The effect of cytoplasmic regions of LIF receptor on activating MAPK p42/44in HL-60 cell

Leukemiainhibitoryfactor(LIF),amemberofthemultifunctionalcytokinefamily,canmainlyinhibittheproliferationofleukemiacellsuchasHL-60,U937andM1[1].LIFrecognizestheLIFreceptoronthetar-getcellsurfaceandcombineswithitsαsubunit(Gp190),thentheproductunitesagainwithanothersubunitgp130formingheterodimer[2],thusleadingtothephosphorylationordephosphorylationoftheintra-cellularsignalingmolecularwhichcontrolsthespeedofDNAsynthesisandthecellproliferation.FurtherinvestigationshowedthattheLIFreceptorhad…     

睫状神经营养因子对颅脑伤大鼠下丘脑生长抑素mRNA及加压素表达的影响

目的：观察下丘脑生长抑素(SS)和精氨酸加压素(AVP)在睫状神经营养因子(CNTF)治疗颅脑伤时的变化。方法：建立颅脑伤模型并用CNTF进行治疗,采用SS原位杂交和AVP免疫组织化学双标法进行观察。结果：颅脑伤时,下丘脑室周核SS神经元数目减少,视上核SS与AVP共存的阳性神经元数目减少,经CNTF治疗均明显增多。结论：提示及时给予CNTF治疗颅脑伤,有利于神经元的恢复,进而促进SS与AVP的作用。     

小鼠肾间质纤维化早期上皮细胞-间充质细胞转型研究

目的:探讨小鼠肾间质纤维化早期是否存在肾小管上皮细胞间充质细胞转型的形态学变化.方法:利用单侧输尿管梗阻的方法建立小鼠肾间质纤维化模型,常规组织学分析小鼠肾脏病理变化,免疫组化检测a-SMA的表达,肾基底膜六胺银染色和透射电镜观察肾小管基底膜的变化情况,明胶酶谱分析观察肾脏中MMP2和MMP9的表达情况.结果:成功地建立了小鼠肾间质纤维化模型,并被组织学分析证实.免疫组化分析显示肾脏中出现了大量表达a-SMA的细胞,肾基底膜六胺银染色和透射电镜分析显示小鼠肾间质纤维化早期肾脏出现了肾小管基底膜局部断裂和肾小管上皮细胞迁出的改变,明胶酶谱分析显示小鼠肾脏中MMP2和MMP9于肾间质纤维化早期有一过性增高变化.结论:肾小管基底膜局部断裂,肾小管上皮细胞迁出以及MMP2和MMP9的表达变化参与了小鼠肾间质纤维化早期上皮细胞-间充质细胞转型的过程.     

白血病抑制因子受体与白血病细胞HL-60内有丝分裂原活化蛋白激酶的关系

探讨人白血病细胞系ＨＬ－６０白血病抑制因子（ＬＩＦ）受体α亚基（ｇｐ１９０）和另一亚基（ｇｐ１３０）的细胞内区与有丝分裂原活化原白激酶（ＭＡＰＫ）的关系,了解ＬＩＦ受体在调节白血病细胞增殖和分化中的意义。方法：用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体受体（１９０／１３０,１３０／１９０）并分别在ＨＬ－６０表达,其与野生型受体竞争性结合ＬＩＦ,用免疫组化和蛋白质印迹法分析受体细胞内区形成同源     

应用低浓度人脐血白细胞干扰素治疗慢性宫颈炎122例结果报道

应用低浓度人脐血白细胞干扰素,以随机双盲对照法,对宫颈表面直接喷雾试治慢性宫颈麋烂122例,总有效率达91.8%,显效率以上达46.7%,与对照组相比有非常显著差异。根据作者的初步研究结果表明,宫颈糜烂的程度和类型与疗效有关。糜烂程度轻则治愈率高,3种类型的宫颈糜烂,以单纯型较易治,其显效率以上可达65.2%,其次是颗粒型(52.3%)。最难治的是乳突型(12.5%)。此外,本文还讨论了干扰素治疗慢性宫颈糜烂的机制问题。     

