刺五加皂苷抗乳腺癌细胞活性研究

目的研究刺五加精制皂苷的体外抗人乳腺癌细胞MCF-7活性。方法香草醛-高氯酸比色法测定刺五加总皂苷含量,经大孔树脂D101梯度洗脱和丙酮沉淀纯化皂苷;MTT法研究该皂苷对乳腺癌细胞MCF-7增殖的作用。结果刺五加总皂苷含量为64.75 mg/g;纯化得到的乳黄色精制皂苷,其对乳腺癌细胞MCF-7的半抑制浓度IC50为29.57 g/ml,且呈剂量依赖性。结论刺五加皂苷具有很强的抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖作用。     

党参质量评价体系的建立及不同产地党参质量差异性分析

目的多点采样研究并建立党参质量评价体系,采用其对不同来源的党参进行质量差异性分析。方法对党参的总灰分、酸不溶灰分、醇溶性浸出物进行测定,采用HPLC-DAD对党参炔苷进行测定并建立HPLC指纹图谱;将指标与指纹图谱结合起来建立党参质量评价体系;用建立的质量评价体系对不同来源的党参样品进行质量评价。结果不同产地灰分和酸不溶灰分检测结果显示,符合《中国药典》2010年版标准;而不同来源党参炔苷量具有显著性差异;不同产地的党参指纹图谱具有9个共有峰,相关系数均在0.8以上,建立的指纹图谱可用于党参质量评价。结论本研究用多指标检测结合指纹图谱建立的党参质量评价体系可用于不同来源党参的质量评价及质量控制。     

中药材GAP认证准备过程中的生产质量管理体系建设

《中药材生产质量管理规范》(GAP)基地建设是一项系统工程,在实际生产中,中药材GAP认证准备过程存在很多盲点和问题,本文拟对其生产质量管理体系的建设进行探讨,并提出工作建议。作者总结了多个GAP基地认证准备过程中的经验,将GAP基地建设中的生产质量管理体系进行系统梳理,并对各项具体工作进行了概括和分类。将认证准备工作分为生产技术、质量管控、试验研究、基地管理、人员培训、文件档案等六大体系,并对每个体系内部所涉及的部门、人员、工作内容和流程、相应的软硬件进行探讨,以供同行借鉴和讨论,促进中药材GAP事业的发展和安全优质中药材的生产。栽培和产地加工过程中新方法、新技术的引入和应用,对相应的人员和关键生产技术的要求也逐步提高,对选地和品种的要求会更高,但生产操作会简化、成本会降低。鉴于目前中药材栽培中存在的连作障碍等问题,中药材的倒茬、间套作等配套技术需要逐渐探索和推广应用,要更加重视生产过程中对生态环境的保护。     

人参属植物转录因子调控的研究进展

人参属(Panax)植物作为中药材使用历史悠久,具有多种药理活性如补益、抗炎、抗肿瘤等,富含多种活性成分如皂苷、蛋白质、氨基酸、微量元素等。皂苷为人参属植物的有效成分,但因其含量较低且人参属植物生长环境逐渐恶劣,导致能利用的皂苷难以满足药用等需求。近些年来,基因工程技术被广泛用于提高植物中有效成分含量,目前关于皂苷合成途径虽已被阐明,但有多个合成酶及合成步骤难以确定。因此,通过转录因子来调节基因表达量促进人参皂苷的合成具有重大的研究意义。该文综述了人参皂苷物质合成相关转录因子的调控研究进展,以期为后续的人参皂苷研究和人参属植物皂苷资源开发提供理论基础。     

丹参DNA提取方法的优化

针对药用植物丹参含有较多的多酚类、醌类等水溶性次生代谢物，在提取DNA时易发生共沉淀而很难除去等问题，设计双蒸水预洗不同次数和活性碳吸附杂质等处理，对CTAB和SDS两种DNA提取方法进行了系统优化。研究得出，采用2％的CTAB提取液和双蒸水预洗一遍并且添加样品鲜重4％的活性碳于提取液中的提取方法最佳。不仅能除去多酚类、醌类等次生代谢物，而且去多糖、蛋白质效果良好，所获DNA纯度高；RAPD-PCR实验结果稳定清晰可靠。     

