MIP-1β基因修饰增强肿瘤相关抗原致敏树突状细胞的抗肿瘤免疫效果

目的:探讨通过增强树突状细胞(dendritic cells,DC)与T细胞的相互作用来进一步增强DC介导的抗肿瘤免疫效果.方法:体外培养的小鼠骨髓DC体外经携带人MIP-1β基因的重组腺病毒(adenovirus expressing human macrophoge inflammatory protein-1 beta,AdhMIP-1β)转染后(MIP-1β-DC),用小鼠CT26结肠腺癌细胞相关抗原冲击致敏,然后免疫正常同系小鼠,观察其体内诱导的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的保护性免疫反应;通过体内阻断试验探讨免疫细胞亚群及免疫分子在DC诱导抗肿瘤免疫应答中的作用.结果:经抗原致敏的MIP-1β-DC能更有效地诱导特异CTL活性,能使免疫动物产生更有效的免疫保护作用,抵抗肿瘤细胞的攻击.通过对其抗肿瘤免疫机理的分析发现,CD4 、CD8 T细胞共同参与了经抗原致敏的MIP-1β-DC介导的抗肿瘤免疫反应,是主要的抗瘤效应细胞,NK细胞作用不明显.结论:通过基因修饰增强树突状细胞对T细胞的体内趋化活性,能更有效地诱导抗肿瘤免疫反应,为树突状细胞介导的肿瘤免疫基因治疗开辟了新的途径.     

板蓝根组酸活性单体-5b逆转肝癌细胞耐药的实验研究

目的：研究板蓝根组酸活性单体-5b对肝癌耐药细胞BEL-7404／ADM逆转作用及机制。方法：利用BEL-7404细胞的多药耐药模型BEL-7404／ADM，应用MTT法、免疫组化法和高效液相色谱法(HPLC)观察板蓝根组酸活性单体-5b对BEL-7404／ADM多药耐药逆转。结果：板蓝根组酸活性单体-5b能降低肝癌耐药细胞BEL-7404／ADM对ADM的耐药性，细胞MDR，p—gp的表达改变不明显，其细胞内ADM的含量明显增高。结论：板蓝根组酸活性单体-5b能逆转肝癌耐药细胞BEL-7404／ADM对ADM的耐药性，其逆转作用可能与降低P-gP药物外排功能、增加细胞内药物浓度有关。     

骨折后保守还是手术？

随着人民生活水平的提高，汽车逐渐成了上班族的代步工具，因而交通事故急剧增多，受伤者大都伴有各种各样的骨折。同时我国正逐渐进入老龄化社会，老年人由于骨质疏松、反应力下降也常常会发生意外，导致骨折。治疗时，针对同一骨折，不同的医生有时会给出不同的治疗方案，有的建议手术治疗，有的建议保守治疗，常常使患者无所适从。那么，骨折后究竟该如何治疗呢？     

Langerhans细胞组织细胞增生症术后复发1例报告

Langerhans细胞组织细胞增生症（Langerhans cell histiocytosis，LCH）是一种Langerhans细胞（LC）克隆性增生引起的疾病，界于良恶性肿瘤之间，多见于儿童，成人少见。我们曾收治1例成人LCH，现报告如下。     

一种新的重组腺病毒载体pAdBM5-GFP-mAFP的构建

 目的 构建表达小鼠甲胎蛋白（murine alpha fetoprotein，mAFP）基因的重组腺病毒载体pAd—BM5-GFP-mAFP，并测定其滴度。方法 从Hepal-6小鼠肝癌细胞中提取总RNA，设计特异性引物，通过RT-PCR法扩增mAFP基因，测序确认后，插入到pAdBM5-GFP穿梭载体中，双酶切鉴定重组腺病毒载体。线性化重组腺病毒载体与病毒骨架DNA质粒用磷酸钙共沉淀法共转染HEK293A细胞，通过同源重组使腺病毒表达mAFP基因，并在HEK293A细胞中大量扩增含目的基因的重组腺病毒，用TCBn法测定重组腺病毒滴度。结果 成功克隆了小鼠mAFP基因，构建出表达mAFP基因的重组腺病毒载体pAdBM5-GFP-mAFP，获得了表达mAFP基因的重组腺病毒，病毒滴度达3．2×10^8PFU／ml。结论 本研究成功构建了pAdBM5-GFP-mAFP载体，获得了高滴度表达mAFP基因的重组腺病毒，为进一步开展肝癌的免疫基因治疗奠定了基础。     

