PI3K/Akt信号通路在硫化氢保护PC12细胞对抗化学性缺氧损伤的作用

目的探讨硫化氢(H2S)对PC12细胞PI3K/Akt信号通路的影响及该通路在H2S神经保护中的作用。方法Western blot法检测H2S供体硫氢化钠(NaHS)处理PC12细胞诱导Akt磷酸化的水平;CCK-8比色法检测细胞存活率;应用碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率。结果应用不同浓度NaHS处理PC12细胞30 min,在50～400μmol.L-1浓度范围内,呈浓度依赖性地上调Akt磷酸化的水平,但随着NaHS浓度的增加,磷酸化Akt表达量逐渐下降;Ly294002明显抑制了NaHS对Akt磷酸化水平的上调作用。NaHS预处理可以保护PC12细胞对抗600μmol.L-1CoCl2诱导的损伤,使细胞存活率提高及细胞凋亡率降低。而在预处理前使用PI3K/Akt信号通路抑制剂Ly294002,则明显地减弱了H2S的神经细胞保护作用。结论 H2S可通过激活PI3K/Akt信号通路保护PC12细胞对抗化学性缺氧损伤。     

彩色多普勒超声对主动脉夹层动脉瘤的诊断价值

目的探讨彩色多普勒超声对主动脉夹层动脉瘤的诊断价值。方法对2003年4月至2011年3月经超声诊断的17例主动脉夹层动脉瘤患者资料进行回顾性分析。结果超声能直观显示剥脱的主动脉内膜及范围、内膜破口和血流改变,且无创、可重复、敏感性高。结论超声检查为诊断主动脉夹层动脉瘤的首选方法。     

乌榄叶水提取物对大鼠离体心脏灌流的作用探究

目的探究乌榄叶水提取物对大鼠离体心脏的冠脉流量、心肌收缩力及心率的影响。方法采用Langendorff离体心脏灌流法,通过MedLab生物信号采集处理系统,观察药物对正常大鼠离体心脏的冠脉流量、心肌收缩力及心率的作用。结果乌榄叶水提取物对大鼠冠脉流量作用效果与丹参的类似,与生理盐水空白组比较差异有统计学意义,具有稳定和增加冠脉流量作用,给药后前6 min表现为加强心肌收缩力作用,而后均逐渐减弱恢复。心率在整个过程中持续下降,且下降速率快。结论乌榄叶水提取物对冠脉流量和心肌收缩力具有先增加后减少至给药前状态的双向作用,并有较快、较强的慢心率作用。结果提示乌榄叶可能有利于降低心脏耗氧量,维持心功能,起保护心肌的作用。     

静脉注射胺碘酮治疗急性心肌梗死合并室性心动过速的临床研究

目的观察静脉注射胺碘酮治疗急性心肌梗死合并室性心动过速的临床疗效及其安全性。方法选择急性心肌梗死合并室性心动过速患者29例,静脉注射胺碘酮后观察室性心动过速的控制情况,同时密切观察用药前后血压、心率、P-R间期、QRS波时限、QTc间期变化情况及药物的不良反应。结果静脉注射胺碘酮能终止急性心肌梗死合并室性心动过速,治疗后的总有效率为93.1%;用药前后患者血压、P-R间期、QRS波时限比较差异均无显著性(P>0.05),但心率和QTc间期比较有显著性差异(P<0.01或<0.05)。结论静脉注射胺碘酮治疗急性心肌梗死合并室性心动过速患者安全、有效。     

短暂脑缺血再灌注后突触蛋白Ⅰ表达与细胞凋亡

目的：观察短暂脑缺血再灌注对与神经元的早期发育和再生相关的突触蛋白Ⅰ及神经细胞凋亡的影响，进一步了解神经系统的可塑性。方法：实验于2003年于同济医院神经内科实验室进行。①分组：取75只Wister大鼠随机分为模型组（n=51）、假手术组（n=18）和正常对照组（n=6）3组。假手术组18只和模型组18只分为再灌注1，3，6，12，24和72h 6个亚组，进行突触蛋白Ⅰ检测；正常对照组6只和模型组剩余的33只大鼠（分为再灌注1，3，6，12，24，48和72h7个亚组）分别进行TUNEL阳性细胞检测、形态学观察和流式细胞仪检测，需获取数据时至少检测2只大鼠。②造模：模型组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型，缺血10min后再灌注；假手术组不插入线栓，其余步骤同模型组；正常对照组不干预。③观察指标：于相应时间点麻醉状态下处死取脑，应用免疫组织化学的方法观察缺血侧额顶叶皮质突触蛋白Ⅰ表达的动态变化，同时采用荧光显微镜、流式细胞仪和脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测细胞凋亡情况，分析两者之间的关系。结果：经补充后72只大鼠进入结果分析。①缺血侧额顶叶皮质突触蛋白Ⅰ的表达：模型组再灌注12h内无明显变化，再灌注24h低于假手术组（0．199&;#177;0．006，0.238&;#177;0．008，P〈0．01），至72h恢复至假手术组水平。②细胞凋亡率：模型组再灌注24，48和72h均高于正常对照组[（12．57&;#177;9．83）％，（13．56&;#177;2．28）％,（16．68&;#177;0．66）％，（4．65&;#177;0．03）％，P〈0．05]。③TUNEL阳性细胞率：正常对照组和模型组再灌注0～24h均未见阳性细胞，再灌注48和72h分别为（47．50&;#177;3．85）％和（62．66&;#177;13．06）％。结论：短暂脑缺血再灌注后存在着突触蛋白Ⅰ表达的短暂降低，且与凋亡细胞的出现在时间上非常吻合，提示短暂脑缺血再灌注后存在失神经及其后的神经再获现象，这可能与DNA的损伤和修复有关。     

急性脑梗死血清肿瘤坏死因子变化与免疫功能

目的探讨脑梗死血清TNF变化特点及其与免疫功能关系.方法测定46例患者血TNF、T淋巴细胞亚群、Ig水平并与30例对照组比较.结果脑梗死组TNF、IgA、IgM、CD4/CD8比对照组显著升高,经治疗2周后TNF仍处于较高水平,与治疗前比较无显著性差异.结论血TNF变化及细胞与体液免疫的紊乱状态,是造成脑动脉粥样硬化、血栓形成的重要因素,阻断TNF的表达及改善免疫功能对预防脑梗死有一定意义.     

