低密度脂蛋白-阿克拉霉素复合物抗小鼠肝癌H22的实验研究

形成小鼠皮下实体瘤型及腹水型肝癌Ｈ２２模型，观察低密度脂蛋白－阿克拉霉素（ＬＤＬ－ＡＣＭ）复合物和阿克拉霉素（ＡＣＭ）在荷瘤小鼠体内的抗肿瘤作用。结果表明：（１）对照组Ｈ２２实体瘤瘤重为１．７４±０．６０ｇ，ＡＣＭ组为１．３０±０．５７ｇ，ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组为０．８６±０．４４ｇ，与对照组差异有显著性（Ｐ＜０．０５），与ＡＣＭ组差异不明显（Ｐ＞０．０５）；（２）对照组、ＡＣＭ组及ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组荷腹水型肝癌Ｈ２２小鼠的平均生存时间分别为２４．６±７．５０ｄ，２３．４±７．６７ｄ和１７．１±３．４４ｄ。ＡＣＭ组和ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组荷瘤小鼠存活期均明显长于对照组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组效果好于ＡＣＭ组（Ｐ＜０．０５）。     

低密度脂蛋白—阿克拉霉素复合物抗肿瘤作用的研究

目的：观察低密度脂蛋白－阿克拉霉素（ＬＤＬ－ＡＣＭ）复合物对小鼠肝癌Ｈ２２细胞的细胞毒作用。方法：ＭＴＴ法及蛋白质合成抑制实验。结果：ＭＴＴ显示,与正常肝细胞组相比,与正常肝细胞组相比,ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物对Ｈ２２细胞有更显著的生长抑制作用。蛋白质合成抑制实验除显示了ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物的生长抑制作用外,还反映出该复合物作用的饱和性。结论：ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物对小鼠肝癌Ｈ２２细胞有靶向杀伤作用。     

HDM通过肺泡巨噬细胞TLR4诱导哮喘小鼠气道炎症的机制研究

目的:研究HDM通过肺泡巨噬细胞(AM)Toll样受体4(TLR4)的高表达及诱导AM的活化,探讨其对哮喘小鼠气道炎症的影响.方法:BALB/c小鼠随机分为哮喘模型组(OVA)A,HDM处理组(HDM+OVA)B,对照组(生理盐水)C.用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立小鼠哮喘模型;HE染色观察小鼠气道及肺组织病理变化;光学显微镜下观察小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ的含量,实时定量PCR法测定AM的TLR4的表达,流式细胞技术(FCM)检测AM的CD80、CD86的表达.结果:与A组相比,B组BALF上清中IL-4、IL-5和IL-13的水平显著增高(P<0.05),而IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05),与A组相比,AM的TLR4mRNA表达明显增高(P<0.05),CD80的表达差异无统计学意义,CD86的表达水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:HDM通过AM的TLR4的高表达诱导AM的活化,加重哮喘的气道炎症.     

小鼠肝癌H22细胞与正常肝细胞低密度脂蛋白受体的分析研究

为观察小鼠肝癌Ｈ２２细胞及正常肝细胞ＬＤＬＲ对人ＬＤＬ的结合，并对这两种细胞内移及降解人ＬＤＬ的功能进行分析比较，用＾１２５Ｉ标记ＬＤＬ，对上述细胞ＬＤＬＲ进行受体饱和分析和单点分析。结果表明：（１）Ｈ２２细胞及正常肝细胞可通过其ＬＤＬＲ结合、内移、降解人ＬＤＬ；（２）Ｈ２２细胞及正常肝细胞ＬＤＬＲ对人ＬＤＬ的亲和性和特异性相同，但Ｈ２２细胞Ｂｍａｘ明显增多；（３）两种细胞对人ＬＤＬ的非特异性结合     

小鼠肝癌H_(22)细胞与正常肝细胞低密度脂蛋白受体的分析研究

为观察小鼠肝癌Ｈ２２细胞及正常肝细胞ＬＤＬＲ对人ＬＤＬ的结合，并对这两种细胞内移及降解人ＬＤＬ的功能进行分析比较，用１２５Ｉ标记ＬＤＬ，对上述细胞ＬＤＬＲ进行受体饱和分析和单点分析。结果表明：（１）Ｈ２２细胞及正常肝细胞可通过其ＬＤＬＲ结合、内移、降解人ＬＤＬ；（２）Ｈ２２细胞及正常肝细胞ＬＤＬＲ对人ＬＤＬ的亲和性和特异性相同，但Ｈ２２细胞Ｂｍａｘ明显增多；（３）两种细胞对人ＬＤＬ的非特异性结合差异不明显，内移及降解人ＬＤＬ的能力亦相同。提示小鼠肝癌Ｈ２２细胞ＬＤＬＲ数目增多，亲和性及特异性未变，对ＬＤＬ的内移和降解功能亦未改变。     

人参皂苷Rb1对NEP基因启动子活性的影响

目的 构建NEP启动子缺失体-荧光素酶报告基因质粒,探查神经内肽酶(NEP)基因启动子中与人参皂苷Rb1影响NEP启动子活性有关的位点。方法 用NEP基因5′上游启动区2.4kb片段和荧光素酶报告基因载体pGL3-basic构建NEP启动子-荧光素酶报告基因质粒pGL3-nep2.4;用Erase-a-Base System对pGL3-nep2.4质粒2.4kb DNA插入片段5′端进行缺失,构建NEP启动子缺失体-荧光素酶报告基因质粒;用Rb1处理NEP启动子缺失体转染的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,检测双荧光素酶活性,观察Rb1对NEP启动子活性的影响。结果 成功构建了含NEP启动子DNA序列的重组质粒pGL3-nep2.4。荧光素酶活性检测显示,转染pGL3-nep2.4质粒的SH-SY5Y细胞荧光素酶活性是转染pGL3-basic的13.1倍(P<0.01)。Rb1处理可使转染pGL3-nep2.4质粒的SH-SY5Y细胞荧光素酶活性增加,其是对照组的2.9倍(P<0.01);细胞荧光素酶活性检测亦显示,NEP基因上游启动区-894~-857bp(Region Ⅰ)及-100~-82bp(Region Ⅳ)片段缺失后,启动子活性分别是缺失前的29%(P<0.01)和25%(P<0.01),-559~-534bp(Region Ⅱ)及-223~-179bp(Region Ⅲ)片段缺失后,启动子活性分别是缺失前的5.12倍(P<0.01)及1.81倍(P<0.01)。Rb1处理后,RegionⅠ、Ⅱ和Ⅲ缺失体质粒转染细胞荧光素酶活性均与对照组无统计学差异(P>0.05),Region Ⅳ缺失质粒pGL3-226转染细胞荧光素酶活性也与对照组无明显差异(P>0.05),而含Region Ⅳ质粒pGL3-244转染细胞荧光素酶活性则是对照组的1.61倍(P<0.01)。结论 NEP基因5′上游2.4kb DNA片段有较强的启动子活性,Rb1能明显增加其活性。NEP基因2.4kb DNA片段有2个正调控区(RegionⅠ和Region Ⅳ)和2个负调控区(RegionⅡ和Region Ⅲ),Rb1通过Region Ⅳ发挥正调控作用。