前列腺癌细胞激素非依赖性转化过程中microRNA的差异化表达

目的 对比观察雄激素依赖前列腺癌细胞(LNCaP)与雄激素非依赖前列腺癌细胞(LNCaP-AI)中microRNA的表达差异,探讨前列腺癌激素依赖向非依赖转化的转录后调控机制.方法 利用Agilent基因芯片检测LNCaP及LNCaPAI细胞microRNA的表达,用RT-PCR方法对其中6个microRNA进行验证,并对差异表达的microRNA所调控靶基因功能进行生物信息学分析.结果 基因芯片检测发现:与LNCaP相比,LNCaP-AI细胞有27个microRNA表达降低,11个microRNA表达升高.对其中6个microRNA进行RT-PCR验证,结果与基因芯片结果一致.通过检索http://www.mirbase.org/针对microRNA调控的靶基因,并参考已知的与雄激素非依赖相关基因的功能,发现LNCaP细胞转化为激素非依赖的LNCaP-AI细胞过程中,差异表达的microRNA主要调控表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、Bcl-2及雄激素相关代谢酶.结论 前列腺癌激素非依赖转化过程中存在microRNA的差异表达,可能涉及雄激素受体(AR)旁路信号通路、金属酶、抗凋亡基因及雄激素相关代谢酶基因等.     

人骨髓间充质干细胞条件培养液对前列腺癌PC-3细胞生长的影响

目的:探讨人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)条件培养液(conditioned medium,CM)对前列腺癌PC-3细胞生长的影响。方法:从健康成人骨髓中分离、培养并扩增MSCs。第3代(P3)MSCs融合达80%时更换培养液,继续培养24h后收集上清液,即MSCs-CM。PC-3细胞分别在常规培养液(对照组)和含50%MSCs-CM的培养液(CM处理组)中培养。使用透射电子显微镜观察细胞超微结构,采用WST-8法检测细胞增殖活性,采用FCM法分析细胞周期变化。结果:培养第4天时,透射电子显微镜观察发现,与对照组相比,CM处理组细胞核质比更小,细胞质中细胞器更为丰富。培养第1、3、5和7天时,WST-8法检测显示,2组间除第1天的吸光度(D)值无统计学差异(P>0.05)外,其余3天实验组的D值均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。培养第4天时,FCM法检测显示,与对照组相比,CM处理组处于G0/G1期的细胞比例降低[(56.200±0.78)%vs(68.535±1.21)%],同时处于S+G2/M期的细胞比例升高[(43.80±0.77)%vs(31.46±1.20)%],差异有统计学意义(P<0.01)。结论:MSCs-CM可通过加快G1/S细胞周期转换而促进PC-3细胞增殖。     

经尿道腔内钬激光治疗上尿路移行细胞癌17例

2002—03至2009—10我科应用钬激光经尿道腔内治疗早期上尿路移行细胞癌17例,近期效果满意,现报告如下。     

手术联合复方玄驹胶囊治疗亚临床型精索静脉曲张不育患者的疗效

精索静脉曲张(VC)系精索静脉血液淤积导致精索静脉蔓状静脉丛扩张、伸长、迂曲改变,是引起男性不育症的重要原因之一。随着诊疗手段的增多及先进仪器的应用,部分临床体检时未被发现的精索静脉曲张患者,也存在精索静脉内径增宽和血液反流,称之为亚临床精索静脉曲张(SVC),与VC一样,其在男性不育症中的发病率达20%~80%[1-2]。而刘永杰等[3]研究表明复方玄驹胶囊可以提高少、弱精子患者的精子密度     

