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141.
142.
目的:比较羧甲基化葡聚糖(carboxymethylated dextran,CMD)与聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)纳米磁颗粒作为基因载体对可溶性血管内皮生长因子受体-1(solublefms-like tyrosinekinase-1,sFIt-1)胞外第2-3区sFIt-1(2-3)基因片段转染的差异。方法:通过磁颗粒载体将构建的真核表达质粒pcDNA3.1/sFIt-1(2-3)的基因片段转染入人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)中,检测各组的转染效率和对细胞增殖能力及凋亡的影响。实验分为CMD磁颗粒(CMD-MAG)组、PEI磁颗粒(PEI-MAG)组、单纯PEI组和未转染对照组,用第3~5代处于对数生长期的HUVEC为转染对象。在相同外界磁场条件下分别以N/P(聚合物中的氨基基团与DNA中磷酸基团的摩尔比)为10,15,20,25,30的PEI/DNA/CMD-MAG复合物、PEI/DNA/PEI-MAG复合物转染HUVEC,并以不加磁场下单纯PEI/DNA复合物转染的和未经转染的HUVEC作为对照。24h后倒置相差荧光显微镜、流式细胞仪检测以上述不同方法转染了增强型绿色荧光蛋白质粒(pcDNA3.1-EGFP)的细胞绿色荧光表达百分率以反映目的基因片段sFIt-1(2-3)的转染率;RT-PCR法和Westernblot法检测转染pcDNA3.1/sFIt-1(2-3)后sFIt-1(2-3)mRNA和蛋白的表达。通过MTT法观测各组细胞的生长情况,计算各组细胞的相对增殖百分率;通过Ho-echst染色法观察各组细胞的凋亡百分率,以此对比不同磁颗粒载体转染后对细胞的影响。结果:在N/P为20时,各组GFP的转染率最高,且CMD磁颗粒组各N/P时转染率均高于其他组;转染pcDNA3.1/sFIt-1(2-3)后24h,CMD-MAG组sFIt-1(2-3)的mRNA和蛋白的表达均明显高于其他组;CMD磁颗粒转染组细胞增殖能力与对照组无明显差异,而PEI磁颗粒组、PEI组转染组细胞增殖能力均明显降低;CMD磁颗粒转染组约有5%细胞发生凋亡,PEI磁颗粒组凋亡细胞百分数约为20%~30%,PEI组约为50%。结论:CMD纳米磁颗粒可作为载体实现目的基因片段的高效率转染;在转染率和细胞毒性等方面CMD纳米磁颗粒均优于PEI纳米磁颗粒,可作为sFIt-1基因片段转染和眼底新生血管性疾病基因治疗的载体。 相似文献
143.
目的:探讨肺癌行三维适形(3-DCRT)放射治疗后3个月内发生急性放射性肺炎(ARP)的影响因素.方法:我科收治肺癌病人35例,采用三维适形8MV-X射线放疗,照射方法为每周5次,每次2Gy,GTV照射剂量范同50Gy~70Gy,均在放疗结束后3个月内诊断放射性肺炎.结果:ARP的发生率为31.43%;GTV≥60Gu质12例,发生ARP的8例,其发生率为66.67%,高于放射剂量<60Gy的23例有3例发生ARP,其发生率13.04%,(P<0.05);双肺V20≥30%的8例有7例发生ARP,其发生率87.5%,高于V20<30%的27例有4例发生ARP,其发生率14.81%,(P<0.05);双肺V30≥20%的13例有7例发生ARP,其发生率53.85%,高于V30<20%的22例有4例发生ARP,其发生率18.18%,(P<0.05).结论:靶区剂量≥60Gy,发生急性放射性肺炎的机率高,双肺V20≥30%、V30≥20%,发生急性放射性肺炎的机率高.肺癌三维适形放疗计划时要充分考虑靶区剂量对正常肺组织的影响,在保证靶区照射要求的情况下尽量减小两肺的V20和V30. 相似文献
144.
