常染色体显性多囊肾病患者与正常成人尿液的定量比较蛋白质组学分析

目的搜索常染色体显性多囊肾病(ADPKD)患者与正常成人尿液蛋白质组中有丰度差异的蛋白质成分。方法制备ADPKD患者(PKD1突变)及正常成人尿液蛋白组样品，同位素编码的亲和力标签法标记蛋白质、筛选被标记肽段，二维液相色谱一串联质谱法分离鉴定被标记肽段，从而鉴定蛋白质。通过计算两同位素试剂标记的相同肽段指纹峰面积比，寻找有丰度差异的蛋白质。根据被鉴定肽段的可信度，从鉴定出的蛋白质中选出6种，免疫印迹法验证其在两尿液蛋白组样品中的丰度差异。结果两尿液蛋白质组共鉴定出尿蛋白质106种，ADPKD患者尿液中水平较正常上调者48种，下调者45种。其中多囊蛋白1、肝细胞生长因子、单核细胞趋化蛋白3及孕激素受体等5种蛋白丰度差异为免疫印迹所证实。结论包括多囊蛋白1在内的多种蛋白质成分在ADPKD患者尿液中丰度发生改变，差异蛋白包括生长因子、凋亡调节蛋白、细胞外基质成分、受体、参与胞浆运输的蛋白质、酶类、细胞信号蛋白、转录因子及转录调节因子等．这些蛋白质信息可能为寻找与ADPKD发病相关的蛋白提供部分实验依据。     

急性肾损伤诊治进展

急性肾损伤是一种常见的临床综合征,主要表现为肾功能急剧下降,其诊断有赖于血肌酐的升高和尿量的减少.急性肾损伤在住院患者尤其是重症患者中十分常见,目前尚无有效的治疗方法,严重时需进行肾脏替代治疗.近年来,急性肾损伤时肾脏替代治疗的方式和剂量一直是研究的热点.重症急性肾损伤患者病死率高,部分存活患者肾功能可完全或部分恢复,脱离透析,但还有部分患者会直接进展到终末期肾病.此外,急性肾损伤患者恢复后发生慢性肾脏病的风险也大大增加.因此,早期诊断、早期干预是改善急性肾损伤预后的关键.用血肌酐水平和尿量对急性肾损伤进行早期诊断不够敏感.目前,许多新的生物学标志物正在研究中,但其有效性还有待验证.     

上海市汉族人群中与PKD2基因紧密连锁的三个微卫星DNA的多态性研究

目的 研究与PKD2基因紧密连锁的3个微卫星DNA D4S1534、D4S1542、D4S423在上海地区汉族人群中的多态性，为常染色体显性遗传性多囊肾病的基因诊断奠定基础。方法 采用聚合酶链反应—毛细管电泳—基因扫描方法，对80名无亲缘关系的上海市汉族志愿者进行了上述3个微卫星DNA遗传多态性的分析。结果 在上述人群中，发现D4S1534、D4S1542和D4S423分别有9、4和12种等位基因片段，其长度分别在144—160bP、211—217bP和103—125bP之间，杂合度和多态信息含量分别为0．862和0．849，0．462和0．448，0．900和0．898，其基因频率分布符合Hardy—weinberg平衡。结论 D4S1534、D4S1542和D4S423在上海市汉族人群中具有较高的多态性，是理想的遗传标记，可用于常染色体显性遗传性多囊肾病的遗传异质性研究及分子诊断。     

应用基因表达谱芯片研究多囊肾组织基因表达的变化

目的应用基因芯片技术研究多囊肾与正常肾组织基因表达谱的差异,比较其表达水平的不同,为多囊肾病发病机制的研究提供线索. 方法按一步法抽提多囊肾组织和正常对照肾组织的总RNA并纯化mRNA;将4 096种人类基因PCR产物用Cartesian Pixsys 7500点样仪按微矩阵排列制成基因芯片;将等量的多囊肾组织和正常肾组织mRNA分别逆转录合成以Cy5和Cy3标记的cDNA一链做探针,混合后与上述基因芯片杂交.用Scan Array 5000扫描仪扫描芯片荧光信号图像,用软件进行数字化处理和分析后比较两种组织基因表达谱的差异. 结果在多囊肾组织与正常肾组织中存在414个差异表达基因,其中119个基因在多囊肾组织中低表达,295个基因在多囊肾组织中高表达. 结论本研究从多囊肾组织中筛选出大量的差异表达基因,说明这些基因可能参与了多囊肾病发生及发展过程,从而为下一步研究发病机制提供了更多的靶基因.     

霉酚酸酯与雷帕霉素对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡影响的比较

目的:观察霉酚酸酯[MMF)对多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖和凋亡的影响,并与雷帕霉素(RAPA)比较.方法:采用原代培养的人多囊肾囊肿衬里上皮细胞,用不同浓度MMF和RAPA分别作用48 h和72 h.MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;Annexin V-FITC流式细胞术测定细胞凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构改变.结果:MMF和RAPA均能抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,呈明显的量效和时效关系.作用48 h后MMF使细胞阻滞在S期,RAPA使细胞阻滞在G0/G1期.MMF和RAPA均可诱导细胞凋亡,最大凋亡率分别为(5.53±0.27)%和(4.36±0.10)%;电镜下可见典型的凋亡改变.结论:MMF与RAPA相比同样能明显抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,诱导细胞凋亡,但其对细胞增殖的抑制作用较RAPA弱.     

