GPI锚定蛋白检测诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症的临床价值

目的：探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者不同外周血细胞GPI锚定蛋白的表达情况,为PNH的诊断和鉴别诊断提供依据。方法：采用流式细胞术检测32例PNH患者外周血各类细胞膜上CD55、CD59、 CD16及CD14的表达百分率。结果： PNH患者外周血红细胞、粒细胞膜上CD55、CD59表达均明显减少,与正常对照组比较差异有显著性（P<0.001）,且粒细胞上CD55、CD59表达率低于红细胞（P<0.05）;血小板CD55、CD59表达率也较对照组减少（P<0.05）;有27例PNH患者的淋巴细胞CD55、CD59表达降低,其缺失率达30%,低于粒细胞和红细胞;CD16在粒细胞上表达量差异很大（34%～83%）,与对照组比较差异有显著性（P<0.001）;在单核细胞上可见CD14表达缺失的PNH克隆,CD14表达比例明显低于正常对照组（P<0.001）。结论： 检测外周各系血细胞CD55和CD59可以使典型PNH的诊断更加可靠,使部分缺乏典型临床表现的PNH明确诊断。检测CD16和CD14对排除PNH具有重要意义。     

治疗2型糖尿病新靶标及新先导化合物的研究进展

糖尿病是当今全球一个主要的临床和公共健康问题，特别是2型糖尿病占糖尿病的80％以上。目前认为胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌缺陷是2型糖尿病发病机制的2个主要环节。近年来，随着对2型糖尿病发病机制的深入研究，发现了多个药物治疗的新靶点，合成了一系列新活性化合物。现将近几年2型糖尿病治疗新靶标及其新先导化合物的研究进行归纳总结，为新药研发提供一定参考。     

联合应用MAGE-1与IL-18基因疫苗体外抗肝癌作用的实验研究

目的该研究构建重组基因疫苗pcDNA-MAGE-1和pcDNA-hIL-18;探讨联合应用基因疫苗体外抗肝癌免疫治疗的作用。方法基因疫苗分组免疫实验小鼠,在体外验证疫苗免疫后的小鼠脾细胞对MAGE-1阳性和阴性肝癌细胞株的杀伤作用;分别以不同剂量的pcDNA-hIL-18与pcDNA-MAGE-1组合测定免疫鼠脾细胞杀伤率,验证产生高杀伤效应的最佳的pcDNA-hIL-18浓度。结果重组基因疫苗免疫组小鼠脾细胞对两种MAGE-1阳性肿瘤细胞(SMMC-7721、BEL-7402)均有明显的杀伤作用,其杀伤效应与生理盐水组(空白对照),空质粒pcDNA3组(阴性对照)相比差异具有显著性(P<0.01);重组基因疫苗免疫后的小鼠脾细胞对MAGE-1阴性肿瘤细胞(QQY-7701)有一定的杀伤作用,与空白对照及阴性对照免疫组相比差异有显著性(P<0.05);pcDNA-hIL-18+pcDNA-MAGE-1组以(50+100)μg剂量免疫小鼠的脾细胞杀伤效应最高,与pcDNA-MAGE-1和pcDNA-hIL-18组相比差异有显著性(P<0.01)。结论联合应用MAGE-1与IL-18基因疫苗对MAGE-1阳性肿瘤...     

甲状旁腺功能低下症 1 例

中图号Ｒ７２５．８１病例男，８岁，主因发作性抽搐一年就诊。患儿于１９９７－０４自觉手指麻木或疼痛，继之上肢抽动，手中持物落地，约持续１～２ｓ后自行缓解，每２～３月间断性发作一次，当时未引起家长重视，未予任何治疗。于９０ｄ后发作次数增加，２～３ｄ发作一...     

过继免疫治疗对手术后肺癌患者T细胞及其活化抗原表达影响的研究

目的探讨CIK过继免疫治疗对手术后肺癌患者T细胞及其活化抗原表达的影响。方法采用流式细胞术检测40例肺癌患者外周血T细胞表型CD3、CD4、CD8和及其活化抗原标志CD69、CD25、HLA-DR。结果肺癌患者CD3^＋、CD^＋、CD4／CD8比值明显低于对照组并呈显著性差异，而CD8^＋细胞高于对照组（P〈0．01）；肺癌患者CD69、CD3^＋／HLA-DR^＋、CD4^＋／CD25^＋与对照组比较无显著性差异。经CIK治疗后CD3^＋、CD4^＋、CD4／CD8比值都升高，其中CD4^＋细胞与治疗前比较呈显著性差异（P〈0．05），而CD8^＋细胞与治疗前比较降低（P〈0．05）；CD69、CD3^＋／HLA-DR^＋均升高（P〈0．05），CD4^＋／CD25^＋在治疗后有增高趋势，但无显著性差异。结论CIK过继免疫治疗对肺癌患者免疫功能的恢岩具有促讲作用．     

