ｉｇ...     

幽门螺杆菌感染胃黏膜上皮细胞对CD44v6表达的影响

目的评估螺杆状幽门螺杆菌（Hp）及其球形体感染胃黏膜上皮细胞对CD44v6表达的影响。方法幽门螺杆菌及其球形体与胃黏膜上皮细胞共生培养，免疫组化、RT-PCR检测CD44v6蛋白表达。结果免疫组化及RT-PCR检测，螺杆状Hp及其球形体感染人胃黏膜上皮细胞GES1，诱导CD44v6的表达与上调，且螺杆状Hp与球形体诱导CD44v6存在差异有统计学意义（P〈0．05）。结论螺杆状Hp及其球形体感染导致胃黏膜CD44v6表达增加，提示CD44v6在Hp相关性胃炎、胃癌的发生过程中起作用，Hp球形体在Hp治疗复发的流行病学具有重要的意义。