CTLA4-Ig和IL-4诱导异种骨移植免疫耐受的体外研究

目的探讨CTLA4Ig和IL4在诱导异种骨移植免疫耐受中的作用。方法反应细胞为BALB/c小鼠脾淋巴细胞,刺激细胞为新西兰白兔血淋巴细胞,刺激抗原为兔骨上清液。采用经典的混合淋巴细胞培养法及骨上清液与淋巴细胞混合培养法作为异种骨移植的体外实验模型。在各培养液中分别加入CTLA4Ig、IL4及两者联合应用,通过测定其3HTdR掺入率,观察不同细胞因子对刺激淋巴细胞增殖的影响。结果1细胞刺激组CTLA4Ig和IL4均对淋巴细胞增殖有显著抑制作用P<0.001),CTLA4Ig与IL4联合应用并未显示出比CTLA4Ig单独应用更为明显的细胞增殖抑制作用(P>0.05)。2骨上清液刺激组:CTLA4Ig对细胞增殖无抑制作用(P>0.05),而IL4则有较为显著地细胞增殖抑制作用(P<0.05);CTLA4Ig与IL4联合应用也未产生比单独应用IL4更为明显的细胞增殖抑制作用(P>0.05)。结论CTLA4Ig对由细胞刺激产生的淋巴细胞增殖抑制效果较好,而IL4则对骨上清液刺激的细胞增殖抑制作用更好;CTLA4Ig与IL4联合应用并未产生协同抑制作用。     

Effects of recombinant human growth hormone (r-hGH) on experimental osteoporotic fracture healing

ＴＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒｔｈｏｐａｅｄｉｃｓ ,ＮｉｎｔｈＰｅｏｐｌｅ ｓＨｏｓｐｉｔａｌ,ＳｈａｎｇｈａｉＳｅｃｏｎｄＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｓｈａｎｇｈａｉ 2 0 0 0 11,Ｃｈｉｎａ(ＨａｏＹＱ ,ＤａｉＫＲ ,ＧｕｏＬＨ ,ＷａｎｇＹＪａｎｄＴａｎｇＴＴ)ｈｅｍａｊｏｒｈａｒｍｔｏｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓｉｓｆｒａｃｔｕｒｅ .Ｂｕｔｌｉｔｔｌｅｈａｓｂｅｅｎｋｎｏｗｎａｂｏｕｔｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｏｓｔｅｏｐｏｒｏｔｉｃｆｒａｃｔｕｒｅｈｅａｌｉｎｇｓｏｔｈａｔｃｕｒａｔｉｖｅｅ…     

计算机辅助骨形态计量学分析系统的构建与应用

本研究旨在构建计算机辅助的骨形态计量学分析系统。基本方法为利用显微镜、数码相机、计算机及相关软件构建不脱钙切片的显微图像数码整合系统,利用Freeplus和自编软件对每一幅图像进行基本测量,再根据骨形态计量学的定义,计算出反映骨量、骨结构与骨代谢变化的计量参数。此方法已应用于骨质疏松症的动物实验和临床研究,在骨质疏松性骨折风险预测和药物疗效评定中都发挥了重要作用。     

CTLA4Ig抑制BMP2基因转染的MSCs诱导的免疫应答

目的通过腺病毒介导人细胞毒T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA4Ig)及人骨形态发生蛋白2(BMP2)在骨髓间充质干细胞(MSCs)中的表达,探讨CTLA4Ig对BMP2转染的异基因MSCs诱导的免疫应答的抑制作用。方法以CTLA4Ig和BMP2重组腺病毒转染MSCs。ELISA法检测包装的病毒感染MSCs后,CTLA4Ig及BMP2蛋白的表达;观察CTLA4Ig对混合淋巴细胞反应(MLR)的抑制作用。结果腺病毒载体介导CTLA4Ig和BMP2体外感染的MSCs能够分泌CTLA4Ig及BMP2蛋白,且CTLA4Ig融合蛋白可以有效抑制AdBMP2基因转染的MSCs的刺激作用。结论给予CTLA4Ig腺病毒进行基因治疗可有效的抑制AdBMP2转染的异基因MSCs引起的免疫应答,诱导MSCs移植耐受;为BMP2基因修饰的同种异体间的MSCs移植提供了实验依据。     

