大鼠agrin基因实时定量聚合酶链反应的检测方法

目的：agrin基因对神经肌肉接l头的形成、维持起着决定作用，也对神经元轴突的形成、延长、维持有重要作用．其表达产物在机体内分布广泛。设计绝对定量嵌合荧光法检测大鼠agrin基因mRNA的实时定量聚合酶链反应方法，并检测其特异性、敏感性和可重复性。 方法：实验于2007—04／11在吉林大学基础医学院三综合实验室和吉林大学第一医院传染科实验室完成。以Primer 3软件设计大鼠agrin基因、ACTB基因mRNA嵌合荧光实时定量聚合酶链反应检测引物，经检索Blast验证特异性，并以Primer5设计构建agrin基因标准品引物。选择清洁级Wistar大鼠交配，获取3日龄乳鼠，取脑，获取mRNA、cDNA，常规反转录一聚合酶链反应获取agrin554个碱基DNA片断。PCR填加T7启动子后，T7 RNA Polymerase合成agrin基因标准品，消化模板。分光光度计测定其浓度，1：5倍比稀释3次；经反转录反应合成agrin基因cDNA标准品，测序验证特异性。以ACTB引物反转录cDNA，1：5倍稀释3次，构建ACTB基因标准品。常规聚合酶链反应确定、优化反应条件。标准曲线确定实时定量聚合酶链反应标准曲线的相关性，融解曲线验证检测方法的特异性，作重复性检测。 结果：①agrin基因有意义链引物序列：GAA GGC CAG GTG CGA ATC A，反义链引物序列：CAC AGG TAG CAG TGG AGC CAA G，内标：ACTB基因有意义链引物序列：GGA GAT TAC TGC CCT GGC TCC TA，反义链引物序列：GAC TCA TCG TAC TCC TGC TTG CTG，优化反应条件：95℃变性5S，60℃退火20S，72℃延伸20s。②agrin基因、ACTB基因标准品所获得的标准曲线确定实时定量聚合酶链反应标准曲线的相关性均〉0．95。③聚合酶链反应产物电泳、测序、实时定量聚合酶链反应融解曲线证明特异性高、重复性好、灵敏度达到精确定量要求。 结论：绝对定量嵌合荧光法检测大鼠agrin基因mRNA的实时定量聚合酶链反应方法可以作为大鼠agrin基因mRNA检测的标准方法。     

带血管蒂胸骨翻转术治疗漏斗胸

本文报告以带腹壁上动脉腹直肌蒂胸骨翻转术治疗漏斗胸3例的临床经验。其中2例为对称性,1例为非对称性的漏斗胸,效果均好。由于有腹壁上动脉与胸廓内动脉相连续维持正常血运,则保证了翻转后胸骨及胁骨的发育成长。     

两种ELISA试剂与TRFIA法HBsAg检测结果比较

目的比较不同ELISA试剂与时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）对HBsAg的检测能力。方法对TRFIA法HBsAg阳性样本112份和阴性样本174份,采用两种ELISA试剂作HBsAg平行检测,比较两种ELISA试剂和TRFIA法检测结果。结果 TRFIA阳性组112份样本,两种ELISA试剂检测均为阳性,TRFIA阴性组174份样本ELISA法共检出29份确认阳性,国产试剂1和进口试剂2阳性检出率分别为6.32%（11/174）和16.7%（29/174）,两种试剂检出率的差异有统计学意义（P〈0.05）,ELISA试剂2、试剂1和TRFIA法检测敏感性分别为100.0%、87.2%和79.4%。结论 ELISA仍然为HBsAg检测的可靠方法,其定性检测能力可优于TRFIA,但不同试剂存在明显差异。     

浅述藏医对麻风诊疗的认识

<正>藏医学是祖国医学宝库中的重要组成部分。具有较完整的医学理论,可操作的诊断治疗方法,是独具特色的民族医学体系,我国民族医学之首的藏医学对麻风临床的认识历史悠久,并随着实践的深入,认识不断日臻完善,形成自己独特的理论,在此作以简要介绍。1藏医对麻风的分类藏医对麻风以部位分有18种:根据患病部位分外皮、真皮、精气、色泽、气力、肌肉、脂肪、韧带、脉管、血液、黄水、骨骼、关节、软骨、大脑、骨髓、精液、五脏。     