氮、磷、钾预防柴胡根腐病初步研究

在本试验条件下,施用氮、钾肥都显著降低了柴胡对根腐病的抗性。施中低量磷肥时,柴胡对根腐病的抗性降低,但大量施用磷肥可降低柴胡根腐病的病情指数。柴胡得到较佳的产量时,其施肥措施并未增强柴胡对根腐病的抗性。从预防柴胡根腐病的角度,在第二年拔节前应多施磷肥,适量施用氮钾肥。     

丹参规范化种植技术研究

通过田间试验和室内盆栽实验，掌握了丹参生长发育、需水、需肥和病虫害发生规律。制定实施丹参SOP，对丹参生产过程实施监控，基本可以达到“优质、安全、稳定、可控及无污染”之目标。结论：通过实施GAP和执行SOP，完全可以保证药材质量。     

丹参规范化种植技术研究

通过田间试验和室内盆栽实验,掌握了丹参生长发育、需水、需肥和病虫害发生规律。制定实施丹参SOP,对丹参生产全过程实施监控,基本可以达到“优质、安全、稳定、可控及无污染″之目标。结论:通过实施GAP和执行SOP,完全可以保证药材质量。     

丹参雄性不育与可育近等基因系差异片段的发掘

利用雄性不育系培育新品种和生产杂种一代,在产量、品质等方面均具有独特优势。前期课题组已通过多代连续杂交获得丹参雄性不育与可育近等基因系。该文在前期工作基础上采用AFLP和BSA技术对378对引物进行筛选,发现7对引物和26个标记与丹参育性调控基因紧密连锁,由此构建出连锁遗传图谱。以前期发现的E11/M4-208标记为模板,运用染色体步移技术,在不育和可育系中分别扩增出2 028,2 027 bp的差异片段,发现4个突变碱基位点均处于内含子中。在所有差异标记中发现E01/M09-418,E05/M13-308,E05/M04-750,E01/M01-204 4个与丹参育性调控基因紧密连锁的标记,与拟南芥1,3,5号染色体相似性达100%。其中与育性调控基因距离很近(2.1 c M)的E01/M09-418与同处于拟南芥第3号染色体的核不育基因MS2相似度高达100%。不育系中获得的2 028 bp片段与MS2基因在两处相似度达100%。与拟南芥第5号染色体相似度100%的E05/M04-750,与杨树POP085-M05基因和拟南芥中低亲和力钙逆向转运蛋白序列具有较高相似性,且E非常低。该文遗传图谱的构建和功能性差异序列的发现,为后续准确锚定丹参基因组中育性调控基因及揭示其功能奠定了坚实基础。     

干燥方法和提取温度对板蓝根、大青叶有效成分的影响

目的 研究干燥方法 和提取温度对板蓝根、大青叶有效成分量的影响,为确定板蓝根、大青叶规范化生产的干燥技术参数提供理论依据.方法 采用晒干、阴干和不同温度的烘干方法 干燥板蓝根、大青叶,采用不同温度水浴提取有效成分,HPLC法测定靛蓝、靛玉红的量.结果 6 0℃烘干板蓝根、大青叶有效成分损失最少,以60℃烘干为标准,高温(90℃以上)干燥使板蓝根有效成分损失40%～60%、大青叶有效成分损失30%-60%,阴干也降低了板蓝根、大青叶中的有效成分的量;采用索氏提取法、以氯仿为提取溶剂、水浴温度为80～85℃时对靛蓝、靛玉红的提取率最高,其次是90、75℃,95℃的提取率最低.结论 50～80 ℃烘干和晒干是板蓝根、大青叶适宜的干燥方法 ,阴干和高温烘干的方法 不可取.采用索氏提取方法 、以氯仿为提取溶剂时,80～85℃水浴温度较为适宜.