透明质酸对BMP-2转染的羊BMSCs增殖、分化的影响

目的观察透明质酸（HA）对携带人骨形态发生蛋白-2的腺病毒（Adv-BMP-2）转染的羊骨髓基质干细胞（BMSCs）体外增殖、分化的影响。方法将羊骨髓体外分离、扩增BMSCs,分成5组：转染Adv-BMP-2的BMSCs＋HA组（Ⅰ组）,转染Adv-BMP-2的BMSCs组（2组）,BMSCs＋HA组（3组）,BMSCs组（4组）,转染携带β半乳糖苷酶的腺病毒（Adv-β-gal）的BMSCs组（5组）。采用细胞计数、绘制细胞生长曲线和流式细胞分析观测细胞增殖;采用碱性磷酸酶（ALP）检测以及RT-PCR检测Ⅰ型胶原（Col-Ⅰ）、骨连接素（ON）和骨涎蛋白（BSP）的mRNA表达。结果①细胞增殖：3 d后各组细胞增殖无显著差异,1周后第1组和第3组的细胞增殖明显高于其他组。②ALP活性：3 d后第3组ALP活性明显低于第4、5组,而第1、2组则显著高于第4、5组;7 d后前3组ALP活性较后两组均显著增加,而第1、2组ALP活性增加更为显著。③Col-Ⅰ、ON和BSP的mRNA表达：3 d和7 d后前3组较后两组均有不同程度的增多。结论HA与BMSCs体外复合培养后可促进BMSCs的增殖、增加ALP的活性以及Col-Ⅰ、ON和BSP基因的表达。     

白血病抑制因子及其骨生物活性

白血病抑制因子的靶细胞范围极为广泛，对骨组织细胞也有多方面的生物活性。对ＬＩＦ基因结构和受体转换机制的认识将有助于阐明其多效性的生化基础，下一步的研究重点在于明确ＬＩＦ在体内对正常骨代谢活动的可能影响及其病理相关性。     

应用富集骨髓干细胞技术治疗骨缺损

目的探讨富集骨髓干细胞(bonemarrowstemcells,BMSCs)移植技术促进骨修复的疗效及其影响因素。方法应用富集干细胞技术,在术中完成骨髓血采集、BMSCs富集,通过局部注射或与多孔!-磷酸三钙材料复合后回植,治疗骨缺损患者49例。对富集前后骨髓有核细胞(nucleatedcells,NCs)和碱性磷酸酶染色阳性的细胞集落(colony-formingunitswithalkalinephosphatase+,CFUs/ALP+)计数,分析年龄、性别、病种对骨髓干细胞的影响;通过扫描电镜观察多孔材料与细胞的复合情况;结合影像学检查综合评定疗效。结果平均抽取骨髓血(250±37)ml,经富集技术平均回收(50±19)ml,骨髓成骨源性干细胞回收率78%±18%。其中CFUs/ALP+的自然对数与年龄呈线性负相关(r=-0.4910,P=0.008),NCs与年龄无相关性(r=-0.0469,P=0.8126)。骨髓NCs和CFUs/ALP+的数量无性别差异(t=0.6242,P=0.5397;χ2=2.6512,P=0.1035)。骨折组患者的骨髓CFUs/ALP+数量比退变组多(t=2.2793,P=0.0327),而NCs数量的差异无统计学意义(t=0.7600,P=0.4553)。通过富集,NCs与CFUs/ALP+的增长倍数呈线性正相关(r=0.4054,P=0.0324)。复合2h后,富集BMSCs可在多孔β-磷酸三钙孔内壁贴附。全部病例随访(15.4±6.4)个月,总有效率91.8%。富集血样细菌学检测阴性率100%。术后伤口渗出或肿胀4例,均自行愈合。结论自体富集BMSCs技术是一种快速、简便、安全的临床细胞治疗手段,可与手术同步进行,促进骨修复和再生。年龄、病种因素对BMSCs数量的影响较大。     