延长的跗骨窦切口置入钢板内固定治疗Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨骨折

目的：探讨经延长的跗骨窦切口置入跟骨钢板内固定治疗SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折的临床疗效。方法自2013年3月至2015年4月,我院在原跗骨窦入路基础上采用切口延长的办法,置入钢板内固定治疗跟骨关节内骨折29例（37足）,其中男21例,女8例;年龄为19~55岁,平均30.3岁。骨折按Sanders分型：Ⅱ型26足,Ⅲ型11足。根据Essex?Lopresti分型,均为伴有明显移位的跟骨关节外骨折。将手术前后的跟骨高度、宽度、长度、B?hler角和Gissanes角进行比较,术后半年按Maryland足部功能评分系统评价疗效。结果本组29例均获得随访,随访时间为6~18个月,平均8.2个月。术后无切口并发症发生;骨折愈合时间为3~6个月,平均4.3个月。本组37足术前的跟骨高度、宽度、长度、B?hler角以及Gissanes角分别为（34.7±3.4）mm、（38.7±4.6）mm、（65.1±3.7）mm、20.9°±7.5°、99.5°±10.6°;术后1周时的各项数值分别为（38.1±2.2）mm、（33.4±2.7）mm、（67.8±4.5）mm、29.8°±4.7°、119.4°±8.4°;手术前后各项指标比较,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。术后半年随访时,采用Maryland足部功能评分系统对患足功能进行评价：优25足,良9足,可3足,优良率为91.9%。结论对于跟骨SandersⅡ、Ⅲ型骨折特别是合并跟骨关节外明显移位的骨折,经延长的跗骨窦切口置入跟骨钢板的内固定手术不仅可以获得充分的显露,准确的复位与固定,而且可早期手术并避免切口并发症,弥补了传统手术入路的不足,便于基层医院开展。     

分叶股前外侧肌皮瓣修复前臂组织缺损与功能重建

目的 设计分叶股前外侧肌皮瓣并初步临床用于修复前臂组织缺损与功能重建.方法 对2例前臂外伤后屈、伸肌群缺损的患者,设计分叶股前外侧肌皮瓣覆盖前臂皮肤和肌肉缺损,重建运动功能.结果 术后2例皮瓣全部存活,伤口Ⅰ期愈合,随访时间1例为6个月,1例为14个月.肌电图募集反应为单纯相和混合相,静息电位为正向电位和纤颤电位;1～5指指屈肌力恢复至2级1例,但不能抓握,不能对指;恢复至4级1例,可部分伸直掌指关节.结论 股前外侧肌的血管神经蒂长、恒定、粗大,可以制成分叶肌皮瓣,是覆盖肢体创面重建运动功能的良好选择.     

失功能动静脉内瘘二次手术后短期内使用体会

<正>动静脉内瘘是维持血液透析治疗的最常见血管通路,在日常中动静脉内瘘栓塞或狭窄而造成动静脉内瘘失功能,需要再次行动静脉内瘘成形术。期间通常需行深静脉穿刺建立临时血液透析通路,进行血液透析治疗,给患者带来额外的风险及痛苦。我院自2007年以来,因动静脉内瘘口栓塞或狭窄而造成动静脉内瘘失功能予二次动静脉内瘘成形术患者,利用动脉化静脉行二次动静脉内瘘成形术后第3天和第30天开始使用原动脉化静脉作为血管通路行血液透析治疗,探讨短时间使用     

保留胃窦部食管胃单层宽边吻合行贲门癌根治术39例分析

目的 探讨仅保留胃窦部采用食管胃单层宽边吻合法行贲门癌根治术的效果。方法 对我们于1990年9月至1999年3月39例食管胃单层宽边吻合法用于仅保留胃窦部的贲门癌根治术的有效性与存活率、生活质量进行回顾性讨论分析。结果 39例无1例发生吻合口瘘。存活率:1年36例(92.3％),3年16例(41.0％),5年10例(25.6％)。结论该术式并发症发生率低,近、远期效果好,存活率高,生活质量优于全胃切除术。     

连续性血浆滤过吸附治疗严重感染并多脏器功能障碍综合征的临床效果

目的 研究连续性血浆滤过吸附（CPFA）治疗严重感染并多脏器功能障碍综合征（MODS）的临床效果.方法 选择2011年1月～2013年12月本院ICU收治的48例患者,将患者随机分为观察组和对照组,每组各24例.在相同基础治疗的基础上,观察组给予CPFA联合高容量血液滤过（HVHF）治疗,对照组仅行HVHF治疗.观察患者的生命体征变化,行血、肾、血气常规检测,并检测治疗即刻、5h、10h的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、C-反应蛋白（CRP）水平,以评价治疗的安全性及临床疗效.结果 两组治疗后的生命体征、生化指标及APACHEⅡ评分比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;两组治疗即刻的TNF-α、IL-6、CRP水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,观察组治疗5、10 h的TNF-α、IL-6、CRP水平均显著低于对照组（P＜0.05）.结论 CPFA在降低致炎性细胞因子水平、提升抗炎/致炎因子水平方面的效果显著,对严重感染并MODS患者具有显著的临床意义,值得推广.