突触蛋白-I反义寡核苷酸对体外模拟胚胎干细胞移植治疗脑缺血的影响

目的探讨突触蛋白-I(synapsin-I)在胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)移植治疗脑缺血过程中的作用,寻求这一过程的可调控点或调控切入点。方法采用Transwell小室共培养ESC和遭受缺血缺氧打击的已分化PC12细胞,模拟ESC移植迁移的过程,建立ESC移植治疗脑缺血的离体模型。采用Hoechst染色法和流式细胞仪计算ESC的迁移率,然后转染Synapsin-I反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,AS ONs)以抑制ESC的Synapsin-I表达,观察转染后ESC迁移能力的改变。结果未分化ESC的迁移能力明显高于已分化ESC。遭受缺氧缺血打击后的PC12细胞比未遭受缺氧缺血打击的PC12细胞更能吸引ESC的迁移。转染Syn-apsin-I AS ONs后ESC的迁移能力明显降低,转染组与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在ESC移植治疗脑缺血的离体模型中,ESC的迁移能力受宿主细胞内环境的影响,并可能与ESC自身Synapsin-I的表达水平有关,Synapsin-I可能参与了ESC移植治疗脑缺血过程的调控机制。     

突触蛋白-Ⅰ反义寡核苷酸对胚胎干细胞体外神经分化过程的影响

目的 探讨突触蛋白-Ⅰ在体外诱导胚胎干细胞(ESC)向神经细胞分化过程中的作用,寻求这一过程的可调控点或调控切入点.方法 采用"五步法"体外诱导ESC向神经细胞分化,于不同诱导阶段转染突触蛋白-Ⅰ反义寡核苷酸,观察转染后ESC的形态学、分化效率及其他神经特异性蛋白表达的变化.同时以突触蛋白-Ⅰ反义寡核苷酸对PC12细胞诱导过程的影响作参照.结果 胚胎干细胞分化的第3阶段反义链组的突起伸长速度较正常组和正义链组减慢,分化的神经前体细胞[nestin(+)]比例较正常组和正义链组明显减少(68.5%±4.2% vs 76.2%±5.1%和75.8%±4.9%,P＜0.05).第4阶段反义链组所扩增的神经前体细胞[nestin(+)]比例较正常组和正义链组明显减少(75.1%±4.7% vs 90.2%±4.3%和88.7%±4.5%,P＜0.01).第5阶段反义链组细胞之间的联系较正常组和正义链组减少,神经元样细胞[MAP2(+)]的比例较正常组和正义链组减少(30.7%±3.2% vs 41.2%±2.7%和40.5%±2.4%,P＜0.05).PC12细胞反义链组于诱导第1、4、7、10天细胞突起长度均较正常组和正义链组短,细胞分化率(0.33%±0.46%、9.78%±3.47%、45.3%±7.98%和34.2%±5.89%)显著低于正常组(1.81%±0.40%、45.13%±4.17%、90.26%±4.68%和84.66%±4.81%)和正义链组(P＜0.01).结论 抑制突触蛋白-Ⅰ的表达可导致胚胎干细胞向神经细胞分化的进程滞后和神经分化效率降低,提示突触蛋白-Ⅰ在胚胎干细胞的体外神经分化过程中各阶段均起着重要的作用,可能参与了其中的调控机制.     

密闭容器中小鼠呼吸测量方法

目的建立一种密闭容器中小鼠呼吸测量方法。方法将小鼠放进直接连接压力换能器的密闭容器中，当小鼠呼吸时，肺的扩张和收缩改变了密闭容器的压力，压力换能器将密闭容器内气体压力的变化信号引导至信号分析系统从而描记出曲线。结果测量出小鼠缺氧全程密闭容器的压力一时间曲线变化图以及呼吸频率和呼吸幅度的变化数据。结论该描记方法顺应和符合小鼠的肺通气过程，由压力换能器描记出的曲线基本上可以代表小鼠的呼吸状况，是一种简单有效的在密闭容器中测量小鼠呼吸的方法。     

新型隐球菌脑膜炎误诊1例报告

<正>新型隐球菌性脑膜炎(CNM)是新型隐球菌感染所引起的亚急性或慢性脑膜炎,是中枢神经系统最常见的真菌感染,病情重,死亡率高,易误诊。笔者就我院近期误诊为结核性脑膜炎的1例新型隐球菌性脑膜炎进行临床分析。现报告如下。1病例摘要患者,男,50岁,2014年3月3日开始无诱因出现双颞侧头痛,针刺样,疼痛症状持续,咳黄痰,伴畏寒发热,体温最高达38.3℃,恶心、呕吐3次,均为胃容物。起病期间患者一直按上呼吸道感染自行治疗,病情无好转。3月13日收入我科治疗。