胃癌患者腹腔游离癌细胞的检测及其临床意义

腹腔播散是进展期胃癌常见的转移方式,由于目前尚没有标准的检测胃癌腹腔微转移的方法,故大部分腹腔微转移的胃癌患者难以得到临床诊断。应用腹腔灌洗细胞学(PLC)检测腹腔游离癌细胞(IFCCs)的结果与腹腔镜检查结果相似,但是腹腔镜结合PLC可增加检查的敏感性。应用免疫组化和酶联免疫吸附试验可检测腹腔灌洗液(PLF)中IFCCs肿瘤标志,IFCCs预测胃癌复发的阳性预报值为91%,特异性为97%。应用免疫组化检测IFCCs是一个有效的、独立的预测胃癌生存期的阴性指标。应用酶联免疫吸附试验检测PLF中CEA水平是预测腹腔播散的指标,其诊断腹腔微转移的敏感性和特异性分别是75.8%和90.8%。应用PLF进行分子诊断的敏感性优于PLC、免疫组化和酶联免疫吸附试验。逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)是一种新的诊断腹腔灌洗液中IFCCs的方法,基于靶基因的RTPCR方法可用于检测腹腔微转移的肿瘤分子标志。在IFCCs中表达的这些分子标志还可用于腹腔微转移治疗。存在IFCCs的胃癌患者的预后很差,无论应用哪种方法预测腹腔微转移都是困难的,但术前均应进行IFCCs检查,以明确诊断和指导治疗。     

血浆置换术治疗巨球蛋白血症1例

l998～2001年．我院应用血浆置换术(TPE)治疗巨球蛋白血症1例,取得良好效果。现报告如下。     

支气管哮喘患者血清巨噬细胞炎症蛋白1α的变化

巨噬细胞炎症蛋白 1α(ＭＩＰ 1α)是支气管哮喘气道炎症过程中嗜酸细胞 (ＥＯＳ)、肥大细胞及肺泡巨噬细胞等释放的一种化学介质 ,为 6 9个氨基酸组成的多肽 ,属趋化性细胞因子。有研究表明 ,哮喘患者支气管肺泡灌洗液中及儿童哮喘患者的鼻吸出物中ＭＩＰ 1α浓度明显增加[1,2 ] 。为此 ,我们观察了哮喘患者血清ＭＩＰ 1α的变化及与外周血ＥＯＳ计数、气流阻塞的关系。对象与方法　哮喘发作组 42例 ,男 2 1例 ,女 2 1例 ,年龄16～ 6 7岁 ,平均年龄 (4 0± 12 )岁 ,为 2 0 0 1年 1月～ 4月本院门、急诊哮喘患者。诊断均符合中华医学会呼吸…     

胃癌组织转录调节因子DEC1表达及其临床意义的研究

目的:探讨转录调节因子DEC1在人胃癌组织中的表达以及临床意义.方法:应用RT-PCR和蛋白质印迹法技术检测多种胃癌细胞株中DEC1的表达.运用免疫组化技术检测52例胃癌组织及10例癌旁胃黏膜组织中DEC1的表达.结果:在正常的胃黏膜上皮细胞株GES1及多种胃癌细胞株中均能检测到DEC1 mRNA的表达,但胃癌细胞株中(MKN28、SGC 7901、MGC 803和HGC27)的表达显著高于胃黏膜上皮细胞株GES1.蛋白质印迹法显示DEC1在蛋白水平的结果与前一致.DEC1在胃癌组织、癌旁胃黏膜组织中表达阳性率分别为55.77%、10.00%,DEC1蛋白的表达水平与胃癌的分化程度相关,P<0.05.与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤类型、TNM分期和有无淋巴结转移均无关,P>0.05.结论:DEC1在各种类型的人胃癌细胞和胃癌组织中都有较高的表达,可能在胃癌的发生、发展中起重要的作用.     

