p16及p27基因与原发性肝癌的关系

细胞周期是指连续分裂的细胞从一次有丝分裂结束到完成下一次有丝分裂所经历的整个连续过程，主要经过G1、S、G2、M期4个阶段。最新研究表明，细胞周期素(eyclin)和细胞周期素依赖蛋白激酶(CKIs)是eyelin-CDKs复合物的抑制因子，主要起负性调控。CKIs基因家族按结构和功能的不同分两类：一类为Ink4(Inhibitor of CDK4)。包括P15、P16、P18和P19，这些基因均具有4个回纹状     

肿瘤抗原致敏树突状细胞诱导机体产生抗肿瘤作用的实验研究

目的：探讨肿瘤抗原冲击致敏的树突状细胞（Dc）诱导机体产生的特异性抗肿瘤作用。方法：体外培养的小鼠骨髓树突状细胞用小鼠结肠腺癌细胞株CT26细胞抗原冲击致敏；混合淋巴细胞反应检测肿瘤抗原致敏DC刺激同基因型T淋巴细胞增殖的能力；观察小鼠经皮下免疫肿瘤抗原致敏DC后诱导产生肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）和抵抗CT26细胞再攻击的能力。结果：肿瘤抗原致敏DC能有效刺激同基因型T淋巴细胞增殖反应；小鼠经肿瘤抗原致敏DC免疫后可诱导强烈的CT[，杀瘤活性，产生免疫保护作用，能有效抵抗CT26细胞再攻击，肿瘤生长明显减缓，与未经抗原致敏DC免疫的小鼠组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：肿瘤抗原致敏的DC能有效诱导机体产生特异性的抗肿瘤作用。     

不同化疗药对人肝癌细胞BEL-7404端粒酶活性的影响

目的观察几种常用化疗药物对人肝癌BEL-7404细胞端粒酶活性的影响。方法利用端粒重复扩增实验(TRAP)结合非常性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法,测定BEL-7404细胞经过多种化疗药物(顺铂、阿霉素、丝裂霉素、长春新碱)不同浓度和时间作用后端粒酶活性的变化。结果当各种药物大剂量处理细胞24 h后再去除药物,顺铂对端粒酶的活性完全抑制,丝裂霉素有部分抑制,阿霉素和长春新碱无抑制作用;小剂量药物处理细胞3d,其结果同大剂量相似。结论高浓度顺铂和丝裂霉素C在短时间内或低浓度长时间作用对人肝癌BEL-7404细胞端粒酶活性有显著抑制作用,抑制作用可能与药物的作用浓度和时间有关。     

负载肿瘤抗原的树突状细胞疫苗诱导CTL的抗肿瘤效应

目的:探讨负载肿瘤抗原的树突状细胞(DC)疫苗诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的体外杀瘤作用及对荷瘤小鼠的治疗作用.方法:体外培养的小鼠骨髓树突状细胞用小鼠结肠腺癌细胞株CT26细胞抗原冲击致敏制备负载肿瘤抗原的DC疫苗;负载肿瘤抗原的DC疫苗激活同源T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL),采用乳酸脱氢酶(LDH) 4 h释放法检测CTL在体外对CT26细胞的杀伤活性;建立CT26荷瘤小鼠模型,应用CTL治疗荷瘤小鼠,观察肿瘤大小和小鼠存活期.结果:负载CT26肿瘤抗原的DC疫苗能够诱导T细胞增殖分化为肿瘤特异CTL,该CTL对CT26细胞有高效而强烈的杀伤作用,杀伤率为(83.95±11.25)%,而对B16细胞、3LL Lewis 细胞无明显杀伤作用,杀伤率分别为(12.75±5.36)%和(11.38±4.57)%.应用CTL治疗荷瘤小鼠能显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,延长荷瘤小鼠存活期.结论:负载肿瘤抗原的DC疫苗能够诱导高效而特异的CTL杀瘤活性并能治疗荷瘤小鼠.提示负载肿瘤抗原的DC疫苗诱导的CTL可能在肿瘤的免疫治疗中发挥重要作用.     

