A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

武汉市健康儿童麻疹抗体水平调查

为了解武汉市13岁以下儿童麻疹免疫水平，发现易感人群，加强重点人群的麻疹防制工作，笔者于2003年7月至11月对武汉市儿童麻疹抗体水平进行了监测，现将监测结果报告如下。     

牙本质粘接剂间接盖髓的临床疗效

目的观察牙本质粘接剂在间接盖髓术中的疗效。方法选择102例牙合面深龋未直接露髓的患牙分别用Scotchbond2和Dycal间接盖髓,于术后6个月、12个月、24个月进行临床检查。结果牙本质粘接剂组2年成功率为91.8%,Dycal组为83.3%。结论牙本质粘接剂是一种较好的间接盖髓剂,可提高深龋治疗的成功率。     

阿尔茨海默病患者膳食微量营养素摄入量的调查

阿尔茨海默病是一种常见老年性退行性疾病,国外的病例-对照研究和前瞻性研究表明,营养素与脑认知功能之间有一定关系[1],但目前国内外针对阿尔茨海默病患者膳食质量评价少见报道。本研究于2007年3月采用72h膳食摄入回顾法,对病例组和对照组的膳食摄入现状进行调查,分析患者膳食营养素维生素C、维生素E、维生素A、硫胺素、核黄素、钙、锌、硒、镁、锰的摄入水平,采用营养学原理对阿尔茨海默病患者膳食营养素摄入量进行评估,并与健康老年人的相应指标进行对比,从而了解阿尔茨海默病患者实际摄入的膳食微量营养素是否适宜,以便在饮食上为老年…     

庆大霉素中毒性耳聋

庆大霉素目前仍是主要的致聋抗生素，庆大霉素中毒性耳聋的发病机制包括自由基损伤学说、内耳微循环障碍学说、毛细胞线粒体功能失常学说、细胞凋亡等，并发现一些与耳聋相关的基因。聚DL-天冬氨酸（PAA）、表皮生长因子（EGF）表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、神经营养凼子3（NT3）、高压氧等对庆大霉素的耳毒性有一定的拈抗作用。中医药丹参、天鼓冲剂、复聪片、耳聋左慈丸等也可减轻庆大霉素的耳毒性。庆大霉素中毒性耳聋基因治疗具有良好的前景。制造一种由病毒DNA序列和非病毒载体结构共同组成的复合型载体，也许是未来基因治疗载体得到完善、基因治疗得到突破性进展的着手点之一。     

灿烂绿光度法检测Fenton反应产生的羟自由基

目的建立检测Fenton反应产生羟自由基的新方法。方法羟自由基与灿烂绿发生氧化反应，使灿烂绿颜色发生变化，在624nm处用分光度计测定其△A624值的变化，可间接测定羟自由基的生成量。结果通过对测定条件的研究，得到最佳测定方案。同时发现甘露醇、抗坏血酸、硫脲清除羟自由基作用呈明显的量效关系。结论该方法稳定性好、操作简便、测定快速，可作为一种简便的筛选抗氧化荆的方法。     

腰椎间盘突出症术后椎间隙感染的诊治

目的：探讨椎间盘术术后椎间隙急慢性感染的诊断和治疗方法。方法：椎间盘术后，通过临床查体，MRI检查，血常规，血沉，C反应蛋白等指标的检测，对椎间隙感染进行诊断，急性椎间盘感染的患者采用保守治疗，椎间隙引流等方法治疗：慢性椎间隙感染采用椎间隙病灶清除，植骨融合法手术治疗。结果：本组被诊断为椎间隙感染的患者主要表现为剧烈的腰痛，低热，血象升高，血沉加快，腰椎MRI出现特征性改变等表现。其中6例获得早期诊断，早期保守治疗效果良好。1例慢性感染合并腰椎不稳患者予以后路病灶，植骨内固定术，8例患者均症状改善，病愈出院。结论：椎间盘术后椎间隙感染应该早期渗断，并根据不同的类型采用相应的治疗。     

孩子增高要素

人的个子高矮虽然受种族和遗传因素的影响,但是后天因素也不容忽视,后天因素主要包括营养、运动、睡眠、情绪四个要素。 1 让孩子吃饱吃好从营养角度考虑,儿童的身高应在胎儿时期就得到重视。即在妊娠期就注意增加母体的营养,使胎儿在母体中获取良好的营     

大黄甘草汤临证验案2则

大黄甘草汤出自张仲景《金匮要略》,由大黄、甘草组成,主治实热积滞胃肠,食已即吐,大便秘结者。笔者临床运用此方加味治疗多种疾病,疗效满意,现举2例如下。1痢疾王某,男,18岁,2000年6月10日初诊。患者于昨天上午进食不洁食物后,夜间出现发热,体温39℃,腹胀,时疼痛,今晨大便红白黏冻交杂,精神疲惫,饮食不进。刻诊:体温39.5℃,大便红多白少,已便五六次,腹痛,里急后重,小便黄赤,舌质红、苔黄腻,脉滑数。大便常规:WBC( ),RBC( ),脓细胞( ),吞噬细胞0～3/HP。辨证属湿热蕴结,气血壅滞,腑气不利之湿热痢。治宜清热化湿,调气行滞。药用:大…     

头孢哌酮钠的双硫伦反应和过敏反应的临床研究

头孢哌酮钠（cefoperazone）是第三代头孢类抗生素，该药抗菌谱广，对肝肾不良反应小。特别当肝肾功能不全患者合并感染或对其他类药物过敏时，经常应用头孢类抗生素。文献统计临床应用过程中出现的过敏反应占头孢类抗生素不良反应的40．1%，严重的可危及生命。近几年发现饮酒患者中出现一种双硫伦样反应，起病快，容易判断为过敏反应。我们通过临床病例分析，探讨过敏反应和双硫伦反应的不同表现和机制，以便在临床中指导用药。