雄激素对前列腺癌细胞内游离钙离子浓度的影响

目的 探讨5α-双氢睾酮(DHT)对前列腺癌LNCaP细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响及其机制.方法 应用Fura-2/乙酸甲酯(Fura-2/AM)Ca2+荧光探针法结合MiraCal荧光成像系统实时检测不同浓度的DHT刺激以及Ca2+通道阻滞剂干预后LNCaP细胞[Ca2+]i的变化.结果 DHT能快速诱导[Ca2+]i升高,在20 s～3 min升至峰值.DHT浓度为1、10、100和1000nmol/L时能诱导[Ca2+]i分别从基础值(28±5)、(29±5)、(28±4)和(28±9)nmol/L上升至峰值31±3(P＞0.05)、65±9(P＜0.01)、193±33(P＜0.001)和(208±42)nmol/L(P＜0.001).DHT浓度为100和1000 mol/L时,[Ca2+]i峰值间差异无统计学意义(P＞0.05).细胞外液无Ca2+时,1000 nmol/L DHT未能诱导[Ca2+]i升高.细胞膜L-型电压门控Ca2+通道阻滞剂维拉帕米(50μmol/L)、地尔硫卓(100 μmol/L)或硝苯地平(5 mmol/L)37℃孵育细胞5 min后,能完全抑制1000nmol/L DHT诱导的[Ca2+]i升高.磷脂酶C抑制剂新霉素(1 mmol/L)37 ℃孵育细胞5 min或兰尼定受体阻滞剂普鲁卡因(50 mmol/L)37℃孵育细胞3 min后,对1000 nmol/L DHT诱导的[Ca2+]i升高没有影响.结论 DHT可快速、剂量依赖性诱导LNCaP细胞[Ca2+]i升高;DHT诱导LN-CaP细胞[Ca2+]i的升高是细胞外Ca2+经细胞膜L-型电压门控Ca2+通道流入细胞内实现的,细胞内贮钙库未释放Ca2+.     

体外冲击波碎石治疗双侧输尿管中段结石合并急性肾后性肾功能衰竭疗效观察

目的探讨体外冲击波碎石术（ESWL）治疗双侧输尿管中段结石合并急性肾后性肾功能衰竭的安全性和有效性。方法对经B超、X线腹部平片（KUB）、CT及实验室检查确诊的双侧输尿管中段结石合并急性肾后性肾功能衰竭患者,先行经皮肾穿刺造瘘及放置双J管引流,然后经ESWL术,将结石粉碎至直径3～5mm为成功标准。结果 ESWL术后2个月B超检查示结石消失14例,结石变小1例。所有患者肾功能均得到改善。结论应用ESWL治疗双侧输尿管中段结石合并急性肾后性肾功能衰竭,配合经皮肾穿刺造瘘、放置双J管引流,是安全有效的治疗方法 。     

输尿管镜钬激光与冷刀内切开联合电切治疗尿道狭窄疗效比较

目的评价输尿管镜钬激光与冷刀内切开联合电切治疗男性尿道狭窄的疗效。方法回顾性分析81例经尿道冷刀内切开联合电切治疗(Ⅰ组)和52例输尿管镜钬激光治疗(Ⅱ组)的临床资料,比较两组在手术时间、出血量、术后住院日、术后最大尿流率(Qmax)、术后尿道扩张时间及治愈率等指标的差异。结果随访1~8年,两组术后住院日差异无统计学意义(P>0.05),但Ⅱ组在手术时间、出血量、术后Qmax、术后尿道扩张时间、治愈率方面较Ⅰ组具有明显优势(P<0.05或P<0.01)。结论输尿管镜钬激光治疗男性尿道狭窄疗效优于经尿道冷刀内切开联合电切术。     

激素递减法成功建立雄激素非依赖性LNCaP细胞亚系

目的:利用激素递减法对LNCaP细胞进行去雄环境培养,建立雄激素非依赖的LNCaP细胞(LNCaP-AI)亚系并予以鉴定.方法:利用活性炭处理的血清培养模拟去雄细胞环境,逐步递减培养基中激素10 d,后完全在非雄培养,共连续培养3个月,直到LNCaP细胞重新进入快速生长期,利用CCK-8法、放免法、RT-PCR法分别测定细胞生长曲线、PSA及雄激素(AR)表达情况.结果:LNCaP细胞在激素递减后,生长缓慢,呈神经内分泌样改变和成簇生长,经过共3个月的连续非雄培养,细胞重新恢复以前的形态及生长.CCK-8测定提示LNCaP-AI细胞能够在去雄环境中生长,放免法提示LNCaP-AI细胞能够在去雄环境中恢复分泌PSA功能,RT-PCR方法提示LNCaP-AI细胞显著高表达AR.结论:激素递减方法可以3个月左右有效地建立雄激素非依赖的LNCaP细胞亚系.