染色体3p14.2区域一个与鼻咽癌呈负相关EST的鉴定

目的：寻找染色体３Ｐ１４．２区域与鼻咽癌相关的表达序列标记,为筛选鼻咽癌候选基因打下基础。方法：运用生物信息学同生比较筛选ＥＳＴ的策略,结合Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和逆转录ＰＣＲ方法,检测３ｐ１４．２区域的相关ＥＳＴＳ在鼻咽癌和正常鼻咽组织中的表达。结果：在３Ｐ１４．２区域筛选到一个在鼻咽癌中低表达的ＥＳＴＷ２３３１２,与正常鼻咽上上以组织相比较,在鼻咽癌细胞株及１３例鼻咽癌活检组织中的５便其表达下调     

消炎痛抗肿瘤作用及体外增敏作用的研究

采用ＭＴＴ法、ＤＮＡ凝胶电泳、流式细胞仪分析技术、原位ＤＮＡ末端脱氧核苷酸转移酶法（ＴｄＴ），观察消炎痛对人结肠癌细胞增殖和凋亡的影响。结果：消炎痛可显著抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡，呈剂量－时间依赖性效应；并可协同５－氟脲嘧啶（５－Ｆｕ）的抗肿瘤细胞增殖作用。提示消炎痛通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡而发挥其抗肿瘤作用。     

SH2-B与结肠癌细胞运动和迁移相关性的研究

目的:分析SH2-B对结肠癌细胞侵袭迁移的影响,探讨结肠癌转移的分子机制。方法:免疫荧光筛选SH2-B低表达结肠癌细胞,用Lipofectamine 2000TM将pcDNA3.1-SH2-B质粒转染至HT-29细胞,细胞划痕实验分析SH2-B对结肠癌细胞HT-29爬行迁移运动的影响,用Boden Chamber分析SH2-B对结肠癌细胞HT-29侵袭运动的影响。结果:HT-29为SH2-B低表达结肠癌系,基因转染后HT-29细胞表达SH2-B显著增高;细胞划痕研究结果表明,SH2-B转染组、空载体转染组和未转染母细胞组迁移细胞数倒置显微镜10个视野分别为867±187、349±121和279±158,SH2-B转染组爬行细胞数显著高于空载体组和未转染细胞组,P均<0.05;Trans-well研究结果显示,转染SH2-B组、空载体转染组和未转染细胞组穿过滤膜细胞数分别为278±107、129±88和112±81,转染SH2-B组透过细胞数显著高于未转染组和空载体转染组,P<0.05。结论:SH2-B可能通过增强结肠癌细胞运动和迁移能力参与结肠癌细胞的侵袭和转移。     

维拉帕米对人舌癌耐药细胞株Tca8113/BLM的逆转作用研究

目的研究维拉帕米（verapami，Vera）对人舌癌耐药细胞Tca8113／BLM的逆转作用和机制。方法采用MTT法检测Vera增加人舌癌亲本细胞Tca8113和耐药细胞Tca8113／BLM化疗药物的敏感性；流式细胞仪检测Vera逆转前后对细胞内阿霉素（ADM）浓度聚积、细胞膜上P-糖蛋白（p-glycoprotein P—gp）和MR-P耐药蛋白的表达；激光共聚焦观察细胞的凋亡。结果Tca8113、Tca8113／BLM细胞对BLM的IC50分别为16．1和86．23，加用10μmol／LVera作用细胞后Tca8113、Tca8113／BLM细胞对BLM的IcsD分别为8．1和8．06。亲本细胞和耐药细胞对BLM的增敏倍数分别为2和12倍，ADM在耐药细胞．Tca8113／BLM中蓄积明显增加（P（0．01），细胞膜上的P—gp荧光强度显著下降（P〈O．01），MPR荧光强度则无明显改变（P〉O．05）。结论Vera能逆转人舌癌耐药细胞Tca8113／BLM对BLM的耐药现象，其逆转机制主要与P—gp的作用降低有关。     

胆囊收缩素刺激小鼠胰腺腺泡肽链的延伸及其分子机制

目的：研究胆囊收缩素（cholecystokinin,CCK）、碳酸胆碱（carbachol,CCh）及血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide,VIP）体外刺激小鼠胰腺腺泡细胞肽链的延伸及其作用的分子机制。方法：采用3H-亮氨酸掺入法分别测定基础状态及CCK,CCh及VIP处理后胰腺腺泡细胞肽链延伸率;Western印迹分析基础状态和上述促分泌素处理后真核细胞延伸因子（eEF2）及其激酶磷酸化水平,进一步用MEK抑制剂（PD98059）、SAPK/P38抑制剂（SB202190）、mTOR抑制剂（rapamycin）处理细胞,分别阻断MEK,SAPK/P38和mTOR3种信号通路和磷酸酶抑制剂花萼海绵诱癌素A预处理再用CCK处理胰腺腺泡,分析eEF2及其激酶eEF2K磷酸化水平。结果：体外除VIP外,其他2种促分泌素均能诱导胰腺腺泡细胞肽链的延伸。CCK和CCh处理后真核细胞延伸因子eEF2Thr56去磷酸化及其激酶Ser366磷酸化水平增加,PD98059,SB202190和rapamycin特异性抑制MEK,SAPK/P38和mTOR信号通路以及磷酸酶抑制剂花萼海绵诱癌素A均能部分性逆转CCK诱导的eEF2去磷酸化。结论：CCK可通过MEK,SAPK/P38和mTOR信号通路诱导真核细胞延伸因子eEF2Thr56去磷酸化,参与小鼠胰腺腺泡细胞肽链的延伸调节。     