Fas死亡结构域调节白血病细胞Meg-01内c-myc的表达

目的 探讨人白血病Meg-01细胞的异常增殖机制以及凋亡因子Fas对细胞异常增殖的调节作用。方法 用基因重组技术将Fas的细胞外区、跨膜区与白血病抑制因子（LIF）受体两亚基（gp190,gp130)细胞内区构成嵌合型受体（Fas/190,Fas/130),同时,将Fas死亡区域（FASDD）替换Fas/130中gp130细胞内区无结构域部分（Fas/130f),分别在Meg-01细胞内表达后,用抗Fas抗体激活这些嵌合型受体,随后用免疫组化和免疫印迹法分析受体细胞内区形成同源性寡聚体（190cyt-190cyt-190cyt,130cyt-130cyt-130cyt及FASDD－FASDD－FASDD）后的细胞状况和细胞内c-myc的表达。结果 转染pED Fas/130后用抗Fas抗体作用6－8h,Meg-01细胞c-myc表达量增加,细胞增殖明显;而pED Fas/190形成寡聚体后,Meg-01细胞c-myc的表达有所下降。另外,Fas/130与Fas/130f比较,后者的c-myc的表达明显下降,细胞形态大小不一。结论 LIF受体中gp130亚基细胞内区促进白血病Meg-01细胞内的c-myc表达及细胞增殖信号的传递;Fas死亡域可抑制gp130的细胞增殖活性。     

人胚胎原始生殖细胞的定位与体外分离培养的初步研究

目的：对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞进行定位并比较其体外培养的差异，探讨不同分离方法对人胚胎生殖系细胞体外培养的影响。方法：取4～8周发育阶段的人胚胎，利用组织化学法通过检测原始生殖细胞内碱性磷酸酶及其定位。体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织培养，第一次传代后，用碱性磷酸酶标记。     

人胚生殖嵴干细胞多能性调节基因Oct4 的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的:克隆人胚生殖系细胞多能性调节基因Oct4,并使其在大肠杆菌中表达.方法:取4～6周人胚胎分离生殖嵴和背侧肠系膜,利用RT-PCR技术扩增编码Oct4的全长cDNA,并插入到原核表达载体pGEX5T中,构建成 pGEX5T-Oct4重组质粒.β硫代半乳糖苷(IPTG)诱导使该基因在k802菌中表达.结果:用PCR方法扩增获得大小约1.1 kb条带;全自动测序与GenBank中登录的序列97％同源.获得了pGEX5T-Oct4 重组子并在k802菌中获得了表达,SDS-PAGE分析有一特异性的62 000条带.结论:扩增和克隆了人胚生殖系细胞多能性调节蛋白Oct4 全长cDNA并在大肠杆菌中获得表达,为进一步研究人胚生殖系细胞多能性调节与分化奠定了基础.     

LIF受体α亚基和gp130细胞内区与U937细胞内信号分子Stat3的关系

目的　探讨人白血病细胞系Ｕ９３７ 的白血病抑制因子（ＬＩＦ）受体α亚基和ｇｐ１３０ 亚基细胞内区与转录活性因子Ｓｔａｔ３ 的活性关系,旨在研究白血病细胞增殖和分化的机制。方法　用基因重组技术将２ 个基因在细胞内区截除（ｇｐ１９０ＥＸ、ｇｐ１３０ＥＸ）,并分别在Ｕ９３７ 细胞中表达,因其可与野生型受体竟争性结合ＬＩＦ,故可用免疫印迹法分析受体细胞内区截除后Ｓｔａｔ３ 的表达水平及该信号分子酪氨酸磷酸化。结果　转染ｇｐ１９０ＥＸ 和ｇｐ１３０ＥＸ 的Ｕ９３７ 细胞Ｓｔａｔ３ 表达量增加;Ｓｔａｔ３ 酪氨酸磷酸化水平下降。结论　ＬＩＦ受体α亚基和ｇｐ１３０ 的细胞内区均参与了Ｓｔａｔ３ 的激活和Ｕ９３７ 细胞的分化。     

白血病抑制因子受体gp190细胞内区与HL-60细胞内Cdc25B激活的关系

目的：观察白血病抑制因子（LIF）受体gp190亚基完整的细胞内区和gp190胞内区C末端片段在人白血病细胞系HL－60中与细胞周期调控因子Cdc25B表达和激活的关系，进一步了解LIF引发白血病细胞增殖抑制和分化的机制。方法：用基因重组技术将gp130的细胞内区换成gp190的细胞内区，用PCR技术扩增合成gp190细胞内区C末端的一个多肽，构成嵌合体受体基因130／190及190CT片段，并分别在HL－60细胞表达。用免疫组化和Western印迹方法，分析在LIF的诱导下，细胞生长和形态与Cdc25B表达的关系。结果：转染pcDNA3.0 130/190的HL－60细胞Cdc25B的表达量降低，细胞数量减少，细胞体积增大；转染pcDNA3.0 190末端的HL－60细胞Cdc25B的表达量增高，细胞表现为增殖，细胞体积普遍减小。结论：Cdc25B表达量降低与LIF诱导引发的白血病细胞HL－60增殖抑制有关，上述效应是由gp190亚基细胞内区介导的，而pg190C末端片段或干扰LIFα受体介导的信号转导效应。