奥拉西坦注射液改善中型颅脑损伤患者神经功能缺失、记忆与智能障碍的效果观察

目的观察奥拉西坦注射液改善中型颅脑损伤患者神经功能缺失、记忆与智能障碍的效果。方法采用随机数字表法将95例中型颅脑损伤患者分为两组,吡拉西坦组给予静脉滴注吡拉西坦注射液,奥拉西坦组给予静脉滴注奥拉西坦注射液,两组均治疗1周为1个疗程,3个疗程结束后对比神经功能缺失、记忆与智能障碍及药物安全性等情况。结果奥拉西坦组国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分低于吡拉西坦组,格拉斯哥昏迷评分(GCS评分)和简明精神状态检测评分(MMSE评分)高于吡拉西坦组,差异均有统计学意义(P<0.01);奥拉西坦组与吡拉西坦组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论奥拉西坦注射液治疗中型颅脑损伤患者疗效确切,能够显著改善患者的神经功能缺失、记忆与智能障碍,在有效保护脑组织和促进患者神经功能修复等方面具有非常重要的意义。     

CEA迷你基因原核表达及其诱导小鼠特异性淋巴细胞增殖的研究

目的 在原核细胞中表达人癌胚抗原(CEA)的迷你基因短肽,纯化及鉴定目的 蛋白,并检测其在小鼠体内的抗原性.方法 利用PCR技术从人基因组中得到一段来源于CEA的DNA序列,其中包含两个编码分别能被HLA-DR4/9、HLA-DR53以及HLA-DR4/7/9型别的人群所识别辅助性T细胞(HTL)表位的迷你基因,构建重组表达质粒pQE30-CEA625-667,在大肠杆菌M15中诱导表达.Westren Blot杂交鉴定、镍凝胶亲和层析法纯化目的 蛋白.3H-TdR掺入法检测目的 短肽诱导的小鼠淋巴细胞增殖反应.结果 CEA625-667短肽在大肠杆菌M15中以包涵体形式表达.Western-blot结果显示,在相对分子质量约6 700处有表达产物与6×his mAb特异性结合带.镍柱纯化后可得到纯化的目的 蛋白.3H-TdR掺入实验所得不同浓度的CEA625-667与小鼠脾细胞共孵育7～9 d后的刺激指数相继达到对照组的10倍以上.结论 成功诱导了CEA625-667短肽的原核表达,通过镍凝胶亲和层析法获得纯度较高的CEA625-667短肽,并证明在一定浓度下目的 短肽可于体外诱导小鼠的特异性淋巴细胞增殖.为CEA625-667迷你基因作为表位疫苗在抗肿瘤方面的进一步研究提供条件.     

体外培养系统中各细胞组分在IL-18诱导的肿瘤特异性CTL中的作用

应用rhIL 18在体外培养系统 (coculturesysteminvitro ,CCS )中诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞 (cytotoxicTlympho cyte ,CTL ) ,探索不同细胞在IL 18起动和促进肿瘤特异性免疫应答方面的作用。采用StemSepTM免疫磁性细胞分离法分离人外周血NK细胞、T细胞及树突细胞 (DC ) ,流式细胞仪分析细胞表型 ,12 5I UdR标记的细胞毒实验检测杀伤活性。结果表明 ,在肿瘤抗原存在的条件下 ,CCS中rhIL 18能够诱导并促进CTL介导的肿瘤特异性杀伤效应 ;并且 ,在rhIL 18诱导肿瘤特异性CTL的过程中 ,rhIL 18、NK细胞、DC及T细胞均起着十分重要的作用 ,缺少任一组份 ,均对诱导肿瘤特异性CTL有明显差异 (P <0 0 1)。提示在CCS中 ,rhIL 18诱导的NK细胞快速杀伤效应及DC的抗原提呈作用 ,在肿瘤特异性CTL产生过程中 ,均起着决定性的作用。     

癌胚抗原基因重组疫苗的构建及免疫效果观察

目的：探讨含癌胚抗原（CEA）部分编码基因的真核重组质粒pIRES-CEAⅢ用于CEA阳性肿瘤免疫治疗可能性。方法：应用基因重组技术构建了含CEA信号肽和Ⅲ区编码序列的真核表达质粒pIRES，CEAⅢ，肌注免疫BALB／c小鼠，再分别应用野生型小鼠肝癌细胞H22及CEAcDNA全序列转染的Hn细胞进行小鼠皮下接种，观察基因重组疫苗对CEA阳性肿瘤的抑制作用及其诱导小鼠细胞毒性T淋巴细胞（CTL）特异性杀伤CEA阳性肿瘤细胞的能力。结果：pIRES-CEAⅢ真核重组质粒免疫组小鼠CEA阳性肿瘤的生长速度趋缓，瘤块较小，与对照组小鼠（免疫空载体质粒和接种野生型H控细胞）相比有明显差异（P〈0．05）；经pIRES-CEAⅢ重组质粒免疫的小鼠脾细胞对H22．CEA（＋）细胞的杀伤率明显升高，差异显著（P〈0．01）；但对H22细胞则没有明显的杀伤作用。结论：pIRES-CEAⅢ作为基因疫苗可以抑制CEA阳性肿瘤在小鼠体内的生长，诱导小鼠CTL对CEA阳性肿瘤细胞的特异性杀伤。