SH2-Bβ调控JAK2/STAT3在肥胖症发病中的分子机制

通过分子牛物学方法分析过表达瘦素受体细胞株和接头蛋白SH2-Bβ基因敲除小鼠中Janus激酶2(JAK2)、信号转导子和转录激活因子3(STAT3)酪氨酸磷酸化水平,ELISA法测定SH2-Bβ基因敲除小鼠血清瘦素水平.结果 显示,在离体SH2-Bβ显著增强瘦素刺激的JAK2活性和STAT3磷酸化,在SH2-Bβ敲除小鼠,瘦素刺激的JAK2活性和STAT3磷酸化水平显著降低,SH2-Bβ敲除小鼠的空腹和餐后血清瘦素水平均下降,体重增加.因此,SH2-Bβ是一内源性瘦素敏感性增强子,通过瘦素JAK2/STAT3信号通路参与体重的调节.     

筛选喉癌相关基因LCRG1的有效沉寂序列

目的:拟采用RNA干扰技术筛选有效的针对LCRG1基因的打靶序列.方法:首先采用PCR定点突变技术改造pSuper载体,而后利用该改造后的载体构建针对LCRG1基因的5对打靶序列的真核表达载体.将构建的重组pSuper 362,398,432,789,903表达载体和pSuper空白载体分别转染Hela细胞,经抗性药物筛选获得抗性细胞克隆和池克隆;通过RT-PCR及荧光定量PCR鉴定阳性克隆,进行平板克隆集落形成试验,以检测打靶序列沉寂LCRG1基因mRNA表达水平的效果.结果:应用PCR定点突变技术改造的pSuper载体,可被BglⅡ酶切;利用RT-PCR和荧光定量PCR检测各重组载体转染细胞池克隆LCRG1 mRNA的表达发现,362组,398组,432组的基因均能封闭内源性LCRG1基因表达,尤以362组为显著;鉴定362组筛选的各个抗性克隆,发现A2和A5克隆的LCRG1 mRNA表达水平明显降低.平板克隆实验结果提示362组的A2,A5和池克隆的细胞增殖能力明显强于载体和空白对照组(P<0.05).结论:成功改建了pSuper真核表达载体;362 siRNA相对其他siRNA具有较好的打靶效果,这对于应用RNAi方法研究LCRG1基因的功能和其作用分子机制具有重要的指导意义.     

益气解毒颗粒对大鼠鼻咽癌变中端粒酶和端粒酶RNA表达的影响

目的 :探讨中药复方益气解毒颗粒防治鼻咽癌的作用机制。方法 :用二亚硝基哌嗪 (DNP)诱导大鼠鼻咽癌动物模型 ,观察益气解毒颗粒对大鼠鼻咽癌变中病理形态改变以及端粒酶和端粒酶RNA表达的影响。定期分批处死大鼠 ,取鼻咽组织作病理学检测 ,用PCR -ELISA和NestedRT -PCR法检测大鼠鼻咽组织端粒酶的活性和端粒酶RNA的表达。结果 :灌服益气解毒颗粒大鼠鼻咽癌发癌率 0 (0 /5 ) ,明显低于盐水对照组 80 % (4/5 ) (包括原位癌和浸润癌 ) ;其端粒酶活性为 0 2 4± 0 11,也明显低于对照组 0 93± 0 2 3(P <0 .0 5 ) ;维甲酸组发病率为 0 (0 /5 ) ,端粒酶活性为 0 2 7± 0 13;各组端粒酶RNA均为阳性。维甲酸组大鼠于 2 15～ 30 8d间逐步死亡。结论 :益气解毒颗粒能阻断DNP诱导大鼠鼻咽癌变 ,且抑制鼻咽上皮癌变细胞端粒酶的激活     

太原市某大学感染性腹泻爆发调查报告

2005年4月4日21:00时,太原市卫生监督所接到万柏林区卫生局和万柏林区疾病预防控制中心的报告,太原某大学南     

LCRG1 SUPPRESSES TUMOR GROWTH IN VIVO BY LIPOSOME-MEDIATED GENE TRANSFER

Laryngeal Carcinoma is one of the common cancers harming to the health of human. Like other carcinomas, laryngeal carcinogenesis is a multistage process involving changes of multiple genes-the activation of oncogenes and the repression of tumor suppressors. Many data have showed that the expression of oncogenes such as Ras, C-myc, EGFR, Cyclin D1 are increased[1-4] and the tumor suppressor genes such as p53, Rb are mutated[1] in laryngeal carcinomas. However, till now its molecular mechani…