免疫球蛋白样物质在上皮来源的恶性肿瘤中的表达

目的：研究在上皮来源恶性肿瘤细胞中免疫球蛋白样物质的表达。方法：采用免疫组化SP法,分别用鼠抗人IgG、IgA和I gM单克隆体对乳腺癌、肝癌、肺癌、膀胱癌等多种上皮来源恶性肿瘤瘤组织及其部分传代细胞进行了检测。结果：在上述 癌组织及癌细胞中有不同程度的阳性反应,与抗人IgG、IgD、IgA和IgM抗体反应阳性率分别为50.0%、85.7%、61.9%和45.2%。其中乳腺癌阳性率为100.0％ 。结论 ：在上皮来源恶性肿瘤中存在免疫球蛋白样物质 的表达,其性质和机制有待于进一步研究。     

吸入伤犬部分液体通气后血一氧化氮、超氧化物歧化酶及丙二醛的含量变化

目的：观察吸入性损伤及部分液体通气后血清一氧化氮（NO）,超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的变化情况,探讨部分液体通气对吸入性损伤的治疗作用。方法：制作8条犬吸入性损伤模型,将氟碳（FC－77）缓慢注入肺内,实施部分液体通气,然后分别于致伤前,致伤后2h及部分液体通气治疗90min后抽血测NO,SOD及MDA。结果：致伤后NO,MDA值明显升高而SOD值却明显下降,与致伤前相比,有显性差异（P＜0．05）;随着部分液体通气的进行,NO,SOD基本回复到致伤前的水平,与致伤前相比,差异不大（P＞0．05）;而MDA回复则较慢,虽比致伤后显下降（P＜0．05）,但仍高于致伤前水平（P＜0．05）。结论：部分液体通气可以通过抗脂质过氧化作用和减少体内一氧化氮同组织损伤,因而对吸入性损伤有一定的治疗作用。     

多囊肾患者家系血清miRNA-15a和miRNA-17表达水平的比较

目的观察比较miRNA-15a和miRNA-17在多囊肾患者家系中的表达水平,探讨miRNA与多囊肾病发生发展的可能关系。方法采用实时定量PCR技术检测多囊肾患者及其家系成员与正常人血清中miRNA-15a和miRNA-17的表达水平。结果所检测的多囊肾患者家系中已出现肾功能损害的多囊肾患者血清miRNA-15a的表达水平明显高于正常人及肾功能正常的多囊肾患者;而miRNA-17在多囊肾患者家系未表达。结论多囊肾患者血清miRNA-15a表达水平与正常人不同,提示miRNA在多囊肾的发生发展过程中可能起重要调控作用,值得深入研究。     

无精症或严重少精症患者Y染色体微缺失的检测

目的探讨不育男性无精子症或严重少精子症与Y染色体微缺失之间的关系。方法利用多重PCR法检测无精子症或严重少精子症患者的Y染色体微缺失情况。结果52例无精子症或严重少精子症患者中共检出Y染色体微缺失4例,缺失率为7.69%。精液正常者（对照组）12例未发现Y染色体微缺失。4例Y染色体微缺失的无精子症患者睾丸细胞学检查均未发现精子。结论Y染色体微缺失是造成男性精子发生障碍的常见病因之一。     

小鼠肾缺血再灌注损伤后缺氧诱导因子的表达变化

目的 观察小鼠肾缺血再灌注损伤中缺氧诱导因子-1(HIF-1)在缺血再灌注后不同时间点的的表达变化.方法 采用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾带制备急性缺血/再灌注肾损伤模型,分为假手术对照组和缺血再灌注组,于缺血再灌注后4h、1d、3d分别处死.采用半定量RT-PCR法检测缺血再灌注后各时间点HIF-1 mRNA的表达变化....     

microRNA-1诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

目的研究microRNA-1(miRNA-1)能否诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化。方法构建大鼠miRNA-1表达载体,分离扩增培养及鉴定大鼠MSCs。脂质体法转染大鼠第4代MSCs,实时定量RT-PCR(qRT-PCR)检测转染miRNA-1质粒后MSCs的miRNA-1表达水平。分别于转染2、4和6 d后用RT-PCR检测心肌重要转录因子GATA4、NKx2.5和MEF2C的mRNA表达,免疫荧光检测心肌特异蛋白I(cTnI)的表达。结果 90%以上的MSCs表达MSCs重要标志物CD29、CD44;未检测到造血前体细胞标志抗原CD34、白细胞标志抗原CD45的表达。转染miRNA-1质粒后,miRNA-1表达水平明显上调。转染miRNA-1质粒2、4和6 d后,GATA4、NKx2.5和MEF2C的mRNA表达逐渐增强。第4和6天后可见cTnI阳性表达细胞。结论 miRNA-1能诱导大鼠MSCs向心肌样细胞分化。     