多孔双相钙磷陶瓷在脊柱后路融合中成骨作用和降解特性的组织学观察(附20例活检分析)

[目的]了解多孔双相钙磷陶瓷在人体脊柱后路融合中的成骨变化及降解过程。[方法]对20例脊柱后路融合的双相钙磷陶瓷活检标本行不脱钙硬组织切片检查。观察陶瓷周围和内部的新生组织、陶瓷的形态改变、降解颗粒及伴随的细胞吞噬反应。其中14例标本行组织形态计量，根据患者的年龄、植入时间及临床结果分组比较成骨及材料降解的速度。[结果]所有的双相钙磷陶瓷标本均可见新生骨组织，与自体骨接触越多，陶瓷内的新生骨组织越多。绝大部分陶瓷内可见降解颗粒，部分颗粒位于巨噬细胞内。不同标本的新生骨和材料降解速度差异较大。陶瓷内的新生骨随植入时间的增加而增多，但随患者年龄的增大而减少。陶瓷的降解率随患者年龄的增大而减少，但不受植入时间的影响。后路融合成功组的活检标本的新生骨量高于融合失败组，但材料降解率则反之。[结论]多孔双相钙磷陶瓷是一种骨传导材料，但植入体内降解缓慢，不能被新生骨组织完全替代。植入时必须将陶瓷与自体骨充分混合以获得良好的骨长入。陶瓷产生的降解颗粒及诱发的细胞吞噬反应必须引起注意。     

辛伐他汀对成骨样细胞MC3T3-E1增殖功能的影响

目的 从细胞、蛋白及基因水平探讨辛伐他汀对成骨样细胞MC3T3-E1增殖的影响.方法 辛伐他汀选取10-6、10-7、10-8和10-9mol/L4个浓度组,同时设溶剂对照组.含血清细胞培养条件下,连续细胞计数8 d,描绘生长曲线;无血清培养条件下,分别于24、48及72 h进行细胞计数、四唑盐比色试验(MTY)、蛋白质含量测定和DNA含量荧光测定.结果 含血清细胞培养条件下,辛伐他汀各浓度组与溶剂对照组的生长曲线相比较,无明显差异;无血清培养条件下,辛伐他汀各浓度组与溶剂对照组24、48及72 h时细胞计数、MTY比色试验及DNA含量荧光测定各组间未见明显差异;蛋白质含量测定24及72 h时各组问无明显差异,然而48 h时10-6mol/L辛伐他汀组蛋白含量明显高于对照组并差异有显著性(P＜0.05).结论 辛伐他汀促进了成骨样细胞MC3T3-E1细胞的蛋白合成功能,但对其增殖无明显影响.     

骨质疏松性骨折治疗的研究进展

随着人类平均寿命的增加，越来越多的人群进人老龄状态。因此，骨质疏松症的发病率逐年增加。骨质疏松最常见的并发症是骨折，常见部位是椎体、髋部和桡骨远端。妇女在进入绝经期后骨量丢失明显，如无适当预防和治疗，骨质疏松容易导致桡骨、脊柱和髋部的骨折。骨质疏松性骨折的定义是：在骨质疏松症中，脆而弱的骨低于骨折阈值，从而受到轻微的外力就易发生骨折。目前，骨质疏松性骨折的治疗包括外科干预、积极应用抗骨质疏松性药物、功能锻炼等。然而，由于骨质疏松症本身的病理特点，决定了骨质疏松性骨折的愈合过程不同于正常骨折愈合过程。本文就骨质疏松性骨折的愈合过程和各种实验性以及临床治疗方法做一综述。