自身免疫病患者血清中传染性非典型肺炎冠状病毒抗体阳性原因分析

目的 探讨传染性非典型肺炎又称严重急性呼吸综合征(SARS),冠状病毒(SARS-CoV)抗体在SARS病原学诊断中的特异性及其在系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、干燥综合征(SS)和混合结缔组织病(MCTD)患者中的假阳性问题。方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量RT-PCR技术检测了111名正常对照和58例SLE、20例RA、10例SS、16例MCTD患者做血清中SARS-CoV抗体的检测。结果 在111名正常对照中,IgM抗体均阴性,IgG抗体的阳性率为3.6％;IgG抗体诊断SARS的特异性为96.4％,两种抗体同时阳性诊断SARS的特异性为100％。58例SLE患者中,IgM抗体和IgG抗体阳性率分别为8.6％和32.8％,IgG抗体和IgM抗体同时阳性为19％;在10例SS患者中只有1例两种抗体同时阳性(10％);在16例MCTD患者中,IgG抗体阳性6例(37.5％),两种抗体同时阳性1例(6.3％);在20例RA患者中只有1例IgG抗体阳性(5％)。经RT-PCR检测,上述自身免疫病患者中的阳性病例血清SARS-CoV抗体均为阴性。结论用非纯化抗原制备的ELISA试剂盒测定自身免疫病患者的SARS-CoV抗体,可能出现假阳性,两种抗体同时测定可降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。在自身免疫病患者中出现假阳性的原因可能与包被的抗原有关。     

蛋白芯片法检测CA125在卵巢癌筛查和诊断中的价值

蛋白芯片是检测肿瘤标志物的一种新技术 ,为验证该技术在卵巢癌筛查和诊断中的价值 ,我们对 4 6例健康女性和 2 6例卵巢癌患者血清中的 CA12 5水平进行了测定 ,结果报告如下。1　对象和方法1.1　对象　从我院健康查体中心档案中随机选女性健康查体者 4 6例作为分析对象。2 6例上皮性卵巢癌患者均手术切除。均按同一标准取 2 ml空腹静脉血备测 ,卵巢癌患者血清标本于手术前获取。1.2　试剂及仪器　蛋白芯片法检测 CA12 5的试剂及 HD-2 0 0 1A型生物芯片检测仪均由上海数康有限公司提供。1.3　测方法学　蛋白芯片法的检测步骤 :将各待测血…     

DEC1基因真核表达质粒的构建及对胃癌细胞增殖的影响

目的构建人分化型胚胎软骨发育基因DEC1真核表达载体,探讨DEC1基因对胃癌细胞增殖的影响。方法提取人胃癌细胞MGC-803总RNA,RT-PCR扩增获得DEC1基因,将DEC1基因插入pGEM-T载体,再插入真核表达质粒pcDNA3,将成功构建的pcDNA3-DEC1载体介导转染MGC-803细胞。通过RT-PCR和Westernblot分别检测转染后细胞DEC1在mRNA和蛋白水平的表达;MTT法、免疫细胞化学法检测过表达DEC1基因后MGC-803细胞增殖的变化。结果转染pcDNA3-DEC1质粒的MGC-803细胞DEC1 mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05);MTT试验、ki-67免疫细胞化学染色显示转染后细胞增殖能力明显升高(P<0.05)。结论 DEC1的过表达能明显增强胃癌细胞MGC-803的增殖能力。     