中药制剂消癌胶囊对恶性肿瘤T细胞亚群的影响

药物治疗肿瘤是目前治疗恶性肿瘤的主要手段之一.应用天然药物抗肿瘤已经为世界所瞩目.消癌胶囊是广西肿瘤防治研究所根据传统的中医理论研制开发的一种纯中药抗癌制剂,具有益气活血,祛瘀止痛,破症结之功能,临床应用可抑制肿瘤生长,缩小肿块,缓解癌性疼痛,提高放、化疗效果[1].本文着重观察消癌胶囊对恶性肿瘤患者T细胞亚群的影响,现将研究结果报告如下.     

CD3 AK细胞与IL－2联用治疗癌性胸腹腔积液的临床研究

目的 :探讨 CD3AK细胞与 IL- 2联用对癌性胸腹腔积液的治疗效果。方法 :将 2 4例癌性胸腹腔积液患者分为两组 ,研究组 12例 ,应用 CD3AK细胞与 IL- 2直接胸腹腔灌注 ,每周 3次 ,连续 2～ 3周 ;对照组 12例 ,单用 IL- 2灌注治疗 ,疗程同研究组。结果 :研究组与对照组的有效率分别为 6 6 .7%和 2 5 % ,两者比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;研究组的细胞免疫功能较对照组明显提高 (P <0 .0 5 )。结论 :CD3AK细胞与 IL- 2联用能有效地促进癌性胸腹腔积液的吸收 ,提高机体免疫功能 ,是治疗癌性胸腹腔积液的有效手段     

以树突状细胞为基础的肝癌免疫基因治疗

随着树突状细胞疗法的兴起和应用，很多学者在不同的动物模型上研究了应用负载肝癌抗原的树突状细胞瘤苗治疗肝癌的途径、效果及机制，并应用于临床治疗肝癌，取得了较好疗效，为肝癌的综合治疗及预防肝癌术后转移复发提供新的途径。     

MIP-1β基因修饰增强肿瘤相关抗原致敏树突状细胞的抗肿瘤免疫效果

目的:探讨通过增强树突状细胞(dendritic cells,DC)与T细胞的相互作用来进一步增强DC介导的抗肿瘤免疫效果.方法:体外培养的小鼠骨髓DC体外经携带人MIP-1β基因的重组腺病毒(adenovirus expressing human macrophoge inflammatory protein-1 beta,AdhMIP-1β)转染后(MIP-1β-DC),用小鼠CT26结肠腺癌细胞相关抗原冲击致敏,然后免疫正常同系小鼠,观察其体内诱导的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的保护性免疫反应;通过体内阻断试验探讨免疫细胞亚群及免疫分子在DC诱导抗肿瘤免疫应答中的作用.结果:经抗原致敏的MIP-1β-DC能更有效地诱导特异CTL活性,能使免疫动物产生更有效的免疫保护作用,抵抗肿瘤细胞的攻击.通过对其抗肿瘤免疫机理的分析发现,CD4 、CD8 T细胞共同参与了经抗原致敏的MIP-1β-DC介导的抗肿瘤免疫反应,是主要的抗瘤效应细胞,NK细胞作用不明显.结论:通过基因修饰增强树突状细胞对T细胞的体内趋化活性,能更有效地诱导抗肿瘤免疫反应,为树突状细胞介导的肿瘤免疫基因治疗开辟了新的途径.     

乙肝病毒HBx基因荧光真核表达质粒的构建与鉴定

目的：克隆乙肝病毒HBx基因及构建增强型绿色荧光蛋白-HBx基因（pEGFP—N1-HBx）荧光真核表达质粒并进行表达鉴定。方法：以CH—HEP-1肝癌细胞株基因组DNA为模板PCR法扩增HBx基因,PCR产物测序分析正确后克隆至真核表达载体pEGFP—N1,命名为pEGFP—N1-HBx。将该质粒转染肝细胞株HepG2以RT-PCR及荧光显微镜检测其表达情况。结果：酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含HBx基因,RT-PCR检测和荧光显微镜观察表明构建的pEGFP—N1-HBx在肝癌细胞株HepG2真核细胞中表达,且其绿色荧光蛋白瞬时表达率为20％～30％。结论：HBx基因克隆及其真核表达载体pEGFP—N1-HBx构建成功,可用于肝癌发生发展的生物学研究。