以树突状细胞为基础的肝癌免疫基因治疗

随着树突状细胞疗法的兴起和应用，很多学者在不同的动物模型上研究了应用负载肝癌抗原的树突状细胞瘤苗治疗肝癌的途径、效果及机制，并应用于临床治疗肝癌，取得了较好疗效，为肝癌的综合治疗及预防肝癌术后转移复发提供新的途径。     

人巨噬细胞炎性蛋白-1β基因修饰肿瘤细胞的体内致瘤性和瘤苗效果

目的 探讨人巨噬细胞炎性蛋白-1β(hMIP-1β)基因修饰小鼠结肠腺癌CT26细胞的致瘤性和瘤苗免疫效果.方法 通过重组腺病毒载体介导,将hMIP-1β基因导入CT26细胞中,X-gal染色法检测基因转染效率;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测hMIP-1β基因修饰CT26细胞培养上清中hMIP-1β的含量;采用Boyden趋化小室法检测培养上清对CD4+ T细胞、CD8+ T细胞、NK细胞和未成熟树突状细胞(imDC)的趋化作用.BALB/c小鼠皮下接种hMIP-1β基因修饰的CT26细胞,观察其体内致瘤性的改变和对免疫细胞的趋化作用;制备hMIP-1β基因修饰的CT26细胞瘤苗并免疫BALB/c小鼠,观察其诱导免疫细胞的杀伤活性和保护性免疫反应.结果 腺病毒载体可介导hMIP-1β基因转染CT26细胞和表达,X-gal染色的阳性率可达95.0%以上.在培养上清中hMIP-1β水平为980 pg/ml细胞,并对CD4+ T细胞、CD8+ T细胞、NK细胞和imDC有显著的趋化作用,与转染对照基因LacZ的CT26细胞及野生型CT26细胞比较,差异有统计学意义(P＜0.01).体内致瘤实验显示,hMIP-1β基因修饰的CT26细胞皮下接种后,成瘤率降低,肿瘤生长速度减慢,肿瘤内可见明显坏死灶,坏死灶内和周围可见较多淋巴细胞浸润.hMIP-1β基因修饰的CT26细胞瘤苗免疫小鼠能有效诱导肿瘤特异性CTL活性和非特异性NK活性,产生明显的免疫保护作用,可抵抗肿瘤细胞的再攻击.结论 hMIP-1β基因修饰的CT26细胞致瘤性显著下降,其瘤苗可诱导强烈的抗肿瘤免疫反应,提示hMIP-1β基因修饰瘤苗有望成为更有效的抗肿瘤免疫治疗手段.     

KAI1／CD82与肝癌关系的研究进展

KAI1／CD82为肿瘤转移抑制基因，定位于11P11．2-13，属于TM4SF家族成员，主要影响细胞间及细胞与细胞外基质的信号传导。KAI1／CD82表达下调与肝细胞癌浸润转移相关。     

不同化疗药对人肝癌细胞BEL-7404端粒酶活性的影响

目的观察几种常用化疗药物对人肝癌BEL-7404细胞端粒酶活性的影响。方法利用端粒重复扩增实验(TRAP)结合非常性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法,测定BEL-7404细胞经过多种化疗药物(顺铂、阿霉素、丝裂霉素、长春新碱)不同浓度和时间作用后端粒酶活性的变化。结果当各种药物大剂量处理细胞24 h后再去除药物,顺铂对端粒酶的活性完全抑制,丝裂霉素有部分抑制,阿霉素和长春新碱无抑制作用;小剂量药物处理细胞3d,其结果同大剂量相似。结论高浓度顺铂和丝裂霉素C在短时间内或低浓度长时间作用对人肝癌BEL-7404细胞端粒酶活性有显著抑制作用,抑制作用可能与药物的作用浓度和时间有关。     

外科治疗肝癌230例临床分析

我科自1985年6月至1990年6月共收治临床诊断为原发性肝癌(下称肝癌)病人389例。剖腹探查230例。现分析如下。