ERK在NGF诱导PC12 细胞分化中的作用

目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)在NGF。诱导的PC12细胞分化中的作用机制。方法以NGF处理PC12细胞建立分化模型,运用免疫印迹检测不同浓度不同作用时间时NGF对ERK1／2蛋白和磷酸化ERK1／2蛋白水平的影响,并观察MAPK／ERK激酶(MEK)抑制剂U0126对NGF诱导的细胞形态学改变的影响。结果ERK1／2蛋白的磷酸化呈现NGF剂量和时间依赖性。NGF作用细胞5min即可观察到明显的ERK1／2蛋白磷酸化,持续1h左右,2h时降低到初始水平,而细胞形态的改变出现在NCF作用12h以后。倒置相差显微镜观察可见PC12细胞分化的程度与ERK1／2活化持续的时间正相关,U0126可完全即时抑制ERK1／2的活化,而ERK1／2活化的抑制可完全阻断。NGF诱导的PC12细胞分化。结论ERK1／2的活化是PC12细胞发生分化的必需事件,其活化时间的长短对分化具有决定作用。     

武汉地区85名汉族人群载脂蛋白(a)基因5′侧翼序列多态性及与脂蛋白(a)水平的关系

应用多策酶链反应-单链构家多态性法分析载脂蛋白（a）基因5'侧翼384bp范围内的序列多态性。武汉地区85名健康汉族人群载脂蛋白（a）基因有二种基因型，其频率分别为：基因型I型0．812，基因型Ⅱ型0．188．其中基因型Ⅲ型受检者的脂蛋白（a）均值有升高趋势，但这种差别没有显著性．没有发现此单链构表多态性基因型与血浆脂蛋白（a）浓度间的相关性。     

胸水和血清中的腺苷脱氨酶、乳酸脱氢酶水平及其比值在结核性胸膜炎诊断中的价值

目的：探讨胸水与血清中的腺苷脱氨酶（ADA）与乳酸脱氢酶（LDH）的含量及其比值在结核病诊断中的价值。方法随机抽取2014年上半年该院收治的结核性胸膜炎患者50例（结核组）,肝性胸水（对照组）20例,进行胸水和血清的 ADA、总蛋白（TP）、LDH 测量,计算其相应的比值,并绘画 ROC 曲线。计算 ADA 和 LDH 在诊断结核性胸膜炎的敏感性、特异性和准确性。结果结核组中 ADA、TP、LDH 含量及其比值明显高于对照组,差异显著有统计学意义（P ＜0．05）。结核组胸水中的ADA 联合 LDH 诊断敏感度、特异度和准确度分别为82．0％,94．0％和88．0％。联合检测的敏感度和准确度均高于任一单项检测。结论胸水与血清中的 ADA 与 LDH 及其比值在结核胸膜炎诊断中具有重要临床价值。     

发育、成年及老年期大鼠脑中Cdk5,p35,p39的表达及Cdk5激酶活性变化

目的 研究不同发育时期大鼠脑中Cdk5,p35,p39的表达及Cdk5激酶活性变化。方法 免疫印迹测定胚胎12天至出生后18个月大鼠脑中Cdk5,p35,p39的表达,通过测定Cdk5特定底物－组蛋白H1被磷酸化的程度检测鼠脑中Cdk5激酶活性。结果 从胚胎12天至出生7天,大鼠脑中Cdk5蛋白水平逐渐增加到峰值并保持于18个月龄。在胚胎12天时,Cdk5激酶活性和p35的蛋白水平较低,在胚胎18天至出生14天期间最高,然后在3个月龄至18个月龄的成年鼠和老年鼠脑中逐渐减少。与之相比,p39的表达方式与Cdk5和p35正好相反。自P14至18M龄鼠脑中,大脑皮质及海马的p35表达和Cdk5激酶活性高于小脑或纹状体。结论 大鼠发育早期,Cdk5激酶复合物的活化与神经发育密切相关,其生理作用在大脑皮质及海马有区域特异性。     

诱导多功能干细胞的研究进展

背景：由于胚胎干细胞移植存在致瘤性和伦理学争议,有关胚胎干细胞的研究及临床应用存在较大的限制。2006年Yamanaka实验室利用Oct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc4种因子将鼠成纤维细胞重编程为诱导多功能干细胞,标志着一种新型类胚胎干细胞的问世。目的：了解诱导多功能干细胞的研究进展和应用前景。方法：由第一作者检索2006/2010PubMed数据库（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed）及万方数据库（http：//g.wanfangdata.com.cn/）有关诱导多功能干细胞的产生、细胞特征、产生技术的研究进展及应用前景等方面的文章,英文检索词为＂induced pluripotent stem cells,defined factors,reprogramming,vectors,disease＂,排除重复性研究,共保留其中的69篇进行归纳总结。结果与结论：诱导多功能干细胞研究在诱导因子种类,因子导入方式,重编程效率及应用研究等诸多方面取得进展。然而体细胞重编程为诱导多功能干细胞仍存在一定的风险,重编程效率还非常低。一旦解决诱导多功能干细胞的安全性和重编程效率问题,诱导多功能干细胞就可被广泛应用于疾病模型,药物测试,细胞移植及患者和疾病特异性多功能干细胞的建立等诸多方面。     