RATG对CD4+细胞和CD8+细胞共刺激分子基因表达和细胞因子分泌的影响

目的 探讨兔抗人胸腺细胞多克隆抗体(RATG)在体外对CD4+细胞和CD8+细胞共刺激分子基因表达和细胞因子分泌的影响.方法 从正常成人外周血单个核细胞中分离和纯化CD4+细胞和CD8+细胞,加入RATG,37℃下培养.分别于24、48和72 h收集培养上清液和细胞,以不处理的细胞为正常对照,正常兔Ig处理的细胞作为阴性对照.采用实时聚合酶链反应技术检测培养细胞的细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)、CD154、Foxp3、OX40、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、IL-10和IL-2受体(CD25)的基因表达水平,应用Multiplex检测技术测定培养上清液中IFIN-γ、IL-2、IL_4和IL-10的水平.结果 与正常CD4+细胞比较,加入RATG的CD4+细胞培养24 h,其CTLA-4、CD154、Foxp3、OX40、IFN-γ、IL-2、IL-10和CD25基因转录表达均上调,阴性对照CD4+细胞则无这些基因转录表达的上调.处理48 h后,CD4+细胞的CD154和IL-2的基因转录表达呈现下调现象,而CTLA4、Foxp3、0X40、IFN-γ、IL-10和CD25的基因转录水平均较24 h时明显降低.处理72 h后,CD4+细胞的CTLA4、Foxp3、OX40和CD25的基因转录表达再次呈现高水平,CD154和IFN-γ的基因转录表达上调表达不明显,而IL-2和IL-10的基因转录表达则呈现明显的下调.RATG处理的CD4+细胞培养上清液中的IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10浓度显著增加,以处理24 h的水平最高,而阴性对照者未测出.与正常CD8+细胞相比较,加入RATG处理的CD8+细胞培养24 h,其CTLA4、Foxp3、OX40、IFN-γ,、IL-2、IL-10和CD25的基因转录表达呈现明显上调,而CD154基因转录表达稍有下调.RATG处理48 h,CD8+细胞的CTLA4、Foxp3、OX40、IFN-γ和CD25基因转录表达仍维持在高水平,CD154基因转录表达仅仅呈现低水平的上调,IL-10基因转录表达水平显著下降,而IL-2的基因转录表达则明显下调.处理72 h,CD8+细胞的CTLA4、Foxp3、OX40、IFN-γ、IL-10和CD25的基因转录表达仍维持在高水平,CD154基因转录表达则呈现下调,而IL-2基因转录表达的下调更为显著.阴性对照CD8+细胞则未呈现这些基因转录的上调现象.RATG处理的CD8+细胞培养上清液中IFN-γ、IL-2和IL-10显著增多,以处理24 h的浓度最高,IL-4浓度升高的幅度较小,而正常CD8+细胞和阴性对照CD8+细胞几乎检测不到IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10.结论 在体外,RATG可以刺激CD4+细胞和CD8+细胞上调多种促进免疫抑制的共刺激分子基因表达,促进其分泌与免疫调节相关的IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10.     

腹腔镜检查结合RT-PCR在胃癌诊疗中的临床意义

目的：探讨进展期胃癌术前腹腔镜检查与RT—PCR检测腹腔灌洗液中游离癌细胞CEAmRNA的表达水平,在胃癌患者术后微转移及预后的临床意义。方法：对22例进展期胃癌患者术前行腹腔镜探查,灭菌生理盐水冲洗腹腔4～5次,收集脱落细胞．进行细胞学检查和RT—PCR检测CEAmRNA表达水平。结果：22例胃癌患者中,细胞形态学捡测31．8％（7／22）阳性,RT—PCR捡测54．5％（12／22）CEAmRNA阳性表达,二者阳性率有显著性差异（P〈0．05）。结论：诊断性腹腔镜检查、RT—PCR与PLC有效结合,可提高腹腔转移复发诊断的灵敏性和特异性,有助于对胃癌分期、淋巴转移和预后的综合判断,对胃癌的辅助治疗提供依据。     

IL-1B基因-31位点基因多态性与胃癌的关系

目的研究白介素1B(interleukin-1B,IL-1B)基因启动子区-31位点基因多态性在正常人群和胃癌患者中的分布,分析IL-1B-31基因多态性分布是否与性别有关,探讨IL-1B-31基因多态性与胃癌发生的关系。方法收集101例胃癌患者和113名正常健康人外周血标本,提取DNA,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测IL-1B启动子区-31位点基因多态性(C→T)。结果IL-1B基因-31位点基因多态性在正常人群和胃癌患者中的分布无显著性差异,与性别无关,携带-31C等位基因可增加患胃癌的危险性。结论IL-1B-31位点基因多态性可能与胃癌的发生无关。