目的:确定从艾叶中分离、纯化出的白色晶体为高纯度白坚木皮醇,并检测其纯度。对比分析9个产地艾叶中白坚木皮醇含量差异。方法:采用提取、结晶、重结晶的方法进行分离、纯化,通过核磁共振和高分辨-电喷雾离子源-质谱(HR-ESI-MS)数据鉴定其化学结构和相对分子质量,使用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法检测其纯度。结果:从艾叶中分离、纯化出一种白色晶体,根据其HR-ESI-MS数据鉴定其化学结构为白坚木皮醇,纯度>99%。9个产地艾叶中的白坚木皮醇含量差异有统计学意义(P<0.05),这可能与产地和采收时间有关。结论:提供了一种工业化获取高纯度白坚木皮醇的方法,增加了艾叶的附加值。 相似文献
145.
目的:探讨益气升清方对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1/p38MAPK通路的影响。方法:SPF级大鼠60只,正常组10只,其余腹腔注射STZ制备DM模型。成模后随机分为模型组(等量蒸馏水)、厄贝沙坦组[27 mg/(kg·d)]、中药低剂量组[3.465 g/(kg·d)]、中药中剂量组[6.93 g/(kg·d)]、中药高剂量组[13.86 g/(kg·d)],每组10只,给药8周,检测血糖、Scr、BUN,观察肾组织的病理,用荧光定量PCR和免疫组化法检测TGF-β1、p38MAPK、FN mRNA和蛋白的表达。结果:造模后各组血糖较正常组有显著性升高(P<0.01),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠血清BUN、Scr显著增高(P<0.01),肾组织有大量TGF-β1、p38MAPK、FN mRNA及蛋白表达(P<0.01);与模型组比较,各观察组病理损害明显减轻,血清BUN、Scr明显降低(P<0.01),TGF-β1、p38MAPK、FN mRNA及蛋白表达明显减少(P<0.01),厄贝沙坦组、中药中、高剂量组优于中药低剂量组(P<0.01)。结论:糖尿病大鼠TGF-β1/p38MAPK通路的激活导致肾间质病变,益气升清方可减少TGF-β1、p38MAPK的表达,从而减少FN的沉积,起到保护肾脏的作用。 相似文献
146.
本文阐述将传统的中医理论和现代科学技术结合,在建立中医诊断专家系统的研究中建立指标体系的必要性。采用包括系统科学和系统复杂性研究在内的多门学科的概念和方法,采用中医理论的框架,利用现代的科学技术去反映中医诊断全过程及其特点。基于分析研究,提出了中医诊断专家系统指标体系的设计思路和设计原则,构建了指标体系的内容框架,指出依据此指标体系的内容框架建立了基于数据挖掘的中医诊断专家系统。 相似文献
147.
目的 研究秦皮滴眼液改善兔自身免疫性干眼泪液学指标及眼表慢性炎症的机制。方法 健康成年雌性新西兰大白兔随机分为对照组(CG)、模型组(MG)和秦皮组(QP),各12只。MG、QP组通过耳缘静脉回输激活的自体外周血淋巴细胞(PBL)建立兔自身免疫性干眼模型。CG、MG组兔予磷酸盐缓冲液滴眼,QP组兔予秦皮滴眼液滴眼,连续给药6周。给药完成后检测兔泪液学指标,包括泪液分泌量(SⅠT)、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素染色(FL)评分;取兔右眼泪腺进行称重,苏木精-伊红(HE)染色观察泪腺、角膜结构,过碘酸雪夫(PAS)染色观察结膜杯状细胞形态及密度;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western Blot法分别检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关的蛋白激酶B(Akt)、叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)、维甲酸核孤儿受体-γ(tROR-γt)mRNA和蛋白的表达水平。结果 (1)泪液学指标:与CG组比较,MG组给药6周后兔的SⅠT、BUT降低(tSⅠT=9.493,t... 相似文献
148.