中西药联合治疗布氏杆菌病

目的观察复方甘草酸单胺片、吡嗪酰胺、利福平联合治疗布氏杆菌病的临床疗效及安全性。方法将120例患者随机分为治疗组与对照组。治疗组采用复方甘草酸单胺片（3片/次,1次/d）、吡嗪酰胺（1.5 g/d）、利福平（200 mg/次,2次/d）口服治疗;对照组采用左氧氟沙星（200 mg/次,2次/d）联合多西环素（200 mg/次,1次/d）治疗,2组均以3周为1疗程,共治疗2疗程,对比2组临床疗效及不良反应发生情况。结果治疗组患者治疗后总有效率为96.7%,对照组为73.3%,治疗组总有效率显著高于对照组,组间比较,P〈0.05;治疗组不良反应发生率为10.0%（6/60）,对照组为30.0%（18/60）,2组比较,P〈0.05。结论复方甘草酸单胺联合吡嗪酰胺、利福平治疗布氏杆菌病能明显改善临床症状,缓解疼痛,抗感染,提高患者免疫力,且无明显不良反应。     

人脐带间充质干细胞的体外免疫调节特性

文题释义： 植物血凝素：是一种有丝分裂原,能激活小淋巴细胞转化为淋巴母细胞,继而分裂增殖,释放淋巴因子,并能提高巨噬细胞的吞噬功能。作为干扰素诱导剂可以刺激机体产生白细胞介素2和干扰素;还可以刺激机体产生非特异性抗体。由于其较难提纯,且成本极高,所以一直以来仅在实验室中作为刺激淋巴细胞增殖的试剂。 免疫调节：是人脐带间充质干细胞主要生物学特性之一,体现在抑制免疫细胞的增殖,调节淋巴细胞亚群的分化及相关细胞因子的产生,维持免疫平衡。 背景：人脐带间充质干细胞被应用于治疗多种疾病,包括与免疫相关疾病的临床应用研究。深入研究人脐带间充质干细胞免疫调节特性及其作用途径,是其临床应用的基础。 目的：探讨人脐带间充质干细胞的免疫调节特性及作用途径。 方法：人脐带间充质干细胞与荧光染料CFSE标记的人外周血单个核细胞直接共培养(二者比例为1∶5,   1∶10,1∶20),或在Transwell非接触体系中间接共培养(二者比例为1∶5),流式细胞术检测植物血凝素刺激的外周血单个核细胞增殖情况,Th1、Th17及Treg淋巴细胞亚群的比例;ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α及干扰素γ水平。 结果与结论：①直接接触共培养时,人脐带间充质干细胞对植物血凝素刺激的外周血单个核细胞增殖呈显著的剂量依赖性抑制;采用非接触培养体系,外周血单个核细胞的增殖未受明显抑制;②人脐带间充质干细胞共培养显著抑制炎性淋巴细胞Th1、Th17亚群的比例,升高抑制性淋巴细胞Treg的比例;③人脐带间充质干细胞共培养显著性抑制外周血单个核细胞的肿瘤坏死因子α及干扰素γ分泌水平;④结果显示,人脐带间充质干细胞通过细胞间相互接触而对免疫细胞的增殖、分化及其炎症因子的产生发挥抑制性调节作用。 ORCID: 0000-0003-4450-086X(刘梦婷) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

TDAG51基因在PC12细胞中的过表达及其致凋亡作用

目的　探讨TDAG5 1基因在PC12细胞中的表达及其作用机制。方法　实验分为3组,实验组用绿色荧光蛋白质粒(p EGFP - C1 )载体把外源性TDAG5 1基因转染的PC12细胞;空载体对照组用p EGFP- C1 转染的PC12细胞;对照组未转染任何试剂的PC12细胞。在转染后2 4 h、4 8h、72 h收集细胞,用Western blotting检测过表达的TDAG5 1蛋白;转染后84 h用相差显微镜观察PC12细胞形态的变化;Hoechst332 5 8染色观察细胞核形态变化;检测凋亡执行蛋白Caspase- 3的变化。结果　TDAG5 1基因在PC12细胞中高表达;TDAG5 1基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,胞体变圆,轴突缺失;荧光显微镜下观察PC12细胞可见胞核固缩、染色质凝集,并可见核碎片;前Caspase- 3蛋白活化被切割;活化的17k Da Caspase- 3随TDAG5 1蛋白的作用时间延长而增多。结论　过表达TDAG5 1基因可诱导PC12细胞凋亡。     

他克林对星形孢菌素诱导NG108—15细胞凋亡的保护作用

目的：用星形孢菌素诱导NG108－15细胞损伤建立凋亡模型,观察乙酰胆碱酯酶（AChE)抑制剂他克林是否具有抗凋亡作用。方法：LDH活性测定判断细胞损伤状况,DNA染料Hoechst 33342染色观察细胞核形态,SDS－PAGE和Western blot印迹分析Bax及Bcl-2的蛋白表达水平。结果：NG108－15细胞经0．1μmol/L星形孢菌素处理24h,细胞内大量LDH释放至培养液中,用0．1mmol/L他克林预处理2h可使LDH释放量由45％减至32％（P＜0．01）。他克林预处理能延迟和减少星形孢菌素诱导的Bax表达的上调,同时增加了星形孢菌素诱导12－24h后Bcl-2的表达水平。结论：他克林预处理对星形孢菌素诱导的凋亡性损伤有显著保护作用,可能通过抑制或延迟Bax表达及促进Bcl-2表达来发挥神经保护作用。     

唾液富脯蛋白的分离提纯

收集刺激性腮腺唾液１０００ｍｌ，利用先进的生化技术分离提纯出唾液富腈蛋白（ＰＲＰｓ）。经硫酸铵浓度差超速离心后得到初步纯化的ＰＲＰｓ，再经葡聚糖凝胶（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）Ｇ－７５过滤和ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－２５离子交换层析后可得到ＰＲＰｓ的６个组份。其分子量大小分别为１４３００、１０８００、１１０００、１２３５０、１３０００和１２５８０ｕ；等电点范围在４．１８￣４．６０之间。６种组分的ＰＲ