Ⅱ型多囊肾致病基因PKD2突变的研究进展

常染色体显性遗传型多囊肾病（ADPKD）是一种十分常见的遗传病，发病率为1‰，我国目前约有150万患者。其临床表现为多发性肾脏囊肿、持续性高血压和泌尿系感染等症状，由于缺乏有效治疗手段，多数患者发展为终末期肾衰而不得不进行肾脏替代治疗或肾移植手术。目前已知ADPKD的主要致病基因有Ⅰ型和Ⅱ型多囊肾致病基因（PKD1和PKD2），分别占ADPKD患者的85％和15％。     

慢性肾功能衰竭合并横突骨折一例报告

慢性肾功能衰竭合并横突骨折一例报告许臻，赵学智，梅长林关键词慢性肾功能衰竭；横突骨折中国图书资料分类法分类号Ｒ６９２．５０６；Ｒ６８３．６１临床资料患者，男，４２岁，因反复腰酸、血尿４年余，加重伴发热１月余，于１９９５年４月１４日入院。患者于４年前因...     

缺氧诱导因子1α及氧自由基在肾缺血再灌注损伤中的表达

氧自由基参与肾缺血引起的急性肾衰的病理过程。研究发现，缺氧诱导因子1α（HIF-1α）可以增强缺血心肌对缺血缺氧的耐受性。HIF-1α是否参与肾脏缺血再灌注损伤过程及其与氧自由基联系尚未见相关报道。我们通过建立大鼠肾缺血再灌注模型，为临床防治肾缺血再灌注损伤提供依据。     

阿霉素肾病模型大鼠细胞因子的变化及低分子肝素对其影响

目的　探讨细胞因子在阿霉素 (ADR)肾病模型大鼠中的作用及低分子肝素 (LMWH)对其影响。方法　健康SD♂大鼠随机分为 3组 ,正常对照组 (Ⅰ组 ) 12只 ,尾静脉一次注入生理氯化钠溶液 1ml,后予生理氯化钠溶液 1ml,ip ,qd ;模型组 (Ⅱ组 )12只 ,尾静脉一次注入阿霉素 6 .0mg·kg-1,后予生理氯化钠溶液 1ml,ip ,qd ;低分子肝素组 (Ⅲ组 ) 12只 ,尾静脉一次注入阿霉素 6 .0mg·kg-1,后予LMWH 2 0 0IU·kg-1,ip ,qd ,所有各组共给药 14d。所有的大鼠于注射前及注射后第 3、7、14d抽血测肿瘤坏死因子a、白介素 6及放入代谢笼留 2 4h尿测蛋白定量。结果　用药后Ⅱ组、Ⅲ组的TNF a、IL 6水平、尿蛋白定量上升 ,且TNF a,IL 6水平与尿蛋白程度相关 ,与Ⅰ组比较 ,Ⅱ组有显著性差异 (P <0 .0 1)、Ⅲ组有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;Ⅱ组与Ⅲ组比较有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论　本实验提示TNF a ,IL 6水平与阿霉素肾病模型大鼠的尿蛋白程度有关 ,LMWH能减轻TNF a ,IL 6对肾小球的损害。     

载脂蛋白D在常染色体显性多囊肾病中的表达及对囊肿衬里上皮细胞增殖的影响

目的探讨载脂蛋白D(apolipoprotein D,ApoD)在常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)发病中的作用。方法采用免疫组织化学及蛋白质印迹方法分析ApoD在ADPKD患者肾脏囊肿组织中的表达;蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测Han:SPRD大鼠肾组织ApoD蛋白和基因表达的变化。应用MTT法检测人重组ApoD蛋白对ADPKD囊肿衬里上皮细胞(WT9-12)增殖的影响;流式细胞术检测经人重组ApoD蛋白作用后WT9-12细胞的凋亡情况及细胞周期改变。结果ADPKD患者及Han:SPRD杂合型大鼠(cy/+)肾组织中ApoD表达量分别低于正常人及Han:SPRD正常大鼠(+/+)肾组织(P<0.05,P<0.01)。8、12、16、24周龄Han:SPRD杂合型大鼠(cy/+)肾脏中ApoD基因表达量均低于同周龄Han:SPRD正常大鼠(+/+)(P<0.05)。人重组ApoD蛋白以100、200、400 ng/ml作用于WT9-12细胞,作用48 h细胞增殖抑制率分别为8.21%、7.59%、8.07%(P<0.05),作用72 h细胞增殖抑制率分别为8.62%、6.43%、9.42%(P<0.05)。人重组表达ApoD蛋白以400 ng/ml浓度刺激细胞72 h,对细胞凋亡无明显影响,但可使G1期细胞增加8.26%,S期细胞减少8.09%(P<0.05)。结论ApoD蛋白可能通过调节细胞周期减弱WT9-12细胞增殖,其表达减少可能在ADPKD的发病过程中具有一定作用。