人诱导性多能干细胞定向分化为神经干细胞的实验研究

目的 观察人诱导性多能干细胞（iPS细胞）定向分化为神经干细胞（NSCs）的潜能。方法 用维甲酸（RA）诱导人iPS细胞向NSCs分化。倒置显微镜下观察iPS细胞的形态变化,RT-PCR检测NANOG, OCT4, SOX2的表达;免疫组织化学方法检测NESTIN、SOX2、β-TUBULIN Ш和GFAP的表达。结果RA诱导后第4天,贴壁的拟胚体出现了早期神经祖细胞特有的神经管样结构并不断增多,细胞表达神经巢蛋白NESTIN,而对照组未观察到神经管样结构。神经管样结构内的细胞能分化为β-TUBULIN Ш阳性的神经元,但GFAP阳性的星形胶质细胞少见。结论 人iPS细胞具有定向分化为NSCs的潜能,并能模拟神经发育过程。     

诱导性多能干细胞及其在脑血管病研究和治疗中的应用

诱导性多能干(induced pluripotent stem,iPS)细胞由已分化的体细胞重新编程而来,在生物学特性方面与胚胎干细胞极其相似.与胚胎干细胞相比,iPS细胞不受细胞来源、免疫排斥和伦理学等方面的限制,并具有保留特定个体基因等优势,为再生医学以及组织工程等领域提供了可能的细胞资源.文章主要介绍了iPS细胞及其在脑血管病研究和治疗中的应用.     

人诱导性多能干细胞向神经干细胞分化的方法探讨

目的:探讨人诱导性多能干细胞(iPS细胞)体外定向分化为神经干细胞(NSCs)的方法。方法:人iPS细胞悬浮培养4 d形成的拟胚体(EB)经维甲酸(RA)诱导4 d,诱导后的EB在无血清培养基中筛选并扩增培养。倒置显微镜下观察诱导后细胞的形态变化,RT-PCR检测iPS细胞多能性基因Nanog、Oct4和Sox2的表达,免疫荧光法检测NSCs特异性标志物Nestin、神经元标志物β-tubulinⅢ和神经胶质细胞标志物GFAP的表达。结果:(1)人iPS细胞在饲养层细胞上稳定传代,表达多能性基因Nanog、Oct4和Sox2,去除饲养层后悬浮培养能形成球形EB;(2)经RA诱导后的EB在无血清培养基中筛选培养第1 d贴壁生长,周围爬出细胞;第3 d,在高倍镜下可见中央聚集的细胞呈环形的rosette结构,rosette结构增多到第7 d达高峰。对照组未观察到rosette结构。随后大部分rosette细胞脱离瓶壁悬浮生长,形成神经球样克隆。免疫荧光显示神经球呈nestin阳性表达。贴壁培养的神经球能分化成β-tubulinШ和GFAP阳性细胞。结论:RA诱导结合无血清培养基筛选法能诱导iPS细胞高效分化为NSCs。     

稀土铈盐中和内毒素作用的初步探讨

内毒素是存在于革兰氏阴性杆菌胞壁中的脂多糖成分 ,是引起休克、脓毒症、成人呼吸窘迫症、多器官功能衰竭等疾病或病理过程的重要因素。如何防治内毒素性疾病 ,清除内毒素污染 ,一直是医学科学的重要任务。但迄今尚无一种能有效拮抗内毒素并广泛应用于临床的药物〔1〕。既往研究证实硝酸铈具有抑菌、中和烧伤“毒素”、调节细胞免疫功能的作用〔2 - 4〕。但其详细机制尚不清楚 ,本实验对硝酸铈可能具有结合内毒素作用进行了初步探讨。1　材料和方法1.1　试剂　硝酸铈 (分析纯 )。醋酸铈 ,江西省稀土研究所提供 ,硝酸钠 (分析纯 )。以上试剂…